Приемы и методы стерилизации при работе в биотехнологической лаборатории

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО РЫБОЛОВСТВУ

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

«МУРМАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ

УНИВЕРСИТЕТ»

Кафедра микробиологии и биохимии

Методические указания

К выполнению контрольной работы

По теме: «Основные этапы биотехнологических производств»

По дисциплине: Введение в биотехнологию

для направления 020200.62 «Биология»

Форма обучения: очная

Мурманск

2013

Составитель – Елена Викторовна Макаревич, канд. биолог. наук, профессор кафедры микробиологии и биохимии Мурманского государственного технического университета

Методические указания к выполнению контрольных работ рассмотрены и одобрены на заседании кафедры-разработчика «____»_________________2013 г., протокол № _____.

Рецензент – Ольга Юрьевна Богданова, канд. биол. наук, профессор кафедры микробиологии и биохимии Мурманского государственного технического университета

СОДЕРЖАНИЕ

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ………………………………………………………..…4

2. Методические указания к выполнению контрольной работы…………………………………………………………………………..….5

3. Вопросы для самопроверки…………………………………………....9

4. Тестовые задания……………………………………………………..…..10

5. Практические задания………………………………………………..…20

6. Рекомендуемая литература………………………..……………..…..21

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Контрольная работа представляет собой одну из форм текущего контроля знаний студентов, и его выполнение является обязательным для всех студентов. Если работа не зачтена, студент должен иметь возможность ее исправить, путем повторного выполнения контрольной работы. Студенты, не выполнившие контрольную работу, к экзамену не допускаются.

Целью выполнения контрольной работы является углубление и закрепление знаний студентов, полученных при теоретическом изучении дисциплины и позволяет студенту продемонстрировать знания и навыки, приобретенные за время обучения по теории, а также возможность их применения в практической деятельности.

Студенты выполняют контрольную работу в сроки, установленные графиком. Выполнение контрольной работы является завершающим этапом в изучении отдельных тем дисциплины «Введение в биотехнологию».

Методические указания к выполнению контрольной работы

на тему « Основные этапы биотехнологических производств».

Для выполнения контрольной работы необходимо:

1. Изучить теоретические данные по курсу;

2. Ознакомиться с рекомендуемой литературой;

3. Ответить на вопросы по данной теме;

4. Решить предоставленные в методическом пособии тестовые задания;

5. Составить технологическую схему получения биомассы микроорганизмов.

ПРОЦЕССЫ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДСТВ

Процессы биотехнологических производств разнообразны, но все они имеют пять общих основных стадий, которые могут различаться в зависимости от целевого продукта и способа его получения. Основные стадии следующие: приготовление питательной среды; получение посевного материала; культивирование микроорганизмов; выделение целевого продукта; очистка целевого продукта. Общая биотехнологическая схема производства продуктов микробного синтеза приведена на рис. 1.1.

Приготовление питательной среды

Задача специалиста, оптимизирующего состав среды для конкретного вида микроорганизма, - выбрать такие источники углерода, азота, фосфора и других веществ, которые наиболее оправданы в экономическом и экологическом отношениях.

Принцип составления питательных сред. Каждый конкретный вид микроорганизмов, используемых в биотехнологии, строго избирателен к питательным веществам. Потребность микроорганизма в тех или иных соединениях определяется физиологическими особенностями данного вида микроба, но во всех случаях среда должна быть водным раствором этих веществ и обеспечивать в определенном количестве их приток в клетку.

В самом приближенном виде физиологические потребности микроорганизма в питательных веществах можно выявить, определив химический состав микробной клетки. Однако в этом случае не учитываются количество и состав метаболитов, удаленных клеткой во внешнюю среду, и то обстоятельство, что состав клеточного вещества микроорганизма зависит от состава среды обитания и варьирует в достаточно широких пределах. Но все же, первоначальную ориентировку в выборе оптимального состава питательной среды, исходя из состава клеточного вещества микроба, сделать можно.

Важнейшим условием приготовления питательных сред является соблюдение правил асептики. Для обеззараживания питательных сред применяют, как известно, химическое воздействие (дезинфекцию), воздействие температуры и других физических факторов (ультразвука, ультрафиолетовых лучей, ультрафильтрации). Каждый из этих методов весьма избирателен. В биотехнологии широко применяют термические методы обеззараживания питательных сред (автоклавирование, стерилизацию, кипячение и др.). Споры микроорганизмов более устойчивы к высокой температуре, поэтому именно споры бактерий являются лимитирующим фактором, определяющим температурные режимы стерилизации сред.

