Методы исследования, используемые для оценки состояния гуморального иммунитета (В-системы иммунитета)
СИСТЕМА ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА. АНТИТЕЛА. (Тема 2.)
 |
Материал для самостоятельного освоения
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Н‑цепи (от англ. heavy – тяжелый) – тяжелые цепи молекулы Ig.
L‑цепями (от англ. light – легкий) – легкие цепи молекулы Ig.
CH 1,CH 2, CH 3 - константные домены тяжелых цепей.
CL – константный домен легкой цепи.
VL, VH - вариабельные домены легкой и тяжелой цепей.
Fab- (от англ. fragment antigen binding) - фрагмент антигенсвязывающий.
Fc - (от англ. fragment crystallizable) – фрагмент кристализующийся.
FcR – рецептор к Fc-фрагменту Ig.
ЦМВ – цитомегаловирус.
IgG, IgA, IgM, IgE, IgE - классы сывороточных иммуноглобулинов.
SIgA – секреторный иммуноглобулин А.
мАТ – (англ. mab) – моноклональные антитела.
СИСТЕМА ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА
Иммунные реакции принято подразделять на два типа: ГУМОРАЛЬНЫЕ и КЛЕТОЧНЫЕ. Для иммунного ответа гуморального типа характерна выработка АНТИТЕЛ, которые называются эффекторами В‑звена иммунной системы, так как именно В-лимфоциты становятся антителопродуцирующими клетками.
Ê АНТИТЕЛА — это белки (точнее гликопротеины), которые синтезируются под влиянием антигенов и специфически с ними реагируют. Это белки гаммаглобулиновой фракции, поэтому их называют ИММУНОГЛОБУЛИНАМИ (иммунными глобулинами).
Иммуноглобулины обозначаются символом Ig. Синтезируются они В-лимфоцитами, а более точно - ПЛАЗМАТИЧЕСКИМИ КЛЕТКАМИ и содержатся в большом количестве в сыворотке, в межклеточной жидкости и других секретах, обеспечивая гуморальный ответ. Одновременно определенная, но небольшая часть Ig фиксируется на поверхности мембран макрофагов и лимфоцитов, функционируя в качестве рецепторов к антигенам и участвуя, таким образом, не только в гуморальном, но и клеточном иммунном ответе.
|
|
|
На В-лимфоцитах Ig встроены в цитоплазматическую мембрану и являются антигенспецифическим рецептором. В данном случае это мембранная форма иммуноглобулина
СТРУКТУРА ИММУНОГЛОБУЛИНОВ. Смотрите Nсхему на титульном листе. Молекула Ig состоит из двух тяжелых полипептидных цепей, называемых Н‑цепями (от англ. heavy – тяжелый) и из двух легких, называемых L‑цепями (от англ. light – легкий).
С помощью физико-химических и иммунологических методов доказано существование 5 классов Ig с молекулярной массой от 150 000 до 900 000 Д, обозначаемых Ig A, Ig M, Ig G, Ig E, Ig D. Принадлежность иммуноглобулинов к определенному классу определяется типом тяжелых цепей. У IgA тяжелые цепи α(альфа), IgM – μ(мю), IgG – γ(гамма), IgE – ε(эпсилон), IgD – δ(дельта). У всех иммуноглобулинов легкие цепи могут быть или обе λ (лямбда), или обе κ (каппа).
|
|
|
Антитела против одного и того же антигена могут быть представлены разными классами Ig. При этом выявлена такая закономерность: первыми после иммунизации появляются антитела класса М, затем класса G, и последними иммуноглобулины А и Е. Таким образом, если у человека определяются антитела (к какому-либо инфекционному агенту) класса М, то это свидетельствует о недавнем его инфицировании. Вот почему определение антител классов М и G к одному и тому же возбудителю играет важную диагностическую роль (как к ВИЧ, так и к возбудителю токсоплазмоза, ЦМВ и многим другим патогенам).
