Описание препарата. Гистологическое строение данного органа.

Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

ФГБОУ ВО «Государственный аграрный университет Северного Зауралья» Институт Биотехнологии и ветеринарной медицины

Кафедра анатомии и физиологии

ОТЧЕТ

о прохождении учебной практики по гистологии

Выполнила: студентка группы С-ВТ321

Романовская О.В.

Зачетная книжка С-ВТз 1715з

Проверила: профессор, д.с.-х.н.

Саткеева А.Б.

Тюмень 2019

Содержание

1.Этапы приготовления гистологического препарата и описание препарата поджелудочной железы (гистоструктура органа).

Этапы приготовления гистологического препарата.

1.Взятие материала. Из органа вырезается кусочек, размеры которого не должны превышать 1 см^,. Материал должен быть свежим. Во время взятия материала необходимо избегать лишней его травматизации;

Фиксация материала.

Фиксация полученного гистологического материала ~ это воздействие на него химическими веществами, а также физическими факторами, что препятствует дальнейшему разрушению тканей объекта, сохраняет его структуру.

Физические фиксирующие факторы - замораживание (твердой углекислотой, в жидком азоте, кислороде и т.д.), воздействие высокой температуры, рентгеновское излучение. Все эти факторы вызывают гибель бактерии и инактивируют собственные ферменты тканей, способствуя сохранению гистологического материала.

Химические фиксаторы также вызывают гибель микробов и собственных ферментов тканей, стабилизируют структуру объекта. Различаютпростые и сложные химические фиксаторы.

Простые фиксаторы состоят из одного химического вещества (например, формалин, спирт, уксусная кислота и др.). Эти фиксаторы, однако, приводят к определенным нарушениям структуры гистологического материала.

Так, формалин вызывает сморщивание его, уменьшение в размерах. Уксусная кислота, наоборот, вызывает набухание. Поэтому чаще применяют сложные фиксаторы, в которых отрицательное действие простых фиксаторов нивелируется. Например, фиксатор ФСУ состоит из 4 частей формалина, 1 части спирта и 0,3 частей уксусной кислоты. Этот фиксатор вызывает весьма незначительные изменения структуры объекта. Известно множество и других сложных фиксаторов.

Производится для приостановления в тканях жизненных процессов и предупреждения последующего их распада. Фиксирующие жидкости: 10-12% водный раствор формалина, разные спирты, сложные красители-фиксаторы – Карнуа, Буэна и т.д. Фиксировать от 3 часов до 1 суток и более.

3.Промывка материала. Материал промывают под проточной водой.

4.Обезвоживание, обезжиривание. В спиртах возрастающей крепости и в растворах спирта с эфиром. Зафиксированный кусочек материала проводят через батарею спиртов: 50, 70, 96º (две порции), абсолютный спирт, абсолютный спирт + эфир (две порции). В каждом отмеченном растворе кусочек находится не менее суток.

5.Уплотнение материала. Пропитывание материала специальными уплотняющими средами: парафин, желатин или целлоидин, чтобы материал более твердой консистенции можно было резать на тонкие пластинки. При заливке в парафин материал пропитывают жидким парафином в термостатах при высокой температуре, затем на воздухе при комнатной температуре заливают в парафин, который застывает и становится твёрдым. Залитый материал называется гистологическим блоком.

6.Приготовление гистологических срезов. Гистологический блок наклеивают на деревянную основу, укрепляют на предметном столике микротома. С помощью микротомного ножа делают тонкие гистологические срезы толщиной 3-5 микрометров.

7.Окраска гистологических срезов. Окрашивание срезов (в световой микроскопии) или напыление их солями металлов (в электронной микроскопии) применяют для увеличения контрастности изображения отдельных структур при рассматривании их в микроскопе. Методы окраски гистологических структур очень разнообразны и выбираются в зависимости от задач исследования.

Гистологические красители подразделяют на кислые, основные и нейтральные. В качестве примера можно привести наиболее известный основной краситель азур II, который окрашивает ядра в фиолетовый цвет, и кислый краситель — эозин, окрашивающий цитоплазму в розово-оранжевый цвет. Избирательное сродство структур к определенным красителям обусловлено их химическим составом и физическими свойствами. Структуры, хорошо окрашивающиеся кислыми красителями, называются оксифильными (ацидофильными, эозинофильными), а окрашивающиеся основными — базофильными. Структуры, воспринимающие как кислые, так и основные красители, являются нейтрофильными (гетерофильными).

Окрашенные препараты обычно обезвоживают в спиртах возрастающей крепости и просветляют в ксилоле, бензоле, толуоле или некоторых маслах. Для длительного сохранения обезвоженный гистологический срез заключают между предметным и покровным стеклами в канадский бальзам или другие вещества. Готовый гистологический препарат может быть использован для изучения под микроскопом в течение многих лет.

8.Обезвоживание, просветление окрашенных срезов и заливка их в бальзам. Окрашенные срезы обезвоживают в 2-х порциях 96º спирта. Просветляют в карболе-ксилоле. Наносят на срез каплю бальзама (канадский, пихтовый) и закрывают покровным стеклом.

Описание препарата. Гистологическое строение данного органа.

На срезе поджелудочная железа. Препарат окрашен гематоксилином и эозином. Это паренхиматозный орган дольчатого типа. При малом увеличении микроскопа на препарате различаем соединительнотканную капсулу и отходящие от нее трабекулы, которые делят железу на дольки (Рис.1.1). Строма образована соединительной тканью. Паренхима дольки состоит их экзокринной (Рис.1.2) и эндокринной (Рис.1.4.) части и образована эпителиальной тканью. Эндокринная часть представлена островками Лангерганса, в основном сосредоточенными в хвосте железы. . Экзокринная часть железы представлена секреторными отделами – ацинусами и системой выводных протоков. При большом увеличении микроскопа видно, что ацинус образован клетками пирамидной (конусовидной) формы – ациноцитами. Клетки имеют выраженную полярность. Цитоплазма базальной части клетки окрашена базофильно (гомогенная зона). В апикальной части клетки цитоплазма окрашена оксифильно (зимогенная зона). В составе ацинусов можно найти центроацинозные клетки – однослойный плоский эпителий. Эти клетки не относятся к секреторному отделу, а являются начальными участками вставочных выводных протоков. В дольке железы кроме вставочных протоков видны выводные протоки, образованные однослойным кубическим эпителием - это межацинозные и внутридольковые протоки Среди ацинусов располагается эндокринная часть железы – островки Лангерганса. Островки состоят из нескольких типов эндокринных клеток, которые плохо окрашиваются гематоксилин-эозином, поэтому на срезе они видны как различной величины скопления клеток со светлой цитоплазмой и базофильным ядром. Среди клеток встречаются тонкие прослойки соединительной ткани с гемокапиллярами фенестрированного типа. В междольковой рыхлой соединительной ткани видны: междольковый выводной проток (Рис.1.3), образованный однослойным цилиндрическим эпителием, междольковая артерия и междольковая вена (Рис.1.5). В некоторых преператах наблюдаются инкапсулированные нервные окончания – тельца Фатер-Пачини (Рис.1.6.)

Рис.1 Срез поджелудочной железы. Окраска гематоксилин-эозин. Увеличение 56. Обозначения см. по тексту.

Рис.2. Срез поджелудочной железы. Окраска гематоксилин-эозином. Увеличение. 400. Обозначения. 1 – островок Лангерганса; 2 – ацинус; 3- внутридольковый выводной проток; 4 – центроацинозные клетки. 4

Дата добавления: 2021-07-19; просмотров: 39; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

Мы поможем в написании ваших работ!