Для стерилизации воздуха в случае аэробных процессов культивирования используют фильтрование и ультрафиолетовое облучение.

Продуцент	Подготовка посевного материала	Питательная среда

	Культивирование

	Разделение

Культуральная жидкость		Клетки

	Биомасса убитых клеток	Биомасса живых клеток
Дезинтеграция убитых клеток

Выделение и очистка метаболитов

Концентри-рование	Концентри- рование	Концентри- рование

Стабилизация продукта	Стабилизация продукта	Стабилизация продукта

Обезвоживание	Обезвоживание	Обезвоживание

Сухой продукт

Жидкий продукт

Сухой продукт

Жидкий продукт

Сухой продукт

Жидкий продукт

Хранение

Применение

Рис. 1.1. Принципиальная биотехнологическая схема производства

продуктов микробного синтеза

Получение посевного материала

Поддержание чистой культуры штамма-продуцента - ключевая задача любого биотехнологического производства. Культуры микроорганизмов-продуцентов заводы получают из коллекций в пробирках на агаризованных питательных средах или в ампулах. Чистая культура микроорганизма может постоянно или по мере необходимости использоваться в производстве. При длительном хранении чистых культур могут происходить случайные нерегулируемые мутации. Для избежания мутаций следует не только соблюдать правила хранения и поддержания исходной культуры, но и периодически проводить пересев культуры и проверку ее однородности как по морфологическим, так и по физиологическим признакам.

Посевным материалом (инокулятом) называют чистую культуру микроорганизма, которую получают путем ее последовательного пересева из пробирки в колбу, а затем в аппараты увеличивающегося объема до количества, необходимого для промышленного производства. Сначала чистую культуру размножают в лаборатории, затем в цехе чистых культур и инокуляции, далее направляют на культивирование. Приготовление посевного материала состоит из следующих стадий:

1. Получение культуры микроорганизма в микробиологической лаборатории завода.

2. Выращивание микроорганизмов в малом посевном аппарате.

3. Выращивание микроорганизмов в большом посевном аппарате.

4. Накопление культуры микроорганизмов в малом ферментере.

Передачу чистых культур из одного аппарата в другой осуществляют в конце логарифмической фазы роста. Качество полученного посевного материала контролируют путем микроскопирования.

В биотехнологии широко применяются плесневые грибы, дрожжи, актиномицеты (грамположительные бактерии, не образующие спор), бактерии и водоросли в виде чистых и смешанных культур. В традиционных процессах ферментации предпочтение обычно отдается смешанным культурам, а в большинстве современных ферментационных процессов – монокультурам (чистым культурам), выращиваемых в асептических условиях. Большинство используемых сегодня культур получено из природных источников, однако затем эти культуры были улучшены или путем выращивания в условиях, характерных для данного процесса (для повышения выхода биомассы и первичных метаболитов), или с помощью мутагенеза или генетической инженерии (для производства вторичных метаболитов).

Ферментация (культивирование)

Это самый важный и продолжительный этап биотехнологического производства. Ферментация представляет собой совокупность последовательных операций от внесения в заранее приготовленную и термостатированную питательную среду посевного материала до завершения процессов роста и биосинтеза вследствие исчерпывания питательных веществ среды. Существует два основных типа ферментаций: получение биомассы микроорганизмов и получение ценных веществ (метаболитов), возникающих в ходе роста или на последующих стадиях развития культуры.

Как говорилось ранее (п. 2.1), для выращивания любой культуры необходимы: жизнеспособный посевной материал; источники энергии и углерода; питательные вещества для синтеза биомассы; отсутствие ингибиторов роста; соответствующие физико-химические условия.

