Лабораторная диагностика кандидозов.

Дата « »______202__ Занятие № 10

Занятие 10. Тема: Патогенные грибы.

Самостоятельная работ студентов

Лабораторная диагностика эпидермомикозов .

1. Микроскопический метод – исследование материала от больного (пораженные волосы, ногти, чешуйки кожи) сцелью обнаружения мицелия гриба и спор. Для более четкого выявления элементов гриба производят просветление материала. Для этого на предметное стекло наносят каплю 20% едкой щелочи, в которую помещают пинцетом патологический материал и слегка подогревают над пламенем спиртовки, не доводя до кипения. Затем каплю накрывают покровным стеклом и микроскопируют, используя малое и большое увеличение.

При поверхностной и хронической трихофитии элементы гриба (в основном споры), цепочками располагаются внутри волоса по типу "эндотрикс". Границы волоса четкие, споры округлые, за пределы волоса не выходят, напоминая пробирку, заполненную горохом.

При инфилътративно-нагноительной трихофатии споры грибов располагаются цепочками снаружи волоса - "экзотрикс". Контуры волоса нечеткие, смазанные. При микроспории волос окружен чехлом из мозаично расположенных мелких спор, внутри волоса обнаруживаются фрагменты гриба в виде нитей мицелия и споры.

При эпидермофитии и рубромикозе элементы гриба (септированные нити мицелия, споры) содержатся в чешуйках кожи.

2. Микологический метод. Исследование проводится для установления родовой и видовой принадлежности возбудителя путем выделения чистой культура гриба и его идентификации на основании макро- и микроскопического строения. Производен посев патологического материала на агар Сабуро с добавлением антибиотиков. Посевы инкубированы при температуре 28⁰ С в течение 1-2 недель. Изучают культуральные свойства грибов, отмечая при описании внешнего вида колоний их вид, консистенцию, цвет. Колонии дерматофитов разнообразные: кожистые, пушистые, мучнистые, бугристо-складчатые в центре с радиальными бороздами по периферии у грибов рода Trichophyton, бархатисто-ворсистые у грибов рода Microsporum; сухие, порошковидные, бархатисто-ворсистые у грибов рода Epidermophyton. После осмотра колонии изучают при малом увеличении микроскопа или в стереомикроскопе. Отмечают наличие или отсутствие воздушного мицелия, расположение конидиеносцев, общее строение конидиеносного (спороносного) аппарата, расположнение спор.

Для первичной дифференциации грибов разработан агар CHROMс хромогенными субстратами, расщепляющимися ферментами грибов с образованием окрашенных соединений, в результате чего колонии различных видов грибов окрашиваются в разные цвета – красный, желтый, белый, кремовый, коричневый, черный и т.д. Патогенные грибы рост на агаре CHROM

3. Изучить препараты, используемые для лечения дерматомикозов: низорал, ламизил, гризеофульвин, препараты йода, миконазол, орунгал и др.

Лабораторная диагностика кандидозов.

1. Микроскопический метод. Промикроскопировать мазки из пораженных участков слизистой оболочки полости рта, окрашенные метиленовым синим, обратить внимание на форму, окраску клеток гриба, на наличие псевдомицелия и бластоспор (клетки-почки, находящиеся на перетяжках псевдомицелия) хламидоспор (споры с двойной оболочкой), гломерул (скопления бластоспор по ходу мицелия в местах его сочленения), вертицилл (мутовок боковых ветвлений).

По Граму грибы рода Candidaокрашиваются в темно-фиолетовый цвет, по Цилю-Нильсену - в синий с розово-желтыми включениями липидов, по Романовскому-Гимзе — в розовато-желтый цвет с темно-фиолетовыми включениями волютина и красным хроматиновым веществом.

3. Микологический метод. изучить характер роста грибов рода Кандида на сусло-агаре (колонии гриба гладкие, блестящие, сметанообразной консистенции или морщинистые, матовые). Произвести учет сахаролитических свойств дрожжеподобных грибов.

Выделение чистой культуры дрожжеподобных грибов производят на плотных средах (обычно среде Сабуро, сусло-агаре, Кандида-агаре или др.) с добавлением антибиотиков (пенициллин, стрептомицин и т.д.) для подавления роста сопутствующих бактерий. Через 2-3 дня культивирования при 30-37⁰ С образуются круглые, диаметром до 1 см, выпуклые сметанообразные гладкие колонии белого цвета с ровными краями и глубоким врастанием в среду ветвистого древовидного псевдомицелия.

определение чувствительности к антимикотическим препаратам

3. Серологический метод (выявление специфических антител в парных сыворотках крови больного кандидозом). Диагностически значимым считают нарастание титров антител в 4 раза и более.

· учет РСК с парными сыворотками больного кандидозом (7 и 17 дни болезни). Диагностикум - полисахаридная фракция грибов рода Кандида.

· учет РА с парными сыворотками крови больного кандидозом. В качестве антигена используют взвесь в изотоническом растворе хлорида натрия культуры гриба плотностью 2 млрд, микробных тел в 1 мл. Определить титр

4. Изучить препараты, используемые для профилактики, диагностики и лечения кандидоза:

· кандидозный антиген 2-х суточной культуры грибов рода Candida в изотоническом рас-гворе хлорида натрия,

· кандидозный антиген - спиртовой экстракт из культуры грибов Candida, применяется для постановки РСК и кожной аллергической пробы,

· антибиотики: нистатин, леворин, клотримазол, маконазол.

Аллергологический метод (преимущественно у больных висцеральным кандидозом) - постановка внутрикожной аллергической пробы со стандартным кандидозным аллергеном, представляющим взвесь клеток грибов, прогретую при 80⁰ С в течение 2 ч. Результаты реакции (гиперемия, папула) учитывают через 24 — 48 ч. В связи с широким распространением сенсибилизации к антигенам грибов аллергопроба имеет ограниченное диагностическое значение.

Генодиагностика - разработана ПЦР для инидикации видоспецифического фрагмента ДНК С. albicans.

Другие оппортунистические микозы: К возбудителям этих заболеваний относят условно-патогенные грибы родов Aspergillus ,Penicillium , Rhizopus , Rhiiomucor , Pneumo cystisи др. Они вызывают преимущественно у лиц с иммунодефицитом широкий спектр заболеваний, варьирующих по остроте, локализации, тяжести процесса и клиническим проявлениям, вплоть до системных инфекций, угрожающих жизни. В диагностике применяют методы, используемые при диагностике микозов.

Лабораторная диагностика плесневых микозов.

1. Микологический метод. Макро- и микроскопическое изучение культур плесневых грабов и на основании морфологических свойств определение их родовой принадлежности. При исследовании культуры мукоровой плесени обратить внимание на наличие несептированного мицелия, от которого отходит несептированный спорангиеносец с шаровидным расширением наверху - спорангием, который заполнен эндоспорами. У плесеней рода Aspergillus нити несептированного мицелия, переплетаясь друг с другом, образуют густую грибницу, от которой отходят одноклеточные конидиеносцы, заканчивающиеся веерообразным расширением (стеригмы со спорами - конидиями). У пеницилловых плесеней Penicillium от грибницы отходят септированные конидиеносцы, заканчивающиеся в виде кисточки из стеригм и конидий

Серологический метод:

· выявление антител с помощью РНГА в парных сыворотках крови больного аспергиллезом. Определить титр

Дата добавления: 2022-12-03; просмотров: 22; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

12 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!