Идентификация выделенной культуры.
- Изучают характер колоний (гладкие, выпуклые, с ровными краями колонии, окрашенные в красный цвет в результате разложения лактозы, с характерным металлическим блеском);
- Принадлежность выделенных микроорганизмов к патогенным эшерихиям устанавливают по антигенной структуре с помощью РА со смесью специфических эшерихиозных ОК- сывороток (изучают микроорганизмы из 10 лактозоположительных колоний); реакцию агглютинации на стекле с комплексной О-коли сывороткой (О-111, О-55, О-26)
- При положительном результате РА оставшуюся часть колонии пересевают уколом в столбик и штрихом на поверхность скошенной части среды Ресселя с целью накопления чистой культуры;
- Серотипирование выделенной культуры с типовыми О-коли сыворотками - определение О- серогруппы, (с типовыми О-коли сыворотками О-III, 0-55, О-26) Ставится ОРА с ОК сывороткой (или диагностическим иммуноглобулином) с живой культурой и развернутая РА с гретой культурой с целью определения специфического О-антигена и принадлежности к патогенным E. coli.
- Пересев в среды «пестрого» ряда для изучения биохимических свойств, посев для определения фаголизабильности, фаговара, колициногеновара. 
3. Ускоренной идентификации возбудителя в исследуемом материале применяют
прямой или непрямая РИФ.
4. Серологический метод является вспомогательным, направленным на обнаружение антител и их динамики в процессе инфекции (исследование парных сывороток) с помощью РА, РНГА, ИФА.
|
|
|
Биопрепараты для диагностики эшерихиозов:
типовые агглютинирующие 0-коли сыворотки 0-111,0-55, 0-26 и др. содержат
известные антитела для определения антигенных свойств микроорганизмов в реакции
агглютинации (определение серотипа).
Лабораторная диагностика бактериальной дизентерии.
Дизентерия — антропонозное инфекционное заболевание, вызываемое бактериями рода Shigella ,характеризующееся язвенным поражением толстого кишечника и общей интоксикацией организма.
| Классификация шигелл | |
| Виды шигелл | Серовары шигелл |
| Shigella dysenteriae | 1-12 |
| Shigella flexneri | 1a, 1b, 2a, 2b, 3a, 3b, 4a, 4b, 5,6, var X, var Y |
| Shigella boydii | 1-18 |
| Shigella sonnei | - |
Микроскопический метод при дизентерии не применяется ввиду морфологического сходства шигелл с другими энтеробактериями.
Бактериологический метод является основным методом лабораторной диагностики дизентерии.
Выделение возбудителя: Исследуемый материал засевают на среды Плоскирева и Эндо и на селенитовую среду для накопления.
Идентификация культуры. На второй день изучают характер колоний. Бесцветные лактозоотрицательные гладкие колонии шигелл пересевают на одну из полиуглеводных сред (Олькеницкого, Ресселя, Клиглера) для накопления чистой культуры.
|
|
|
На 3-й день учитывают характер роста на полиуглеводной среде, а также пересевают материал на дифференциальные среды (Гисса и др.) для биохимической идентификации выделенной культуры.
На 4-й день учитывают результаты биохимической активности.
| Биохимические свойства шигелл | |||||||
| Виды шигелл | Ферментация | индол | |||||
| глюкозы | лактозы | маннита | дульцита | ксилозы | орнитина | ||
| S. dysenteriae | к | - | - | - | - | - | - |
| S . flexneri | к | - | к | - | - | - | - |
| S . boydii | к | - | к | - | ± | - | - |
| S . sonnei | к | ± | к | к + | ± | к | + |
| Обозначения: «к» – ферментация субстрата с образованием кислоты, «+» - наличие признака, «-« - отсутствие признака, «±» - непостоянный признак. | |||||||
Определяют антигенную структуру выделенной культуры с помощью ОРА с целью ее идентификации до уровней вида и серовара.
Для серотипирования сначала ставят РА на стекле со смесью сывороток против преобладающих в данной местности видов и вариантов шигелл, а затем РА на стекле с монорецепторными видовыми сыворотками.
|
|
|
Определяют также чувствительность выделенной культуры к поливалентному дизентерийному бактериофагу и антибиотикам. С эпидемиологической целью определяют фаговар и колициновар выделенных шигелл.
Серологический метод. Для определения антител в крови больных дизентерией (обычно хронической формой) применяют РНГА с эритроцитарными шигеллезными диагностикумами. Диагностические титры: к шигеллам Флекснера у взрослых - 1:400, у детей до 3 лет - 1:100, у детей старше 3 лет - 1:200, к остальным шигеллам - 1:200. Реакцию ставят с парными сыворотками, диагностическое значение имеет нарастание титра антител в четыре и более раз.
Экспресс-методы при дизентерии - прямая и непрямая РИФ, реакция ко-агглютинации, ИФА, РНГА с антительными эритроцитарными диагностикумами для быстрого обнаружения шигелл в исследуемом материале (обычно в фекалиях), а также ПЦР.
Изучить биопрепараты, используемые для диагностики, лечения и профилактики бактериальной дизентерии
· агглютинирующие адсорбированные сыворотки к шигеллам Sh.dysenteriae, Sh.flexneri, Sh.boydii, Sh.sonnei. Используются для постановки реакции агглютинации при идентификации шигелл.
|
|
|
· дизентерийный бактериофаг таблетированный. Используется для профилактики и лечения дизентерии.
· диагностикумы эритроцитарные из шигелл Флекснера и Зонне. Используются для постановки РНГА при серодиагностике дизентерии.
• вакцина дизентерийная ШИГЕЛЛВАК, из липополисахарида шигелл Зонне.
Дата добавления: 2022-12-03; просмотров: 45; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!