На оптимальной питательной среде при благоприятных значениях рН и температуры, при условии подачи требуемого количества воздуха в среду микроорганизмы быстро начинают расти и размножаться, обеспечивая накопление биомассы продуцента и биологически ценных метаболитов в культуральной жидкости. Для культивирования микроорганизмов в промышленных масштабах применяют ферментеры (или ферментаторы) – реакционные емкости, в которых при определенных условиях находятся микроорганизмы. Основное назначение ферментатора – своевременно обеспечить микробные клетки необходимыми питательными веществами и кислородом (при необходимости) и отвести продукты обмена веществ, создать однородный состав среды при условии слабого потока культуральной жидкости (при непрерывном культивировании). Для поддержания кислородного режима ферментатор снабжается устройством подвода воздуха, для лучшего перемешивания среды – мешалками различной конструкции. Для поддержания температуры среды предусмотрены системы охлаждения.

Выделение целевого продукта

Стадия выделения продукта существенно зависит от того, накапливается продукт в клетках или он выделяется в культуральную жидкость, или же продуктом является сама клеточная масса. Разделение биомассы и культуральной жидкости - сепарация - осуществляется несколькими методами.

Если целевым продуктом является биомасса клеток, применяют следующие методы выделения: отстаивание, фильтрация, флотирование, сепарирование и т.д. (механические способы); выпаривание и сушка (физические способы).

Фильтрация – простой и широко применяемый процесс разделения твердых частиц и жидкости, скорость которого зависит от пористости фильтрующего материала и давления. Фильтрование при помощи вакуумных насосов существенно ускоряет процесс.

Флотирование применимо для выделения дрожжевых клеток. Процесс флотирования клеток осуществляется путем вспенивания культуральной жидкости. Вместе с пеной из культуральной жидкости удаляется и основная масса дрожжей.

Сепарирование осуществляют в сепараторах, в которых на клетки действует центробежная сила, отбрасывающая клетки к периферии сосуда, а культуральная жидкость будет собираться в центре сепаратора. Этот процесс протекает гораздо быстрее, чем отстаивание клеток под действием силы тяжести.

Если целевой продукт содержится в самих клетках, то проводят разрушение клеток - дезинтеграцию – физическими, химическими и ферментативными методами.

К физическим методам можно отнести разрушение клеток под действие ультразвука, замораживания-оттаивания, баллистическую дезинтеграцию. Баллистическая дезинтеграция клеток осуществляется в мельницах, куда помещают суспензию клеток и вспомогательные мелющие вещества: песок, стеклянные или полимерные шарики.

К химическим методам дезинтеграции относят разрушение клеток с помощью толуола, бутанола и других химических соединений.

При использовании ферментативной дезинтеграции клеток используют ферменты, способные разрушать определенные структурные компоненты клеточных стенок микроорганизмов. Например, для разрушения бактериальных клеток применяют лизоцимы яиц, бактерий, актиномицетов или грибов. Для разрушения дрожжей и плесневых грибов используются фосфоманназа и бета-глюконаза или применяют автолиз. Автолиз – разрушение клеток дрожжей или плесневых грибов под действием собственных гидролитических ферментов. Для этого суспензию клеток инкубируют при 35-45 ˚С.

Выделение продукта из культуральной жидкости или гомогената разрушенных клеток проводят путем его осаждения, экстракции, кристаллизации или сорбции.

Осаждение в виде нерастворимых солей производят путем добавления химического осадителя в эквимолярных количествах. Применяют при получении лимонной, молочной кислоты.

Экстракция – добавление к раствору экстрагента (растворителя), который поглощает целевой продукт. Затем эмульсию разделяют и выделяют целевое вещество. Используют при получении витаминов, антибиотиков.

Кристаллизация – после предварительной обработки культуральной жидкости и выпаривания при охлаждении осуществляют кристаллизацию. Данный метод выделения и очистки используется при получении глутаминовой, итаконовой и других кислот.

Затем выделенный продукт концентрируют центрифугированием, ультрафильтрацией, выпариванием или обратным осмосом.

Центрифугирование – расслоение раствора с частицами бόльшей плотности на осадок и надосадочную жидкость при воздействии центробежной силы.

Ультрафильтрация – обработка раствора на мембранных фильтрах с определенным размером пор (то есть разделение веществ на фракции по размерам их молекул). Применяется для ферментов и других белков.

Очистка целевого продукта

Эта стадия необходима при получении очищенного целевого продукта, например, ферментных препаратов степени очистки более двухкратной. Эта стадия приводит к росту себестоимости получаемого целевого продукта.