Структура молекулы IgG. Четыре цепи между собой связаны дисульфидными связями. Место вращения в тяжелой цепи называют шарнирной областью (участком). Каждая из легких и тяжелых цепей состоит из вариабельной (VL, VH)и константной (CH,CL) частей (см. рис на титульном листе). Вариабельные участки в цепях начинаются от N (концевого участка) и состоят приблизительно из 110 аминокислот. Константный участок Н-цепи в 3 раза длиннее вариабельного и состоит из 3 гомологичных областей, L-цепи – из одной, каждая из которых содержит 110 аминокислот. Эти гомологичные участки, длиной 110 аминокислот, свернуты в глобулы и называются доменами. ò
|
|
|
ДОМЕНЫ — это фрагменты цепей Ig, стабилизированные дисульфидными мостиками, состоящие приблизительно из 110 аминокислот (мол. масса 12500). Вторичная структура доменов представляет собой «клубки» (глобулы). В молекуле Ig G имеется 12 доменов, по 4 на тяжелых цепях и по 2 на легких. Домены, состоящие из вариабельных участков легких и тяжелых цепей, обозначаются соответственно VL и VH.
На константных участках легких цепей имеется по одному домену CL, на тяжелых цепях три константных домена, которые обозначаются CH 1, CH 2, CH 3. Важно отметить, что в области СН 2 домена располагается центр связывания комплемента, что и обуславливает активацию системы комплемента некоторыми классами иммуноглобулинов.
В молекуле Ig выделяют три фрагмента: два из них идентичны и обладают способностью соединяться с антигеном (точнее с антигенной детерминантой). Поэтому их назвали Fab-фрагментами ( fragment antigen binding - фрагмент антигенсвязывающий). Третий фрагмент может кристаллизоваться, и в связи с этим его обозначили как Fc-фрагмент ( fragment crystallizable ). В Fab-фрагментах располагаются активные центры антител (смотри ниже), а вот своим единственным, образованным тяжелыми цепями,
|
|
|
Fc-фрагментом антитело связывается с клеточными
Fc -рецепторами ( FcR ), которые находятся на поверхности ряда клеток (макрофагов, моноцитов, лимфоцитов, базофилов и др.).
Во всех V‑областях иммуно-глобулинов имеются ГИПЕР-ВАРИАБЕЛЬНЫЕ УЧАСТКИ с высокой степенью изменчивости аминокислотного состава. На Н‑цепи четыре таких участка, а на L‑цепи — три.
|
|
АКТИВНЫЙ ЦЕНТР иммуноглобулина (синоним: паратоп) представляет собой пространство между VH и VL участками и расположен в Fab. Активным центром антител или антидетерминантой, именуют участок молекулы антитела, являющийся структурой, комплементарной (специфичной) детерминантой группе антигена. Именно активными центрами Ig связываются с антигеном. Активный центр антител обладает функциональной автономией, т.е. способен связывать антигенную детерминанту в изолированном виде.
Иногда антигенсвязывающие центры молекулы антитела могут связываться с несколькими различными антигенными детерминантами (обычно эти антигенные детерминанты очень схожи). Такие антитела называют ПЕРЕКРЕСТНО-РЕАГИРУЮЩИМИ, способными к полиспецифическому связыванию.
СПЕЦИФИЧНОСТЬ антител — это способность Ig реагировать только с определенным антигеном. Феномен специфичности основан на наличии активных центров в молекуле антител, вступающих в контакт с соответствующими детерминантами антигена.
ВАЛЕНТНОСТЬ антител — это количество активных центров в молекуле антитела. Валентность Ig G равна двум. Валентность Ig M -.....? (Вспомните, сколько активных центров в молекуле Ig M. Строение IgМ смотри ниже.).
АВИДНОСТЬ антител - это способность антител образовывать прочные соединения с антигеном. А степень этой прочности, т.е. степень прочности связывания антител с антигеном называется АФФИННОСТЬЮ антител. (Она определяется степенью комплементарности активного центра антигенной детерминанте антигена.)
Ig G составляют 70% всех иммуноглобулинов человека. По строению - мономеры. Структура подробно описана выше. Появляются они на более поздних сроках после первичной антигенной стимуляции, при вторичном иммунном ответе это основной класс продуцируемых антител. Находятся они как в крови, так и вне сосудов. Ig G – единственный, кто активно транспортируется через плаценту и играет важную роль в защите новорожденного от инфекции в первые месяцы жизни. Он является активатором системы комплемента. Валентность его равна 2. У человека различают в сыворотке крови 4 субкласса (подкласса) IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), которые различаются по строению тяжелых цепей (γ1, γ2, γ3, γ4) и некоторыми функциями. Концентрация в сыворотке от 7,0 до 22 г/л.
