Методы контроля режима стерилизации. Контроль стерильности.
Вопрос 7
Культуральные свойства. Колония и её характеристики.
К.С. - свойства, характеризующие рост микроорганизмов на искусственных питательных средах
К культуральным (или макроморфологическим) свойствам относятся характерные особенности роста микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах. На поверхности плотных питательных сред, в зависимости от посева, микроорганизмы могут расти в виде колоний, штриха или сплошного газона.
Колонией называют изолированное скопление клеток одного вида, выросших из одной клетки (клон клеток). В зависимости от того, где растет микроорганизм (на поверхности плотной питательной среды или в толще ее), различают поверхностные, глубинные и донные колонии.
Колонии, выросшие на поверхности среды, отличаются разнообразием: они видоспецифичны и их изучение используется для определения видовой принадлежности исследуемой культуры.
Колонией - называют изолированное скопление клеток одного вида, выросших из одной клетки.
В зависимости от того, где растет микроорганизм (на поверхности плотной
питательной среды или в толще ее), различают
•Поверхностные
•Глубинные
•Донные колонии
При описании колоний учитывают следующие признаки:
| форму колонии | 1. округлая 2. амебовидная 3. ризоидная 4. неправильная |
| размер (диаметр) колонии | 1. очень мелкие (точечные) (0,1-0,5 мм) 2. мелкие (0,5-3 мм) 3. средних размеров (3-5 мм) 4. крупные (более 5 мм в диаметре); |
| поверхность колонии | 1. гладкая 2. шероховатая 3. складчатая 4. морщинистая |
| профиль колонии | 1. плоский 2. выпуклый 3. конусовидный 4. кратерообразный |
| Прозрачность | 1. тусклая 2. матовая 3. блестящая 4. прозрачная 5. мучнистая |
| цвет колонии (пигмент) | 1. бесцветная 2. пигментированная (белая, желтая, золотистая, красная, черная |
| край колонии | 1. ровный 2. волнистый 3. зубчатый 4. бахромчатый |
| структуру колонии | 1. однородная 2. мелко- или крупнозернистая 3. струйчатая |
| консистенцию колонии | 1. плотной 2. мягкой 3. врастающей в агар 4. слизистой (тянется за петлей) 5. хрупкой (легко ломается при соприкосновении с петлей). |
Глубинные колонии чаще всего похожи на более или менее сплющенные чечевички (форма овалов с заостренными концами), иногда комочки ваты с нитевидными выростами в питательную среду. Образование глубинных колоний часто сопровождается разрывом плотной среды, если микроорганизмы выделяют газ.
|
|
|
Донные колонии имеют обычно вид тонких прозрачных пленок, стелющихся по дну.
Особенности колонии могут изменяться с возрастом, они зависят от состава среды и температуры культивирования.
|
|
|
Вопрос 8
Метаболизм бактерий. Катаболизм, анаболизм.
Бактерии, как и все другие организмы, для существования и воспроизводства себе подобных нуждаются в постоянном обмене веществ с окружающей средой, а вещества, получаемые из окружающей среды, претерпевают ряд изменений внутри клетки. Все реакции, протекающие под воздействием ферментов и обеспечивающие клетку необходимыми веществами, составляют обмен веществ или метаболизм. Промежуточные или конечные вещества, образующиеся в соответствующей последовательности ферментативных реакций, называют метаболитами.
Метаболизм (обмен веществ) - бактерий представляет собой совокупность двух взаимосвязанных противоположных процессов катаболизма и анаболизма.
Катаболизм (диссимиляция) - распад веществ в процессе ферментативныхреакций и накопление выделяемой при этом энергии в молекулах АТФ.
Анаболизм (ассимиляция) - синтез веществ с затратой энергии.