Для очистки ферментов применяют избирательную сорбцию (связывание) каолином, трифосфатом кальция, гидроксидом алюминия и другими адсорбентами. Таким образом проводят сорбцию либо фермента, либо балластных белков, которые затем разделяют центрифугированием. Фермент из сорбента отделяют раствором фосфатного буфера.

На последнем этапе продукт отделяют от примесей, концентрируют и стабилизируют. После стабилизации продукта в зависимости от того, каким должен быть конечный продукт: сухим или жидким, его обезвоживают или сразу упаковывают и отправляют на хранение и далее - потребителю.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПРОВЕРКИ

1. Перечислите основные стадии биотехнологической схемы получения продуктов микробного синтеза.

2. Как определить физиологические потребности микроорганизмов в питательных веществах?

3. Какие методы применяют для обеззараживания питательных сред в биотехнологическом производстве?

4. Опишите последовательность получения посевного материала для промышленного производства целевого продукта.

5. Основное назначение ферментера.

6. От чего зависит проведение стадии выделения целевого продукта?

7. Какие методы применяют для отделения биомассы клеток от культуральной жидкости?

8. Что такое дезинтеграция, в каких случаях ее осуществляют?

9. Расскажите об основных методах дезинтеграции клеток.

10. В чем отличие сепарирования от центрифугирования?

11. В каких случаях выполняется стадия очистки целевого продукта?

12. Что такое сорбция ?

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

Приемы и методы стерилизации при работе в биотехнологической лаборатории

Тест 1.

Выпишите правильный ответ:

1. Стерильная культура:
а) содержит бактерии преимущественно 1 вида
б) свободна от любых посторонних микроорганизмов

2. Стерилизацией называется:
а) выделение бактерий и природного источника
б) уничтожение патогенных микроорганизмов
в) уничтожение всех микроорганизмов и их покоящихся форм

3. Перед работой бокс:
а) моют
б) кварцуют
в) моют и кварцуют
г) подметают

4. Стерилизацией называется:
а) выделение бактерий и природного источника
б) уничтожение патогенных микроорганизмов
в) уничтожение всех микроорганизмов и их покоящихся форм

5. Перед работой бокс:
а) моют
б) кварцуют
в) моют и кварцуют
г) подметают

6. На микроорганизмы и их споры губительно действуют:
а) видимая часть солнечного спектра,
б) ультрафиолетовое излучение,
в) g-лучи,
г) ультрафиолетовое излучение, g-лучи

7. К методам стерилизации относят:
а) промывку водопроводной водой
б) промывку дистиллированной водой
в) обработку ультрафиолетовым излучением

8. Расставьте в нужной последовательности операции по стерилизации посуды:
а) промывка дистиллированной водой
б) сушка в сушильном шкафу
в) промывка хромпиком
г) промывка детергентом
д) промывка водопроводной водой
е) стерилизация
ж) закрывание пробками

9. Подберите соответствующие пары:
1. Автоклавирование
2. Дробная стерилизация

а) нагревание до 60-80^оС
б) 105-130^оС + давление 1-2 атм
в) трехкратная обработка текучим паром
г) обработка в сушильном шкафу при 140-180^оС

10. Сделайте расчет концентрации солей в 200 мл маточного раствора макроэлементов среды Мурасиге-Скуга, учитывая, что на литр среды его потребуется 25 мл.
Концентрация солей (мг/л) в 1 литре готовой среды должна быть:

NH₄NO₃ - 1650
KNO₃- 1900
MgSO₄ * 7H₂O - 370
KH₂PO₄ - 170

Тест 2. Разделение и очистка веществ

Вариант 1
Выпишите правильный ответ:

1. Вещество переходит из одной жидкости в другую при
1. твердо-жидкофазной экстракции
2. жидко-жидкофазной экстракции
3. адсорбции
4. сепарации

2. Разделение веществ, при котором биомасса всплывает на поверхности культуральной жидкости
1. фильтрация
2. флотация
3. сепарация

3. Карбоксиметилцеллюлоза это
1. катионит
2. анионит

4. Ионообменная хроматография является частным случем хроматографии
1. бумажной
2. пластиночной
3. колоночной

5. Основоположник хроматографии
1. Сведберг
2. Йенсен
3. Цвет
6. Разрушение связей между носителем и осажденным веществом и перевод его в жидкую форму называется
1. адсорбция
2. электрофорез
3. элюция
4. фильтрация

