Определение количества фага (титрование)
Титр бактериофага ___________________________________________________________
___________________________________________________________________________
Индекс бактериофага_________________________________________________________
___________________________________________________________________________
1. Титрование в жидкой среде по Аппельману. Принцип метода состоит в выявлении максимального разведения фаговой суспензии (титра), которое дает просветление (лизис) стандартного количества индикаторной культуры бактерий. Для этого в 10-кратные разведения исследуемой фаговой суспензии вносят одинаковые количества бактерий (около 250 млн/мл среды). Инкубируют в термостате 16-18 ч и определяют максимальное разведение, в котором имеется просветление. Титр выражают степенью разведения, напр. 108.
Определите титр бактериофага:
| Разведение фага | ||||||||||
| 10 -1 | 10 -2 | 10 -3 | 10 -4 | 10 -5 | 10 -6 | 10 -7 | 10 -8 | 10 -9 | 10 -10 | |
| Результат | - | - | - | - | - | - | + | + | + | + |
Титр бактериофага______________________
2. Титрование бактериофага по методу Грациа. 1,0 мл фага смешивают в пробирке с 0,5 мл бактериальной культуры и добавляют в эту же пробирку расплавленный МПА. Все содержимое выливают в чашку с МПА. Дают застыть верхнему тонкому слою и ставят в термостат. При встрече фага с бактерией, происходит лизис последней и образуется негативная колония фага. Такие негативные колонии затем подсчитывают для определения титра. Титром фага называют количество фаговых частиц в 1 мл препарата фага.
Определите количество негативных колоний в разведениях:
|
|
|
10 -4 ____________ 10 -5 __________ 10 -6_________
Индекс бактериофага _________ БОЕ/мл
Дата добавления: 2015-12-17; просмотров: 38; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!