Определение осмотической резистентности эритроцитов

Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)

Если кровь предохранить от свертывания (гемокоагуляция) и оставить на некоторое время в сосуде, то с течением времени в силу тяжести эритроциты осядут.

СОЭ характерна для каждого вида, пола, возраста животных (очень медленно СОЭ идет у крупного рогатого скота, овец и коз, умеренно быстро у свиней, очень быстро у лошадей) и зависит от состояния организма. При некоторых физиологических состояниях (например, беременность), аллергиях и при целом ряде заболеваний (туберкулез, анемия, гнойное воспаление и др.) СОЭ ускоряется. Поэтому определение СОЭ имеет важное диагностическое значение.

СОЭ зависит от скорости склеивания (агглютинации) эритроцитов. При этом образуются так называемые "монетные столбики". Агглютинация эритроцитов зависит от изменения отрицательного заряда (вследствие чего они отталкиваются друг от друга) на положительный. Электроположительный заряд сообщается эритроцитам за счет адсорбции (поглощения) на их поверхности грубодисперсных белков-глобулинов.

Ход работы Для определения СОЭ применяют прибор Панченкова. Прибор представляет собой штатив, в котором укреплены в вертикальном положении специальные капилляры, Капилляры градуированы в миллиметрах. Метка 0 стоит на расстоянии 100 мм от конца. На капилляре есть еще две метки: К (кровь) - на высоте куля и метка Р (реактив) - на уровне 50 мм.

Капилляр промывают 5% раствором цитрата (лимоннокислый натрий). Затем набирают цитрат до метки Р и выдувают его в чашку Петри. Затем, в этот же капилляр, двукратно набирают кровь животного до метки К. Обе порции крови смешивают с имеющимся в чашке Петри цитратом. Полученную смесь крови с цитратом (в соотношений 4:1) набирают в капилляр до метки О и ставят капилляр в штатив. Через час смотрят какова высота в миллиметрах образовавшегося верхнего столбика плазмы в капилляре. Его величина и является мерой СОЭ.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Крупный рогатый скот – 0,5-1,5; овцы, козы – 0,5-1; кролики – 1-2; куры – 2-3; собаки – 2-6; свиньи – 2-9; лошади – 40-70 мм/ч. Человек: мужчины – 3-9, женщины 7-12, новорожденные – 0,5, беременные – 45мм/ч.

Воспроизведение гемолиза

Гемолиз выход гемоглобина из эритроцитов через измененную оболочку в плазму. Гемолиз может происходить как в сосудистом русле, так и вне организма.

Виды гемолиза

1. Вне организма гемолиз может быть вызван гипотоническими растворами – осмотический гемолиз.

Изотонический (физиологический) раствор – раствор хлористого натрия (0,85-0,9% раствор NaСl), имеющий осмотическое давление, одинаковое с осмотическим давлением крови.

Эритроцит + физиологический раствор → эритроцит

Гипертонический раствор – раствор с более высоким осмотическим давлением, чем давление крови.

Эритроцит + гипертонический раствор→сморщивание  

                                                         (плазмолиз) эритроцита

Гипотонический раствор – раствор с более низким осмотическим давлением, чем давление крови.

Эритроцит + гипотонический раствор→эритроцит разбухает, оболочка разрушается, гемоглобин выходит в раствор

2. Механический гемолиз. Наблюдается при резком встряхивании, перемешивании крови.

3. Химический гемолиз. Возникает при действия кислот, щелочей, эфира, хлороформа. спирта, гемолизинов, которые вызывают денатурацию (свертывание) белков, разрушение липидов и нарушение целостной оболочки эритроцита.

4. Физический гемолиз. Низкая температура вызывает разрушение эритроцитов. Высокая - денатурацию белков оболочки эритроцитов.

5. Биологический гемолиз. Возникает при укусах ядовитых змей, скорпионов, множественных укусах пчел, при малярии, переливании несовместимой крови. В здоровом организме сосудистый гемолиз происходит лишь в печени, селезенке, красном костном мозге. Такой гемолиз не сопровождается появлением гемоглобина в плазме циркулирующей крови, Биологический гемолиз вызывает появление гемоглобина в плазме крови (гемоглобинемия) и выделение его с мочой (гемоглобинурия).