7. Разделение веществ по массе характерно для
1. аффинной хроматографии
2. бумажной хроматографии
3. ультрацентрифугирования

8. При гель-электрофорезе разделение веществ производят
1. в водном растворе
2. в полиакриламиде
3. в растворе спирта

9. Двумерный гель-электрофорез используют для разделения веществ различающихся
1. массой
2. зарядом
3. массой и зарядом

10. При использовании детергентов молекула вещества
1. ренатурируется
2. денатурируется
3. теряет заряд

11. Додецилсульфат натрия придает молекуле
1. определенную конфигурацию
2. отрицательный заряд
3. положительный заряд

Выпишите недостающее слово:

12. Разделение культуральной жидкости и биомассы называется ____________.
13. Разделение веществ в водном растворе или пористом матриксе в электическом поле называется _________________.

Установите соответствие:

14. Группы методов дезинтеграции	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Ультразвук Б. Осмотический шок В. Декомпрессия Г. Разрушение толуолом Д. Разрушение ферментами

Ответ: 1_______, 2_________.

15. Группы методов осаждения	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Нагревание Б. Концентрирование В. Высаливание Г. Осмотический шок Д. Добавление ацетона

Ответ: 1_______, 2_________.

Вариант 2
Выпишите правильный ответ:

1. Вещество переходит из жидкой фазы в твердую при
1. твердо-жидкофазной экстракции
2. жидко-жидкофазной экстракции
3. адсорбции
4. сепарации

2. Разделение веществ, при котором биомасса остается на поверхности пористой мембраны
1. фильтрация
2. флотация
3. сепарация

3. Диэтиламиноэтилцеллюлоза это
1. катионит
2. анионит

4. Гидрофобная хроматография является частным случем хроматографии
1. бумажной
2. пластиночной
3. колоночной

5. Разделение веществ по скорости их осаждения предложил
1. Сведберг
2. Йенсен
3. Цвет

6. Наибольшая степень очистки веществ достигается при
1. гель-фильтрации
2. электрофорезе
3. аффинной хроматографии
4. гидрофобной хроматографии

7. Разделение веществ по степени сродства к растворителю характерно для
1. гель-электрофореза
2. бумажной хроматографии
3. ультрацентрифугирования

8. При гель-электрофорезе быстрее останавливаются молекулы
1. крупные
2. средние
3. мелкие

9. Двумерный гель-электрофорез протекает в
1. 1 этап
2. 2 этапа
3. 3 этапа

10. Хлористый цезий используется для
1. снятия заряда
2. разделения в градиенте плотности
3. дентаурации белка

11. Додецилсульфат натрия это
1. адсорбент
2. детергент
3. ионит

Выпишите недостающее слово:

1. Задержание биомассы на пористой фильтрующей перегородке называется _________.
2. Разделение веществ с различной молекулярной массой и размером в колонке с пористым носителем называется ________________.

Установите соответствие:

14. Группы методов дезинтеграции	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Применение вибраторов Б. Осмотический шок В. Растирание Г. Разрушение толуолом Д. Разрушение антибиотиками

Ответ: 1_______, 2_________.

15. Группы методов осаждения	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Охлаждение Б. Концентрирование В. Высаливание Г. Разбавление Д. Добавление изопропанола

Ответ: 1_______, 2_________.

Вариант 3
Выпишите правильный ответ:

1. Вещество переходит из твердой фазы в жидкую при
1. твердожидкофазной экстракции
2. жидкожидкофазной экстракции
3. адсорбции
4. сепарации

2. Биомасса отделяется от культуральной жидкости в центрифуге при
1. фильтрации
2. флотации
3. сепарации

3. Иониты используют при
1. флотации
2. сепарации
3. адсорбции

4. Тонкослойная хроматография является частным случем хроматографии
1. бумажной
2. пластиночной
3. колоночной

5. Понятие константа седиментации ввел
1. Сведберг
2. Йенсен
3. Цвет

6. В хроматографии на пластинках слой сорбента
1. заряжен положительно
2. инертен
3. заряжен отрицательно

7. В жидкостной хроматографии диаметр носителя равен
1. 1-3 мкм
2. 3-10 мкм
3. 10-30 мкм
4. 100-300 мкм

8. При гель-электрофорезе скорость движениея молекул определяется главным образом
1. величиной заряда
2. массой молекулы
3. размерами ячеек геля

9. При двумерном электрофорезе в качестве детерегента используют
1. додецилсульфат натрия
2. меркаптоэтанол
3. тритон

10. Меркаптоэтанол придает молекуле

1. определенную конфигурацию
2. отрицательный заряд
3. положительный заряд

11. Меркаптоэтанол это
1. адсорбент
2. детергент
3. ионит

Выпишите недостающее слово:
12. Осаждение взвешенных частиц с применением центробежной силы называется __________________.
13. Хроматография, основанная на образовании комплексов с иммобилизованными лигандами называется _____________________.

