Количественный анализ
В основе количественного люминесцентного анализа лежит зависимость между интенсивностью флуоресценции Јл и концентрацией С исследуемого вещества (7).
Јл = К ∙ С
где К - коэффициент пропорциональности.
Линейная зависимость Јл от С наблюдается только для малых концентраций, меньших «пороговой».
Интенсивность флуоресценцш: определяют как визуально, так и с помощью специальных приборов.
При визуальном определении сравнивают интенсивности излучении анализируемого раствора со шкалой стандартных растворов.
При измерении интенсивности излучения с помощью флуориметров применяют метод построения градуировочного графика.
Количественные определения можно проводить путем титрования в
присутствии люминесцентных индикаторов, которые имеют преимущества перед обычными цветными индикаторами. Флуоресцентные индикаторы применяют для анализа мутных и окрашенных растворов, в которых трудно зафиксировать изменение цвета обычных индикаторов, например, для анализа вин, масел и др. Флуоресцентные индикаторы применяют в ничтожно малых количествах, что снижает погрешность титрования. Существуют различные виды флуоресцентных индикаторов. Наиболее широкое применение нашли металлофлуоресцентнье индикаторы, образующие
комплексы с титруемым ноном. Для повышения точности титриметрического метода целесообразно наблюдать интенсивность люминесценции не визуально, а с помощью флуориметра.
|
|
|
3.7. Применение люминесцентного метода для анализа
пищевых продуктов и с/х сырья
Люминесцентный анализ находит широкое применение при исслсдовании пищевых продуктов растительного и животного происхождения. Люминесцентный анализ подразделяют на качественный (сортовой) и количественный. Установлено, что начало гниения на ранней стадии бобов, белой и красной капусты, огурцов можно определить по изменению цвета и интенсивности флуореспенции. Люминесценция свежего, лежалого и портящегося зерна различна. Возможно применение данного метода анализа для контроля качества картофеля. Метод позволяет обнаружить некоторые заболевания и выявить клубни, поврежденные морозом. Подмороженныие клубни определяют по слабому белесовато-голубому свечению.
По цвету люминесценции устанавливают сорт муки: чем больше в ней отрубей, тем интенсивнее свечение.
Широко используют люминесцентный анализ для определения белков. Способность к люминесценции - общее свойство белковых веществ, которое обусловлено содержащимися в них ароматическими аминокислотами. Высокая чувствительность люминесценции позволяет изучать структурные и физико-химические превращения в белковой макромолекуле.
|
|
|
Подробно разработаны методы качественного и количесгвенного люминесцентного анализа для определения ряда витаминов.
Спектральные люминесцентные характеристики использованы для идентификации жиров. По изменению положения максимума спектров люминесценции жиров судят о степени их окислепия.
Благодаря низкому пределу обнаружения и простоте применяемой аппаратуры люминесцентный анализ успешно развивается и является одним из перспективных методов.
3.8. Аппаратура люминесцентного анализа
Большинство пищевых продуктов люминесцирует как в ультрафиолетовой, так и в видимой областях спектра. В качестве источника возбуждения люминесценции применяют ртутные и ртутно-кварцевые. лампы. Отечественная промышленность выпускает различные типы люминесцентных ламп и флуориметры. Широкое применение нашел лабораторный флуориметр ЭФ-ЗМА, предназначенный лля измерения концентрации флуоресцирующих растворов путем сравнения яркостей свечения исследуемого и эталонных растворов. Оптическая схема флуориметра представлена на рис. 3.2.
Свет (определенной длины волны λ = 350-480 нм) от ртутно-кварцевой лампы 1 проходит через отверстие диафрагмы 2, первичный светофильтр 3, линзы 4 и направляется на кювету с исследуемым веществом 5, вызывая его свечение. Свет флуоресцирующего раствора (длиной волны λ = 510-650 нм) попадает в систему линз 6, расположенных с двух сторон кюветы, проходит через вторичные светофильтры 7 и поступает на фотоэлементы 8. Фотоэлемент, преобразовывая световую энергию флуоресценции в злектрическую, подает ее на вход электронного усилителя. В анодной цепи электронного усилитеяя подключен гальвавометр, показания которого прямо пропорциональны концентрации вещества.
|
|
|
Рис. 3.2. Оптическая схема флуориметра ЭФ-3МА:
1 – кварцевая лампа; 2 – диафрагма; 3 – светофтльтр первичный; 4 – линзы;
5 – кювета с исследуемым раствором; 6 – линзы; 7 – вторичные светофильтры;
8 – фотоэлементы.
ХРОМАТОГРАФИЯ
Дата добавления: 2016-01-05; просмотров: 47; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!