Ig М в сыворотке крови представлен в виде пентамера. (См. рис. на с. 8). В молекуле IgM пять структурных молекул (подобных IgG) расположены радиально. Fc-фрагменты направлены в центр, где соединены J-цепью (от англ. joining – соединение), а Fab-фрагменты - наружу. Тяжелые (Н) цепи состоят из 5 доменов, так как содержат 4 константных домена. Ig M обладает высокой комплементсвязывающей активностью, так как имеет пять центров активации комплемента в СН2 доменах. Синтезируется в основном при первичном иммунном ответе и преимущественно содержится во внутрисосудистом русле. Количество Ig M в сыворотке крови здоровых составляет 0,48 - 2,0 г/л., т.е. около 10% от общего количества Ig. Концентрация IgM в сыворотке крови у пожилых несколько снижается (подумайте почему?).
Ig A составляет 10 — 15% от всех иммуноглобулинов сыворотки крови. Не обладает способностью активировать комплемент. Большая часть сывороточных Ig A (80%) имеет мономерную структуру. Имеется два субкласса (IgA1, IgA2). Менее 20% Ig A в сыворотке представлено димерными молекулами. Концентрация Ig А в сыворотке крови взрослого 0,7 – 5,0 г/л. Ig A синтезируется плазматическими клетками, находящимися преимущественно в подслизистых тканях, на слизистой эпителиальной поверхности дыхательных путей, урогенитального и кишечного тракта, почти во всех экскреторных железах. Часть Ig А попадает в общую циркуляцию, но большая его часть секретируется местно на слизистых оболочках в виде sIgA и служит местным защитным иммунологическим барьером слизистых. Сывороточный IgA и sIgA это различные иммуноглобулины! SIgA нет в сыворотке крови.
FВ секретах слизистых и желез (молозиво, женское молоко, слюна, секреты кишечника, бронхиального дерева и др.) содержится секреторный Ig A (sIg A) в наибольших концентрациях. Он состоит из двух мономеров IgA, соединенных j‑цепью и молекулы секреторного компонента. (См. рис. ниже). Последний предохраняет иммуноглобулин от разрушающего действия различных ферментов, секретов слизистых оболочек. Секреторный компонент синтезируется
в эпителиальных клетках слизистых. sIg А играет особую роль в обеспечении местной защиты от инфекций бактериальной природы. Он препятствует внедрению бактерий в эпителиальные клетки слизистых путем ингибиции прикрепления микробов к слизистым оболочкам, их роста, ферментативной активности, блокирования антигенных компонентов.
Дети рождаются без IgA и получают его с молоком матери. Достоверно показано, что дети, находящиеся на естественном вскармливании, значительно реже болеют кишечными инфекциями и заболеваниями дыхательных путей по сравнению с детьми, получающими искусственное питание.
Дефицит IgA встречается у одного больного на 700 здоровых лиц. У лиц с иммунодефицитом IgA отмечается склонность к аутоиммунным заболеваниям инфекциям дыхательных путей, гайморовых и лобных пазух, кишечным расстройствам.
Ig E содержится в сыворотке в очень небольшом количестве. Ig E не активирует систему комплемента. Его особенность состоит в том, что он СПОСОБЕН ФИКСИРОВАТЬСЯ НА БАЗОФИЛАХ И ТУЧНЫХ КЛЕТКАХ, что объясняется наличием в большом количестве на указанных клетках ù рецепторов к Fc-фрагментам Ig E (см. рис. на стр. 6). При последующем соединении фиксированных на тучных клетках или базофилах Ig E с антигеном возникает дегрануляция этих клеток с высвобождением гистамина. Ig E называют цитофильным иммуноглобулином, или РЕАГИНОМ за способность фиксироваться на названных клетках. Он играет ведущую роль в патогенезе ал-лергических заболеваний (1 тип) и в противогельминтном иммунитете. Концентра-ция в сыворотке здоровых людей 0,000014 – 0,00045 г/л. Сравните с другими Ig.
Ig D обнаруживается в сыворотке в малых количествах (0,02 - 0,04 г/л) и его роль как сывороточного иммуноглобулина не совсем ясна. Как рецепторный, Ig D находится на В‑лимфоцитах, причем он появляется на мембране относительно зрелых клеток, поэтому его наличие является свидетельством зрелости В‑лимфоцитов.
Иммуноглобулины различных классов и подклассов называют ИЗОТИПАМИ. Всего известно 9 изотипов (G1,G2,G3,G4, A1,A2, M, E, D), отличающихся друг от друга по строению тяжелых цепей.