Установите соответствие:

14. Группы методов дезинтеграции	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Встряхивание со стеклянными бусами Б. Осмотический шок В. Декомпрессия Г. Разрушение бутанолом Д. Разрушение антибиотиками

Ответ: 1_______, 2_________.

15. Группы методов осаждения	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Добавление сульфата аммония Б. Концентрирование В. Разбавление Г. Осмотический шок Д. Органические растворители

Ответ: 1_______, 2_________.

Вариант 4
Выпишите правильный ответ:

1. Вещество переходит из жидкой фазы в твердую при

1. твердожидкофазной экстракции
2. жижкожидкофазной экстракции
3. адсорбции

3. Разрушение связей между носителем и осажденным веществом и перевод его в жидкую форму называется
1. адсорбция
2. элюция
3. фильтрация

4. Разделение веществ по массе характерно для
1. аффинной хроматографии
2. бумажной хроматографии
3. ультрацентрифугирования

5. При гель-электрофорезе разделение веществ производят
1. в водном растворе
2. в полиакриламиде
3. в растворе спирта

6. При двумерном электрофорезе в качестве детерегента используют
1. додецилсульфат натрия
2. меркаптоэтанол
3. тритон

7. Меркаптоэтанол придает молекуле
1. определенную конфигурацию
2. отрицательный заряд
3. положительный заряд

8. Додецилсульфат натрия придает молекуле
1. положительный заряд
2. отрицательный заряд
3. определенную конфигурацию

9. Химическим методом осаждения является

1. применение сульфата магния
2. разбавление
3. концентрироване

10. Физическим методом осаждения является

1. высаливание
2. охлаждение
3. добавление органических осадителей

11. Осаждение органическими ратврителями основано на разрушении

1. молекул белков
2. молекул воды
3. гидратного слоя

Выпишите недостающее слово:
12. Разделение культуральной жидкости и биомассы называется ___________.
13. Хроматография, основанная на образовании комплексов с иммобилизованными лигандами называется _____________________.

Установите соответствие:

14. Группы методов дезинтеграции	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Разрушение бутанолом Б. Осмотический шок В. Разрушение антибиотиками Г. Разрушение ультразвуком Д. Декомпрессия

Ответ: 1_______, 2_________.

15. Вид колоночной хроматографии	Признаки
1. Гель-фильтрация 2. Ионообменная	А. Носитель имеет гидрофобные цепи Б. Носитель имеет поры определенного диаметра В. Гранулы адсорбента заряжены Г. Способность связываься со строго определенными химическими группами

Ответ: 1_______, 2_________.

Вариант 5
Выпишите правильный ответ:

1. Иониты используют при

1. флотации
2. сепарации
3. адсорбции

2. Разделение веществ по скорости их осаждения предложил
1. Сведберг
2. Йенсен
3. Цвет

3. Понятие константа седиментации ввел
1. Сведберг
2. Йенсен
3. Цвет

4. Разрушение связей между носителем и осажденным веществом и перевод его в жидкую форму называется
1. адсорбция
2. элюция
3. фильтрация

5. Разделение веществ по степени сродства к растворителю характерно для

1. гель-электрофореза
2. бумажной хроматографии
3. ультрацентрифугирования

6. При гель-электрофорезе быстрее останавливаются молекулы

1. мелкие
2. средние
3. крупные

7. При использовании меркаптоэтанола молекула вещества

1. теряет заряд
2. ренатурируется
3. денатурируется

8. Хлористый цезий используется для

1. снятия заряда
2. разделения в градиенте плотности
3. дентаурации белка

9. Физическим методом дезинтеграции является

1. применение ультразвука
2. разрушение толуолом
3. разрушение ферментами

10. Физическим методом дезинтеграции является

1. применение антибиотиков
2. разрушение толуолом
3. осмотический шок

11. Химическим методом дезинтеграции является

1. применение вибраторов
2. замораживание-оттаивание
3. применение антибиотиков

Выпишите недостающее слово:
12. Выделение компонентов среды в чистом виде называется ______________.
13. Разделение веществ в водном растворе или пористом матриксе в электическом поле называется _________________.

