Изучите и отметьте в таблице в своих тетрадях, какой конкретно материал исследуют при эшерихиозах и шигеллезе.



ИНСТРУКЦИЯ К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ №12

 

ТЕМА: «Изучение условно-патогенных представителей семейства кишечных бактерий»

 

Задачи:

· Изучить методы выявления эшерихий

· Изучить методы выявления шигелл

· Закрепить навык работы с микроскопом

 

ЗАДАНИЕ № 1

Изучите методы выявления эшерихий

     Эшерихии являются постоянными обитателями толстого кишечника человека. По структуре соматического О-антигена они подразделяются на 160 серологических вариантов, по оболочечному термолабильному антигену К – более чем на 90. Три биогруппы эшерихий болезнетворны, особенно для детей: энтеропатогенные, энтеротоксигенные, энтероинвазивные. В частности вызывают колиэнтериты, дизентериеподобные заболевания, холероподобные гастроэнтериты, воспалительные процессы мочевыводящих путей. Патогенные штаммы кишечной палочки могут вызывать также нагноительные процессы и пищевые токсикоинфекции.

     При заболеваниях, вызванных эшерихиями в лабораторию доставляется следующий материал: испражнения, рвотные массы, гной, отделяемое слизистой оболочки зева и носа, при сепсисе – кровь, промывные воды, смывы с рук обслуживающего персонала, воздух палат, при токсикоинфекции – остатки пищи.

Подготовительный этап:

1. Подготовить рабочее место согласно правил работы в бактериологической лаборатории.

2. Подготовить емкости с дез. растворами для обеззараживания предметов, используемых в процессе работы, согласно инструкции.

 

 

Основной этап:

1. Бактериологическое исследование.

Материалы (исключая кровь) высевают у постели больного на среду Эндо и помещают в термостат при 370С. Инкубации в термостате в течение 18-24 часа.

Эшерихии растут на простых и дифференциально-диагностических средах. На пластинчатом питательном агаре эшерихии формируют круглые с ровными краями, выпуклые, влажные полупрозрачные колонии, на дифференциально-диагностических средах вследствие разложения лактозы – цветные (красные с металлическим блеском – среда Эндо). Они ферментируют с образованием кислоты и газа многие углеводы. Протеолитическая активность эшерихий умеренная.

 

2. Серологическое исследование.

Через 18-24 часа инкубации в термостате отбирают 10 интенсивно – красных лактозоположительных колоний кишечных палочек и агглютинируют на стекле в поливалентной сыворотке, содержащей антитела к деарейным сероварам. Агглютинирующиеся колонии пересевают на среду Олькеницкого (для изучения способности ферментировать мочевину и продуцировать сероводород). На заключительном этапе лабораторной диагностики ставят развернутую реакцию агглютинации (РА) в специфической сыворотке. При выявлении агглютининов в сыворотках больных используется реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), с помощью которой определяют О-антитела у больных колиэнтеритом.

3. Биологическое исследование. Для полной характеристики диарейных эшерихий определяют также их вирулентность: интраназальное заражение мышей и др.

ЗАДАНИЕ № 2

Изучите методы выявления шигелл

     Дизентерия - инфекционное заболевание, характеризующееся интоксикацией организма, поносами с болезненными спазмами промой кишки. Вызывается 4 видами шигелл (Зонне, Флекснера, Бойди, дизентерии).

     При заболеваниях, вызванных шигеллами в лабораторию доставляется следующий материал: испражнения.

1. Бактериологическое исследование

Основным методом, подтверждающим диагноз дизентерии является получение чистой культуры шигелл и ее идентификация. Для этого испражнения больного засевают на среду Плоскирева в чашках Петри и помещают их на 18-24 часа в термостат. Процент высеваемости шигелл возрастает при посеве свежевыделенного кала у постели больного до начала лечения больных этиотропными препаратами, а при дизентерии, вызванной антибиотикозависимыми штаммами шигелл, при добавлении в питательную среду 25 мкг/мл левомицетина и стрептомицина.

На вторые сутки исследования выросшие на дифференциально-диагностических средах мелкие бесцветные колонии после предварительной микроскопии в мазке и висячей капле отсевают для накопления культуры и ориентировочного определения ферментативной активности на комбинированную среду.

2. Серологическое исследование

Серологический метод диагностики дизентерии используется для выявления стертых форм болезни и при эпидемиологическом обследовании очага инфекции. При этом надо помнить, что постинфекционные агглютинины сохраняются в крови переболевших в титрах 1:100-1:200 около 6 месяцев. Лучшие результаты дает реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) с эритроцитарными диагностикумами Зонне и Флекснера. В сыворотке больных можно выделить также антиген шигелл, используя антительную реакцию непрямой гемагглютинации. Хороший результат получают от применения иммуноферментного анализа (ИФА).

3. Аллергическая проба.

В диагностике дизентерии существенную роль может сыграть внутрикожная аллергическая проба с дизентерином. У 90 % больных она становится положительной на 3-5 сутки заболевания и остается четко выраженной на протяжение 2-х недель.

     Специфическая профилактика дизентерии не разработана. Парентеральное введение убитых и химических дизентерийных вакцин иммунитета не создает. В летне-осенний период года детям можно назначать поливалентный дизентерийный фаг, лакто – и колибактерин. Для лечения острой дизентерии применяют антибиотики (левомицетин, тетрациклин, ампицеллин).

 

ЗАДАНИЕ № 3

Изучите и отметьте в таблице в своих тетрадях, какой конкретно материал исследуют при эшерихиозах и шигеллезе.


Дата добавления: 2018-02-15; просмотров: 202;