При сравнении антител, относящихся к одному изотипу, но образовавшихся в ответ на различные антигены, также выявляются различия. Эти различия касаются активных центров антител, сформированных VH и VL доменами, то есть строение вариабельных доменов у иммуноглобулинов одного и того же изотипа различное, и характерно только для данной молекулы. Особенности иммуноглобулинов по вариабельным доменам называют ИДИОТИПОМ.
АЛЛОТИПЫ — это антигенные детерминанты, по которым молекулы иммуноглобулинов одних индивидуумов отличаются от молекул антител других индивидуумов данного вида.
Как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ имеют определенную динамику и при повторном попадании антигена развиваются значительно быстрее и имеют качественные особенности.
В ПЕРВИЧНОМ ИММУННОМ ОТВЕТЕ гуморального типа выделяют несколько этапов. ПЕРВЫЙ ЭТАП —латентная фаза, длится до 4 суток с момента внедрения антигена. (В этот период происходит фагоцитоз антигена, его переработка и представление Т‑ и В‑ лимфоцитам, кооперативные взаимодействия клеток участвующих в иммунном ответе).
ВТОРОЙ ЭТАП (лог-фаза) - синтез антител и логарифмическое удвоение их титра. На этом этапе образовавшиеся плазматические клетки осуществляют синтез специфических антител, причем их титр удваивается каждые 2-4 ч. по мере включения клеток клона в иммунный ответ. К 10 - 12 суткам титр антител достигает максимума. 3 ЭТАП стабилизация синтеза антител. Этот период характеризуется динамическим равновесием между продукцией иммуноглобулинов и их элиминацией в составе иммунных комплексов. При элиминации антигена наступает 4 ЭТАП —снижение титра антител.
При первичном иммунном ответе в основном синтезируются антитела, относящиеся к Ig M E. Лишь в конце первичного иммунного ответа происходит синтез антител класса Ig G.
При ВТОРИЧНОМ ИММУННОМ ОТВЕТЕ, при повторном контакте с антигеном, первыми в иммунный ответ вступают клетки памяти. При вторичном иммунном ответе латентный период и период логарифмического увеличения титра антител сокращаются примерно вдвое. В основном синтезируются Ig G E, максимальный уровень которых превышает максимальный уровень антител при первичном иммунном ответе.
4 Моноклональные антитела (мАТ). Моноклональные антитела разработаны на основе гибридомной технологии. Такие антитела моноспецифичны и направлены к одному эпитопу (антигенной детерминанте) антигена. Получение мАТ буквально революционизировало современную иммунологию и медицину.
Принцип гибридомной технологии. Первоначально проводят иммунизацию мышей антигеном. Из селезенки иммунизированных животных получают В-лимфоциты. Затем проводят слияние этих антителообразующих В-клеток, которые долго не живут на искусственных средах, с клетками опухоли – плазмоцитомы (миеломы), которые обладают способностью опухолевых клеток непрерывно делиться, «бессмертные» клетки, которые можно длительно культивировать вне организма.
Слияние этих клеток с помощью полиэтиленгликоля, приводит к появлению гибридных клеток - гибридом. Получившаяся гибридома приобретает способность к синтезу специфических антител (от иммунных В-лимфоцитов) и становится долгоживущей, непрерывно делящейся (как миеломные). Накопившийся клон клеток продуцирует моноклональные АТ направленные к единственной антигенной детерминанте изучаемого антигена. Масштабное культивирование и длительное рекультивирование гибридомного клона клеток позволяет получать мАТ в больших количествах. (Подробнее см. учебник А.А.Ярилин, 1999, с. 335-339, а так же лекционный материал).
мАТ оказались исключительно удобным и широко применяемым в настоящее время диагностическим средством. С их помощью определяют маркеры клеточных популяций, гормоны, медиаторы, опухолевые маркеры и т.д. даже в очень низких концентрациях. мАТ широко применяются в ИФА.
Для лечения их используют реже, так как при введении человеку они вызывают выработку антител к иммуноглобулинам мыши и аллергические реакции.
Однако в последнее время получены гетерогибридомы (человеческая антителообразующая клетка + мышиная опухолевая В-клетка), которые образуют антитела человека против нужных антигенов. Они не вызывают иммунного ответа при введении человеку! Поэтому буквально в последние годы такие гуманизированные или их еще называют химерные мАТ стали широко применяться в терапевтической практике.
