Общее увеличение микроскопа равно произведению увеличения объектива на увеличение окуляра
Разрешающая способность микроскопа определяется размером наименьшего объекта, который можно увидеть в данный микроскоп. Для световых микроскопов разрешающая способность – 0,2 мкм, для электронного - в 2000 раз выше.
Системы микроскопии
сухая иммерсионная
-между объектом и объективом - между объектом и объективом-
находится воздух; жидкость (масло, вода);
- используется для изучения крупных - используется для изучения
биологических объектов (ботанических, микроорганизмов;
гистологических);
- максимальное увеличение объектива ´40 - увеличение объектива ´90;
Преимущества иммерсионной системы.Масляная системаза счет выравнивания показателей преломления света повышает уровень полезного увеличения микроскопа.
Фазово-контрастное устройство может быть установлено на любом микроскопе. Это система диафрагм, которая используется для превращения невосприимчивых человеческим глазом фазовых колебаний светового луча в амплитудные. Благодаря специальному приспособлению в объективе (фазовая пластинка) и в конденсоре (кольцевая диафрагма) эти объекты выглядят более темными (позитивный фазовый контраст) или более светлыми (негативный фазовый контраст) по сравнению с окружающей средой.
|
|
|
Темнопольная микроскопия.В основе лежит принцип рассеивания света мельчайшими взвешеннымичастицами в темном поле при боковом освещении (эффект Тиндаля).При темнопольной микроскопии в объектив попадают только лучи, рассеянные объектом, и не попадают прямые лучи от осветителя. Поэтому наблюдаемые микроорганизмы кажутся ярко светящимися на темном фоне.
Темнопольную микроскопию применяют для прижизненного изучения лептоспир, спирохет, а также микроорганизмов слишком мелких, чтобы их можно было различить при обычном светлопольном освещении. Для темнопольной микроскопии используют обычные объективы и специальные темнопольные конденсоры.
Люминесцентная микроскопия. Воснове лежит способность веществ и биологических объектов светиться при воздействии на них ультрафиолетовых лучей. Применяют специальные люминесцентные микроскопы или приспособления к обычным микроскопам. Так как большинство микроорганизмов не обладает собственной люминесценцией, то их предварительно окрашивают (флюорохромируют) сильно разведенными растворами специальных красителей (флюорохромы), которые связываются с определенными структурами клетки.
|
|
|
Люминесцентную микроскопию применяют также для выявления антигенов и антител. С этой целью используют метод иммунофлюоресценции (люминесцентно-серологический метод). Этот метод позволяет выявить в препарате микробы, содержащие определенные антигены. Для их обнаружения необходимо иметь антисыворотки, содержащие антитела к этим антигенам (к антисывороткам химическим путем присоединены молекулы флюоро-хромов - люминесцирующие сыворотки).На фиксированный препарат во влажной камере наносят люминесцирующую сыворотку, инкубируют, промывают раствором хлорида натрия, высушивают и рассматривают в люминесцентном микроскопе. Если в препарате есть микробы, содержащие антиген, антитела к которому были в люминесцирующей сыворотке, они ярко светятся. Остальные микробы не люминесцируют.
Электронная микроскопия.Изображение в электронном микроскопе образуется не с помощью световых лучей и стеклянных линз, а с помощью потока электронов, который фокусируется электрическим или магнитным полем. Разрешающая способность примерно в 2000 раз больше, чем светового (0,2 нм), и с его помощью можно увидеть даже крупные молекулы. Применение электронного микроскопа значительно расширило знания о вирусах, фагах и других микроорганизмах.
|
|
|
К работе № 3
Морфология грибов и методы их изучения
I. Грибы – эукариоты. Они имеют хорошо оформленное ядро, митохондрии и вакуоли. Грибная клетка содержит одно или несколько ядер. Клеточная стенка грибов состоит на 80-90% из полисахаридов (45% приходится на хитин) и 10-20% приходится на белки и липиды. Соотношение химических ингредиентов клеточной стенки грибов определяет их вирулентность. Строение клеточной стенки определяет выборантимикотических средств.