Установите соответствие:

14. Группы методов осаждения	Методы
1. Физические 2. Химические	А. Органические растворители Б. Концентрирование В. Высаливание Г. Разбавление Д. Декомпрессия

Ответ: 1_______, 2_________.

15. Вид колоночной хроматографии	Признаки
1. Аффинная 2. Гель - фильтрация	А. Носитель имеет гидрофобные цепи Б. Носитель имеет поры определенного диаметра В. Гранулы адсорбента заряжены Г. Способность связываься со строго определенными химическими группами

Ответ: 1_______, 2_________.

Практические задания

Вариант 1: Составить технологическую схему получения биомассы хлебопекарных дрожжей.

Вариант 2: Составить технологическую схему получения лимонной кислоты

Вариант 3: Составить технологическую схему получения витамина В12

Вариант 4: Составить технологическую схему получения лизина

Вариант 5: Составить технологическую схему получения биомассы молочно-кислых микроорганизмов

6. Рекомендуемая литература

п\п	Название учебников, учебных пособий и других источников		Авторы (под ред.)	Издательство	Год издания
п\п	Название учебников, учебных пособий и других источников		Авторы (под ред.)	Издательство	Год издания
Основная:
1.		Основы биотехнологии: учебное пособие	Т. А. Егорова, С. М. Клунова, Е. А. Живухина	М.: Академия	2003
2.		Современная биотехнология	Елдышев Ю.Н.	М:Тайдекс Ко	2004
3.		Гидромикробиологический анализ сточных вод. Методические указания.	Макаревич Е.В. Литвинова М.Ю.	Мурманск МГТУ	2008
4.		Экология микроорганизмов	Нетрусов А.И.	М.: Академия	2004
5		Промышленная микробиология и биотехнология	Макаревич Е.В.	МГТУ	2008
6		Основы промышленной биотехнологии : учеб. пособие для вузов	Бирюков, В. В.	М. : Колос	2004
7		Молекулярная биотехнология : Принципы и применение / пер. с англ. Н. В. Баскаковой	Глик, Б.	М. : Мир	2002
8		Теоретические основы биотехнологии и практические аспекты их использования при производстве ряда биологически активных веществ из сырья животного, водного и растительного происхождения в народном хозяйстве России и медицине. Ч.1,2	Семенов, Б. Н.	КГТУ. - Калининград	2003
9		Микроорганизмы заквасок кисломолочных продуктов. Методические указания.	Макаревич Е.В., Литвинова М.Ю.	Мурманск МГТУ	2009.
10		Методические указания к лабораторным работам по дисциплине «Ведение в биотехнологию»	Литвинова М.Ю.	Мурманск МГТУ	2006
Дополнительная:
11		Введение в биотехнологию	Бекер М.Е.	М.: Пищевая пром	1978
12		Определитель бактерий Берджи. В 2 т.	Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Смита и др.	М.: Мир	1997
13		Промышленная микробиология.	Под ред. Егорова Н.С.	М.: Высшая школа	1989
14		Техническая микробиология рыбных продуктов.	Дутова Е.Н. и др. .	М.: Пищевая пром	1976
15		Микробиология пищевых производств.	Вербина Н.М., Каптерова Ю.В.	М.: Агропромиздат	1988
16		Основные питательные среды для культивирования микроорганизмов. Приготовление питательных сред. Методические указания к выполнению лабораторной работы.	Богданова О.Ю., Макаревич Е.В.	Мурманск МГТУ	2002
17		Микробиология продуктов животного происхождения	Мюнх Г.Д., Заупе Х., Шрайтер М.и др.	М.: Агропромиздат	1985
18		Микробиология в пищевой промышленности.	Жвирблянская А.Ю., Бакушинская О.А.	М.: Пищевая пром-сть	1975

Дата добавления: 2021-01-20; просмотров: 266; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

Мы поможем в написании ваших работ!