Например, фармпрепараты: Infliximab (chimeric anti-tumor necrosis factor alpha monoclonal antibody) - Инфликсимаб (REMICADE® Ремикейд) представляет моноклональные антитела, специфичные (то есть способные распознавать и практически необратимо связывать) к одному из ключевых пептидов, вовлеченных в развитие воспалительных процессов, - фактору некроза опухоли (tumor necrosis factor alpha - TNF-alpha).
Мабтера - Mabthera ( Rituxan , Rituximab (ритуксимаб) "F.Hoffmann-La Roche Ltd.". - гуманизированные химерные человеческо-мышиные антитела против антигена CD20 В-лимфоцитов человека. Они состоят из вариабельной области мышиных мАТ и константной области человеческого IgG. Rituxan применяется при лечении В-клеточных неходжкинских лимфом низкой степени дифференцировки, а также фолликулярных лимфом и хронического лимфолейкоза.
Антиген CD20 был выбран в качестве мишени для терапии антителами благодаря ряду присущих ему уникальных свойств: CD20-антиген постоянно экспрессируется на всех стадиях созревания В-лимфоцитов; CD20 не обнаруживается в свободном виде в сыворотке крови в клинически значимых концентрациях; молекула CD20 не поглощается внутрь клетки и не сбрасывается во внеклеточное пространство после связывания с мАТ.
Омализумаб, натализумаб, анакинра, бексар, трастузумаб – являются терапевтическими мАТ.
В-лимфоциты – это те клетки, которые обеспечивают выработку антител и являются основным клеточным субстратом гуморального иммунного ответа.
В процессе дифференцировки В‑лимфоцитов выделяют 2 основных этапа:
1. АНТИГЕННЕЗАВИСИМЫЙ и 2. АНТИГЕНЗАВИСИМЫЙ.
АНТИГЕННЕЗАВИСИМАЯ дифференцировка В‑клеток происходит в костном мозге без участия антигена, причем происходит постоянно по следующей схеме:
ê Стволовая кроветворная клетка (гемопоэтическая стволовая клетка, англ. HSC)
ê Общий предшественник Т‑ и В‑лимфоцитов
ê Про В-клетка
ê Предшественник В лимфоцитов (Пре-В-клетка)
ê Незрелые В-лимфоциты
В-лимфоциты (зрелые) - прямые предшественники антителообразующих клеток.
Принципиальной основой В-лимфопоэза является образование зрелых лимфоцитов, несущих на поверхностной мембране молекулы Ig М (мембранная форма IgM – sIgM), выполняющих функции рецепторов специфичных к одному определенному антигену. Кроме того, появляются другие мембранные структуры, значимые для функционирования лимфоцита. Важным является процесс формирования различных индивидуальных для каждой В-клетки антигенраспознающих рецепторов. Это достигается реаранжировкой генов кодирующих вариабельные домены тяжелых (μ) и легких цепей. Перестройка фрагментов генов (V, D, J) обеспечивает большое разнообразие и индивидуальность образующихся антигенраспознающих рецепторов.
В-лимфоциты в костном мозге проходят обязательный этап – селекцию, заключающуюся в программированной гибели (апоптозе) аутореактивных клонов лимфоцитов, что называется делецией клона (clonal deletion). Этот механизм обеспечивает толерантность к собственным (аутологичным) антигенам организма.
Второй этап. В-лимфоциты, встретив и распознав антиген своим иммуноглобулиновым рецептором, размножаются, образуя клон идентичных клеток, и дифференцируются в плазматические клетки – продуценты антител.
Таким образом, вторым этапом развития В-лимфоцитов является их иммуногенез – АНТИГЕНЗАВИСИМАЯ дифференцировка, которая происходит в периферических органах иммунной системы. В отличие от антигеннезависимой дифференцировки не все клоны В‑лимфоцитов претерпевают антигензависимую дифференцировку. Этот этап развивается лишь в том случае, если клон В‑лимфоцитов реагирует на внедрившийся в организм АНТИГЕН. При этом с антигеном будут взаимодействовать только те клоны В‑лимфоцитов, антигенраспознающие рецепторы которых специфичны к его антигенным детерминантам. Плазматические клетки - конечная стадия полностью дифференцировавшихся В-лимфоцитов и продуцирующих антитела к определенному антигену. Каждый В-лимфоцит способен синтезировать только единственный вид антител к определенной антигенной детерминанте (эпитопу).
Антигензависимая дифференцировка зависит не только от распознавания антигена клоном В‑лимфоцитов. В этом процессе участвуют антигенпрезентирующие клетки и Т‑лимфоциты, если антиген Т-зависимый.