Особенности метаболизма у бактерий состоят в том, что:
•его интенсивность имеет достаточно высокий уровень, что возможно обусловлено гораздо большим соотношением поверхности к единице массы, чем у многоклеточных;
|
|
|
•процессы диссимиляции преобладают над процессами ассимиляции;
•субстратный спектр потребляемых бактериями веществ очень широк – от углекислого газа, азота, нитритов, нитратов до органических соединений, включая антропогенные вещества - загрязнители окружающей среды (обеспечивая тем самым процессы ее самоочищения);
•бактерии имеют очень широкий набор различных ферментов - это также способствует высокой интенсивности метаболических процессов и широте субстратного спектра.
Ферменты бактерий по локализации делятся на 2 группы:
1) экзоферменты - ферменты бактерий, выделяемые во внешнюю среду и действующие на субстрат вне клетки (например, протеазы, полисахариды, олигосахаридазы);
2) эндоферменты - ферменты бактерий, действующие на субстраты внутри клетки (например, ферменты, расщепляющие аминокислоты, моносахара, синтетазы).
Синтез ферментов генетически детерминирован, но регуляция их синтеза идет за счет прямой и обратной связи, т.е. для одних - репрессируется, а для других - индуцируется субстратом. Ферменты, синтез которых зависит от наличия соответствующего субстрата в среде.
У бактерий различают три основные группы ферментов:
•Конститутивные - постоянно синтезирующиеся в микробных клетках.
|
|
|
•Индуцибельные - синтез которых индуцируется соответствующимсубстратом.
•Репрессибельные - синтез которых подавляется в результате избыточного накопления продукта реакции, катализируемой данным ферментом.
Изучают метаболизм бактерий с помощью физико-химических и биохимических методов исследования в процессе культивирования бактерий в определенных условиях на специальных питательных средах, содержащих то или иное соединение в качестве субстрата для трансформации.
Такой подход позволяет судить об обмене веществ путем более детального изучения процессов различных видов обмена (белков, углеводов) у микроорганизмов.
Вопрос 9
Методы контроля режима стерилизации. Контроль стерильности.
Контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов осуществляют физическим, химическим и бактериологическим методами.
1) Физический метод контроля работы стерилизаторов осуществляется с помощью изменения температуры, давления и времени стерилизации.
2) Химический метод контроля работы стерилизаторов осуществляется с помощью химических тестов и термохимических индикаторов, изменяющих свое агрегатное состояние и цвет при достижении определенного для него плавления (термоиндикаторная бумага изменяет свой цвет при температуре 180°С):
· для паровых стерилизаторов используется мочевина (карбамид) с розовым красителем температура плавления 132 градуса Цельсия
· бензойная кислота с фуксином — температура плавления 120°С; термоиндикаторная бумага, изменяющая свой цвет под воздействием определенной температуры (l20°C-130)
· для воздушных стерилизаторов: тиомочевина (тиокарбамид) без красителя, температура плавления 180°С, а также янтарная кислота, температура плавления которой 180°С
3) Бактериологический (биологический) метод контроля стерильности проводят один раз в месяц (биотестами). Контрольможет свидетельствовать об инфицировании стерилизуемых объектов и указать на вид микробной флоры. Результаты посевов получают через 48-72 часа
Примеры:
1) Физический контроль:
берется пробирка, куда насыпают какое-либо вещество, плавящееся при
температуре около 120 градусов - сера, бензойная кислота. Недостаток
этого способа контроля состоит в том, что мы видим, что порошок расплавился и, значит, необходимая температура была достигнута, но мы
не можем быть уверены, что она была такой на протяжении всего времени
экспозиции.
2) Химический контроль:
берут фильтровальную бумагу, помещают ее в раствор крахмала, после
чего погружают в раствор Люголя. Она приобретает темно-бурый цвет.
После экспозиции в автоклаве крахмал при температуре свыше 120
градусов разрушается, бумажка обесцвечивается. Метод имеет тот же
недостаток, что и физический контроль.
3) Биологический контроль:
берут образцы стерилизовавшегося материала и сеют на питательные
среды, не нашли микробов - значит все в порядке. Нашли микробы - значит
необходимо повторно провести стерилизацию.
Вопрос 10
Дата добавления: 2018-04-15; просмотров: 591; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!