Воспроизведение гемолиза

В штатив ставят три пробирки: в 1-ю наливают 2 мл физ.раствора, во 2-ю - 2 мл физ.раствора и 5 капель нашатырного спирта, в 3-ю - 2 мл дистиллированной воды. Затем каждую пробирку добавляют по 2 капли крови и, слегка встряхивая пробирки, перемешивают их содержимое. При наличии гемолиза раствор в пробирке становится прозрачным с «лаковым» оттенком.

Определение осмотической резистентности эритроцитов

Осмотическая резистентность эритроцитов - свойство их противостоять разрушительному воздействию неблагоприятных факторов (физических, химических, механических и др.).

Сущность метода определения осмотической резистентностью эритроцитов заключается в определении устойчивости их к действию гипотонических растворов хлористого натрия. Осмотическая резистентность эритроцитов определяется той концентрацией раствора, при которой еще не наступает гемолиз.

Ход работы.

Раствор

№ пробирок

1 2 3 4 5
1% раствор NaCl, мл 1 3 5 7 9
Дистиллированная вода, мл 9 7 5 3 1
Всего, мл 10 10 10 10 10
Концентрация NaCl, % 0,1 0,3 0,5 0,7 0,9

В каждую из 5 пробирок с разной концентрацией растворов внести по 2 капли крови, поставить в штатив на 10-15 мин.

В пробирках №1 и №2 произойдет полный гемолиз, в пробирке №3 - частичный гемолиз (раствор окрашивается в слабо-розовый цвет, неразрушенные эритроциты оседают на дно). В пробирках №4 и №5 - гемолиз не произойдет. Через 60-90 мин эритроциты осядут на дно, раствор обесцветится. Из этого следует, что граница резистентности эритроцитов лежи в пределах между 0,5-0,7% раствором хлористого натрия.

Контрольные вопросы.

1. Каков механизм влияния различных факторов на СОЭ?

2. Как влияет на скорость оседания эритроцитов: увеличение числа эритроцитов в «монетных столбиках» и увеличение содержания глобулинов в плазме крови?

3. Что такое гемолиз? Какие виды гемолиза существуют?

4. Какой механизм гемолиза в каждом из наблюдаемых Вами случаев?

5. Что такое осмотическая резистентность эритроцитов?

6. Как определяют осмотическую резистентность эритроцитов?

Литература

1. Г.И. Азимов, Д.Я. Криницин; Н.Ф. Попов Физиология с.-х. животных. – М.- 1958.

2. Большой практикум по физиологии человека и животных. / Под ред. Л.Л. Васильева, И.А. Ветюкова. – М. - 1954.

3. С.И. Гальперин Физиология человека и животных. Учебное пособие для студентов университетов и педагогических факультетов. – М. - 1970.

4. Физиология человека / С.А. Георгиева, Н.В. Белинина, Л.И. Прокофьева, Г.В. Коршунов, Е.Ф. Киричук, В.М. Головченко, Л.К. Токаева. – М.: Медицина. - 1981.

5 Физиология человека / Под ред. Г.И. Косицкого, 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1985. - 544 с.

6. Руководство к практическим занятиям по физиологии / Под ред. Г.И. Косицкого, В.А. Полянцева. – М.: Медицина, 1988.

7. Коробков А.В., Чеснокова С.А. Атлас по нормальной физиологии: Пособие для студ. мед. и биол. вузов / Под ред. Н.А. Агаджаняна. – М.: Высш.шк., 1986. - 351 с.

8. Георгиевский В.И. Практическое руководство по физиологии с.-х. животных. Учеб. пособие для с.-х. вузов. М.: Высш.шк. - 1976. - 352 с,

 

 

РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ

 

КАФЕДРА АНАТОМИИ, ФИЗИОЛОГИИ

И ХИРУРГИИ ЖИВОТНЫХ

 

Методика

практического занятия

по физиологии и этологии животных:

«Физиология крови»

План:


Дата добавления: 2018-02-28; просмотров: 2467; Мы поможем в написании вашей работы!




Мы поможем в написании ваших работ!