ТРЕБОВАНИЯ К УТИЛИЗАЦИИ (УНИЧТОЖЕНИЮ)

ИНСТРУКЦИЯ

По применению медицинского изделия

Питательная среда для бактериологических исследований

Колумбийский агар сухой по ТУ 20.59.52-307-78095326-2018

НАЗНАЧЕНИЕ

Питательная среда для бактериологических исследований Колумбийский агар сухой по ТУ 20.59.52-307-78095326-2018 (далее по тексту – Колумбийский агар) предназначен для бактериологических исследований in vitro в клинической лабораторной диагностике с целью первичного выделения из клинического материала широкого спектра микроорганизмов и их культивирования.

Колумбийский агар используется в качестве основы при приготовлении кровяного агара путем добавления в него 5-10 % дефибринированной бараньей крови*⁾ (далее по тексту кровяной агар). Кровяной агар применяется для выделения из клинического материала большинства клинически значимых микроорганизмов (в том числе требовательных), их культивирования и выявления гемолитической активности при проведении микробиологической диагностики in vitro.

Область применения Колумбийского агара – клиническая лабораторная диагностика.

ХАРАКТЕРИСТИКА

Колумбийский агар представляет собой мелкодисперсный порошок светло-жёлтого цвета, который получают смешиванием сухих компонентов.

Колумбийский агар выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.

*)Кровь в комплект поставки не входит. Используемая для приготовления кровяного агара кровь должна быть разрешена к применению в установленном порядке

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Совокупность компонентов, входящих в состав питательной среды, обеспечивает рост широкого спектра микроорганизмов. Добавление дефибринированной бараньей крови к питательной среде позволяет культивировать многие виды требовательных микроорганизмов, включая пневмококки, листерии и коринебактерии, дает возможность наблюдать гемолитическую активность микроорганизмов и дифференцировать их по типу гемолиза:

α-гемолиз – питательная среда в зоне роста микроорганизмов приобретает зеленоватый оттенок за счет частичного разрушения эритроцитов и превращения гемоглобина в метгемоглобин; наиболее часто α-гемолиз вызывают зеленящие стрептококки;

β-гемолиз – обесцвечивание питательной среды в зоне роста микроорганизмов за счет полного лизиса эритроцитов крови, такой тип гемолиза характерен для стафилококков, β-гемолизирующих стрептококков, листерий, клостридий и некоторых других микроорганизмов;

γ-гемолиз – отсутствие гемолиза, цвет кровяного агара не изменяется.

СОСТАВ

Состав Колумбийского агара, г/л:

Панкреатический гидролизат казеина сухой . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10,0

Дрожжевой экстракт . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5,0

Пептон мясной . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5,0

Натрий хлористый . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . 5,0

Крахмал растворимый . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1,0

Агар бактериологический . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . (12,0±2,0)

рН от 7,0 до 7,4

Определение pH проводят потенциометрическим методом с применением стеклянного электрода в соответствии с МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических питательных сред» в экстракте, приготовленном путем добавления к 2,00 г сухой питательной среды 100 мл дистиллированной воды, настаивания с периодическим перемешиванием в течение 1 ч при температуре от 18 до 25 °С и последующего фильтрования через бумажный фильтр. Величина рН, определенная по МУК 4.2.2316-08, является условной величиной, которая соответствует значению рН готовой среды и может незначительно меняться после стерилизации. Пределы значения рН, указанные выше, учитывают отклонения рН после стерилизации.

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Специфическая активность.

Специфическая активность Колумбийского агара и кровяного агара оценивается по показателям чувствительности, скорости роста и проявлению типичных морфологических свойств тест-штаммов.

5.1. Колумбийский агар, приготовленный по п. 9.1.1 настоящей инструкции, должен обеспечивать через 18-24 ч инкубации при температуре (37±1) °С в атмосфере 5-10 % CO₂ рост следующих тест-штаммов при посеве 0,1 мл взвеси из разведения 10^-6:

Streptococcus pyogenes Dick-1 в виде белых слизистых блестящих колоний диаметром 1,0-2,0 мм;

Staphylococcus aureus АТСС 25923 в виде белых слизистых блестящих колоний диаметром 0,5-2,0 мм.

5.2. Кровяной агар, приготовленный по п. 9.1.2 настоящей инструкции, должен обеспечивать через 18-24 ч инкубации при температуре (37±1) °С в атмосфере 5-10 % CO₂ рост следующих тест-штаммов:

Neisseria meningitidis ATCC 13102 при посеве 0,1 мл взвеси из разведения 10^-6 в виде полупрозрачных блестящих сероватого цвета колоний диаметром 0,5-1,5 мм с идеально ровными краями и отсутствием зон гемолиза;

Streptococcus pyogenes Dick-1 и Staphylococcus aureus АТСС 25923 при посеве 0,1 мл взвеси из разведения 10^-6 в виде белых слизистых блестящих колоний диаметром 0,5-2,0 мм с зоной просветления (β-гемолиз) вокруг них;

Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 при посеве 0,1 мл взвеси из разведения 10^-5в виде мелких полупрозрачных чётко очерченных, не склонных к слиянию колоний диаметром менее 1,0 мм с зоной α-гемолиза вокруг них.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

6.1. Потенциальный риск применения Колумбийского агара в соответствии с Приказом МЗ РФ № 4н от 06.6.2012 – класс 2 б.