II. Выделяют 2 вида грибов: плесени и дрожжи.
1. Основа вегетативного тела плесневых грибов – мицелий, состоящий из ветвящихся гиф. У простейших грибов – зачаточный мицелий, представленный единичной клеткой с тонкими гифообразными отростками. У низших грибов (Mucor) – мицелий одноклеточный, обильно ветвящийся, со множеством ядер. У высших грибов (Penicillium, Aspergillus) мицелий разделен перегородками (септами) на отдельные клетки. Гифы плотно переплетаясь образуют ложную ткань. Мицелий гриба, погруженный в субстрат (питательная среда, ткани человека, животных) – вегетативный. Его функция – питание микроорганизма.
2. Более высоко организованными считаются дрожжи и дрожжеподобные грибы. У них мицелий отсутствует, тело в вегетативном состоянии представляет округлую клетку. Дрожжеподобные грибы образуют псевдомицелий. Он отличается от мицелия плесневых грибов тем, что не имеет общей оболочки и перегородок, а состоит из длинных клеток, образующихся путем последовательного бокового или концевого почкования.
|
|
|
3. Важнейшей особенностью грибов является диморфизм. Диморфизм – способность расти в 2 морфологических формах: дрожжевой или мицелиальной.
Трансформация гриба затрудняет диагностику.
Грибам присуще 3 типа размножения: вегетативное, бесполое, половое.
1) Вегетативное размножение.
На начальном этапе инфекционного процесса, когда необходимо быстро колонизировать поражаемую ткань, гриб размножается почкованием или частями мицелия. Наблюдается фрагментация гиф на отдельные клетки, каждая из которых дает начало новому организму.
При снижении влажности среды, исчерпании питательного субстрата (питательная среда, ткани человека и животных), многие грибы начинает «искать» новый источник питательных веществ и приступают к бесполому размножению.
2) Бесполое размножение осуществляется с помощью экзо- и эндоспор.
Для облегчения распространения споры выносятся над субстратом, формируя репродуктивный мицелий.
Большинство патогенных грибов размножаются экзоспорами или конидиями. Конидии образуются по бокам или на концах обычных, не специализированных гифахиз гифальных клеток, либо на специализированных конидиофорах. Морфологические особенности конидий лежат в основе классификации грибов.
Например: у мукора споры формируются эндогенно в специализированных органах – спорангиях, расположенных на вершине спорангиеносца. При разрыве спорангия споры высвобождаются, попадают в благоприятные условия и прорастают. У Aspergillaконидиеносцынесептированные, в форме лейки, у Penicilla – септированные в виде кисти рук.
При неблагоприятных условиях гриб формирует хламидоспоры. Хламидоспора – гифальная клетка увеличенных размеров, покрытая плотной оболочкой. Она необходима для сохранения гриба. Образование хламидоспор затрудняет лечение микозов.
3) Половое размножение. Оно дает преимущества грибам: возникают неидентичные особи, способные лучше адаптироваться к условиям обитания и осваивать новые экологические ниши.
Методы изучения
1. Микроскопический – изучение морфологических и тинкториальных свойств.
Препараты:
а) нативные.Для приготовления препаратов, берут волосы, соскобы кожи, обработанный щёлочью, материал помещают на предметное стекло в каплю глицерина. При микроскопии обращают внимание на строение мицелия и органов спороношения.
б) фиксированные (окрашенные).Для окраски мазков чаще всего используют простые методы окраски (метиленовый синий), а также методы Грама, Циля–Нильсена, Романовского-Гимза. Микроскопия окрашенных препаратов даёт возможность изучить строение мицелия и органов плодоношения, форму дрожжевых клеток. Окончательное заключение о видовой принадлежности гриба можно сделать только после исследования культуральных свойств.
2. Бактериологический – изучение культуральных, биохимических и антигенных свойств.
3. Кожно-аллергический – постановка кожной пробы.
4. Серологический – выявление титра антител.
5. Биологический - постановка биопробы на белых мышах.
Дата добавления: 2018-04-04; просмотров: 347; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!