В‑лимфоциты на своей поверхности содержат важные идентификационные и функциональные маркеры. Они называются дифференцировочные антигены или кластеры дифференцировки – CD. С их помощью можно достоверно охарактеризовать лимфоциты зрелые или нет, а так же их функциональную активность и это имеет высокое диагностическое значение, особенно при лимфопролиферативных заболеваниях и оценке состояния гуморального иммунитета.
CD19 – важная роль в активации В-клеток. Маркерная молекула, так как экспрессирована на всех клетках В-ряда и отсутствует на лимфоидных клетках других типов. Плазматические клетки утрачивают её.
CD20 (B1), CD72 – так же маркерные молекулы клеток В-ряда.
CD45 (B220), CD43 – одновременное наличие этих CD-антигенов характерно для про-В-лимфоцитов, самых ранних клеток В-лимфопоэза.
CD45 (B220), CD19 – фенотип пре-В-клеток.
CD45, CD19, CD40 – фенотип характерный покоящимся В-клеткам.
CD45,CD19, CD40, CD80, CD86 – фенотип характеризующий активирован-ные В-клетки. CD80, CD86 являются важными костимулирующими молекулами в межклеточных взаимодействиях.
В-лимфоциты памяти имеют молекулы CD86, CD20, CD39.
Большая часть В-лимфоцитов имеет на поверхности антигены HLA класса II. На зрелых В-лимфоцитах экспрессируются IgM и IgD, а так же рецепторы для активированного третьего компонента комплемента (CD21/CR2, CD35/CR1), Fc рецепторы для IgG (CD32).
Запомните, важными дифференцировочными CD маркерами В-лимфоцитов периферической крови являются – CD 19, CD 20, CD 72.
Методы исследования, используемые для оценки состояния гуморального иммунитета (В-системы иммунитета)
К тестам 1-го уровня оценки В-системы иммунитета, позволяющим выявить грубые поломки в иммунной системе (с помощью которых диагностируются наиболее частые нарушения в данном компоненте иммунной системы), относятся:
· Определение содержания иммуноглобулинов основных классов (A, M, G) в сыворотке крови. Наиболее распространенный метод радиальной иммунодиффузии в агаре или с помощью нефелометрии;
· Определение содержания IgE в сыворотке крови. Используется ИФА. Причем можно определять суммарное количество IgE в сыворотке крови и уровень аллерген-специфического IgE;
· Определение процентного и абсолютного количества В-лимфоцитов (CD19, CD20, CD72) в периферической крови (10 – 23%; 150-600 в 1 мкл).
Все остальные тесты оценки состояния гуморального иммунитета относятся к развернутым тестам 2-го уровня. Наиболее важные из них:
· Определение субклассов IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4) в сыворотке крови;
· Определение концентрации sIgA в секретах слизистых. Именно этот иммуноглобулин обеспечивает местную защиту слизистых;
· Определение содержания антител к бактериальным белковым и полисахаридным антигенам в сыворотке крови. Ведь именно конкретные антитела к конкретному возбудителю обеспечивают защиту организма, а не общий уровень антител (иммуноглобулинов);
· Определение способности лимфоцитов давать пролиферативный ответ на митогены (липополисахариды, митоген лаконоса). Позволяет оценить важную патогенетическую способность В-лимфоцитов – пролиферировать при контакте с митогенами, антигенами;
· Определение поверхностных маркеров В-лимфоцитов (рецепторов интерлейкина-2, трансферрина, DR-антигенов HLA и других);
· Определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови.
· Другие тесты, позволяющие количественно оценить способность В-лимфоцитов синтезировать иммуноглобулины, функциональные способности В-клеток, полноценность иммуноглобулинов.
Выявлено, что при нормальном уровне иммуноглобулинов в сыворотке крови и даже при высоком титре антител к определенному возбудителю, у человека могут быть хронические, рецидивирующие заболевания, вызванные этим возбудителем. Связано это, в ряде случаев, с низким аффинитетом антител или низким гликозилированием молекул IgG. (Низкий аффинитет приводит к неэффективному связыванию антитела с антигеном и, как следствие, низкая элиминация антигена. Молекула IgG является гликопротеином и степень гликозилирования важна при взаимодействии Ig c Fc-рецепторами фагоцитов. Не полностью гликозилированные молекулы IgG неэффективно вступают во взаимодействие с фагоцитами, с их Fc-рецепторами.).
Дата добавления: 2021-07-19; просмотров: 48; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!