6.2. Колумбийский агар не содержит пожароопасных и взрывоопасных веществ. Во время работы необходимо использовать индивидуальные средства защиты органов дыхания и рук по ГОСТ 12.4.011-89.

6.3. Меры предосторожности при проведении исследований образцов клинического материала – соблюдение правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».

Уничтожение приготовленного Колумбийского агара и кровяного агара после проведения исследований осуществляется по СанПиН 2.1.7.2790-10 как медицинские отходы, принадлежащие к классу «Б» с обязательным предварительным обезвреживанием путем автоклавирования в течение 2 ч при температуре (126±2) ˚С.

6.4. При использовании Колумбийского агара по назначению и в соответствии с инструкцией противопоказаний к применению нет.

ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

- весы лабораторные 2 класса точности

- автоклав;

- чашки Петри;

- пипетки стеклянные или механические, позволяющие отбирать объёмы жидкости 5 мл;

- вода дистиллированная;

- кровь баранья дефибринированная стерильная;

- колбы стеклянные, объёмом не менее 1 л;

- термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С;

- оборудование и материалы для поддержания атмосферы с содержанием 5-10 % CO₂ (анаэростат с газогенерирующим пакетом, «свечной» сосуд с парафиновой свечой или CO₂-инкубатор).

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Основным биологическим материалом для исследования служат образцы клинического материала, взятые от больных (кровь, мокрота, моча, спинномозговая жидкость и другой биологический материал, подозрительный на содержание патогенов).

8.1. В Приказе Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений», МУК 4.2.1887–04 и других нормативных документах для каждого конкретного случая указан способ забора и подготовки материала для исследования. Для проведения бактериологического исследования клинический материал от больных должен быть взят по возможности до назначения антибактериальных препаратов, точно из больного органа, в достаточном количестве и доставлен в лабораторию в течении двух часов в термоконтейнере или в течении 2 суток при условии хранения и транспортирования материала при температуре 2-8°С в специальных транспортных средах, разрешенных к применению и зарегистрированных в установленном порядке.

8.2. Идентификацию выросших микроорганизмов проводят в соответствии с Приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535, МУК 4.2.1887–04 и другими нормативными документами. Лабораторная диагностика основана на результатах бактериологического исследования. Бактериологическое исследование включает в себя микроскопию мазков из исследуемого материала, выделение чистой культуры и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим, ферментативным и патогенным свойствам, гемолитической активности на кровяном агаре.

Колумбийский агар и питательные среды на основе колумбийского агара^*) также используются при работе с чистыми культурами микроорганизмов.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Исследование проводят в условиях бактериологической лаборатории медицинскими специалистами (например, врач клинической лабораторной диагностики, врач-бактериолог, врач - медицинский микробиолог, врач-лаборант, иной специалист, ознакомленный с требованиями настоящей Инструкции по применению).

9.1. Подготовка к анализу

9.1.1. Приготовление Колумбийского агара.

Навеску Колумбийского агара в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, тщательно размешивают в 1 л дистиллированной воды по ГОСТ 6709-72, нагревают до кипения, стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 15 мин. Среду охлаждают до температуры (45±5) °С и разливают по (20±5) мл в стерильные чашки Петри.

9.1.2. Приготовление кровяного агара.

В 1 л раствора Колумбийского агара, приготовленного по п. 9.1.1. и охлажденного до температуры (45 ± 5) °С, добавляют 50,0 мл стерильной бараньей дефибринированной крови, взбалтывают, избегая образования пены, и разливают по (20±5) мл в стерильные чашки Петри диаметром 90 мм.

_______________________________________________________________

*)В соответствии с МУК 4.2.1887–04 «Лабораторная диагностика менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов»

9.2. Готовые среды в чашках Петри можно использовать в течение 10 дней после

приготовления при условии хранения их в защищенном отсвета месте при температуре от 2 до 8 ºС.

9.3. Посев и учет результатов осуществляют в соответствии с требованиями Приказа Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535, МУК 4.2.1887–04 и другими нормативными документами, регламентирующими проведение анализа конкретного клинического образца с использованием кровяного агара или Колумбийского агара.

ТРЕБОВАНИЯ К УТИЛИЗАЦИИ (УНИЧТОЖЕНИЮ)

10.1. Серии Колумбийского агара, пришедшие в негодность, серии с истекшим сроком годности, а также упаковка (полиэтиленовые банки) после полного израсходования содержимого, подлежат утилизации (уничтожению) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 как отходы, принадлежащие к классу «А» - (эпидемиологически безопасные отходы, приближенные по составу к твердым бытовым отходам), любым способом, предотвращающим повторное использование.

10.2.Утилизация (уничтожение) осуществляется предприятиями, имеющими соответствующую лицензию, на специально оборудованных площадках, полигонах и в помещениях с соблюдением обязательных требований нормативной документации по охране окружающей среды. Персонал, осуществляющий уничтожение изделий должен соблюдать правила безопасности проведения способа уничтожения.

10.3. Обращение с отходами следует выполнять согласно схеме, принятой в конкретной медицинской организации, использующей в своей работе медицинские изделия. Данная схема разрабатывается в соответствии с требованиями вышеуказанных санитарных правил и утверждается руководителем организации. Ответственность за уничтожение изделия несут субъекты обращения изделий.

Дата добавления: 2020-12-22; просмотров: 62; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

12 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!