Микробиологическая диагностика



БОТУЛИЗМ-

Это инфекционное заболевание, которое вызывается Clostridium botulinum,характеризуется тяжёлым течением с поражением ц.н.с.

История. Название болезни происходит от латинского слова «botulus»-колбаса. Первое описание эпидемиологии и клиники отравления колбасным ядом представил Кернер в 1817г. Через год Зенгбуш в России дал аналогичное описание отравления рыбным ядом. В 1896г. был выделен возбудтель.

Этиология. Возбудитель имеет вид палочки с закруглёнными концами, анаэроб, образует споры, в анаэробных условиях споры прорастают в вегетативную форму, которая продуцирует очень сильный экзотоксин. Вегетативная форма подвижна, имеет 3-35 жгутиков. Различают 7 типов возбудителя: А, В, С, Д, Е, и т.д., они различаются по антигенной структуре. У нас встречается типы А, В, Е. Возбудитель ботулизма обитает в почве, в воде, в кишечнике рыб, у травоядных животных. Из почвы возбудитель попадает в пищевые продукты-консервы, овощи, фрукты, грибы.

Вегетативная форма не устойчива во внешней среде, быстро погибает при нагревании. Споры выдерживают кипячение в течении 5-8 часов, погибая лишь при автоклавировании(t-120град.-20-30 мин.).

Эпидемиология. Основным резервуаром возбудителя ботулизма, являются теплокровные травоядные животные, реже холоднокровные(рыбы, ракообразные), которые поглощают споры с водой или с кормом. В кишечнике животных клостридия размножается и выводится с испражнениями во внешнюю среду. Человек заражается боьулизмом при употреблении в пищу продуктов, инфицированных спорами. 90% случаев ботулизма связано с употреблением продуктов домашнего консервирования-грибы, овощи, мясные консервы. Известны спорадические случаи заболевания и групповые вспышки, в летнее и осеннее время.

Патогенез. При употреблении инфицированных продуктов в организм человека попадают вегетативные формы возбудителя и ботулотоксин, который из кишечника попадает в кровь. Токсин вызывает сужение сосудов с последующим их парезом и повышенной ломкости капилляров. Из крови токсин поникает во внутренние органы, особенно чувствителен к токсину мотонейроны продолговатого и спинного мозга. Ботулотоксин нарушает передачу импульса, в больших дозах угнетает тканевое дыхание головного мозга.

Клиника. Инкубационный период-от 2 часов до 8-10 дней. В клинике различают ряд синдромов:1) инфекционно-токсический;2) диспепсический; 3)офтальмо-плегический; 4) бульбарный; 5) миастенический. Заболевание появляется внезапно: появляется боль в животе, тошнота(один из первых признаков заболевания). Жалобы на головную боль, головокружение, сухость во рту, быструю утомляемость. Через 3-4 часа появляется симптомы поражения черепно-мозговых нервов, первыми появляются симптомы поражения глаз: ослабление зрения, «туман» перед глазами, двоение (диплопия), в дальнейшем-мидриаз (расширение зрачков), анизокория (неравномерное расширение зрачков), нистагм( подёргивание глазного яблока), птоз(опущение верхнего века), стробизм(косогпазие). Наряду с глазными симптомами рано появляется нарушение глотания и речи, обусловленные поражением ядер 9 и 12 пар черепно-мозговых нервов. Жалобы при этом-затруднение при глотании, попёрхивание, набдюдается расстройство секреции слюны и слизи: сухость во рту, нарушение глотания, осиплость голоса, жажда. Поражается сердечно-сосудистая система: тоны сердца глухие, экстрасистолия, бради- или тахикардия(обычно в конце заболевания и долго сохраняется в периоде выздоровления). Нарушается дыхание: затруднён вдох, затем появляется дыхание Чейн-Стокса(патологический тип дыхания), чувство сдавления и сжатия в груди, при ясном сознании, смерть наступает от паралича дыхания. Выздоровление медленное-неделями, а при тяжёлом течении месяцами. Начинается выздоровление с восстановления дыхания и глотания, труднее и медленнее восстанавливается сердечно-сосудистая система, спустя 3-4 месяца ещё сохраняется одышка, сердцебиение частое.

Диагностика. Учитывают эпидемиологический анамнез(употребление консервированных пищевых продуктов, в основном грибов маринованных домашнего приготовления, вяленой или сушёной рыбы, мясных консерв домашнего приготовления), учитывают клинические проявления: адинамия, сухость во рту, офтальмо-неврологические и бульбарные расстройства. Подтверждают диагноз-лабораторными методами: для исследования берут кровь, промывные воды желудка,рвотные и каловые массы и подозрительный пищевой продукт.

Микробиологическая диагностика

Для проведения микробиологической диагностики из исследуемого биоматериала выделяют возбудителя и определяют моноспецифический токсин (А, В, Е и др.).

Возбудитель обнаруживается путём посевов на питательные анаэробные среды. Для определения токсина используют биологическую пробу и реакцию нейтрализации на лабораторных мышах. Группе животных (обычно 5) вводят специально приготовленную жидкость с экстрактом культуры, полученной в исследовании биоматериала. Двум грызунам вводят живой материал, а трём — обезвреженный разными видами сыворотки по типам специфического токсина.

Если две мыши, которым вводили живой материал, умирают, диагноз считается подтверждённым. Специфический токсин и необходимую для лечения сыворотку определяют по одному выжившему животному из трёх, которым вводили культуры Clostridium botulinum с сывороткой.

Бактериологическая проба

Бактериологическое исследование основано на особенностях жизненного цикла Clostridium botulinum. Собранный биоматериал помещают в пробирки на питательные среды и наблюдают за ростом бактерий. Клостридии типов А,B,С,D растут при температуре 30-40 °С, типа Е — 25-37 °С, типа G — 30-37 °С.

Для иммуноферментного анализа(ИФА) используют венозную кровь. Из неё получают сыворотку, в которую вводят соответствующие заболеванию антитела, помеченные ферментами. Образовавшийся иммунный комплекс вступает в реакцию с ферментом, что вызывает изменение цвета. Инструментальная оптическая оценка плотности цвета позволяет понять, заражён ли человек ботулизмом. Метод дот-иммуноанализа

Этот метод позволяет поставить диагноз в течение 3 часов, что жизненно важно при заражении ботулизмом. С его помощью также можно определить, есть ли возбудители ботулизма в продуктах питания.

Для определения возбудителя исследуемый материал помещают на фильтре с содержанием противоботулинических антител. Затем фильтр обрабатывают проявителем, сравнивают полученную картину с клиническими образцами.

Если биоматериал содержит токсины, фильтр изменяет интенсивность цвета. По силе изменений с помощью контрольной шкалы определяют уровень интоксикации организма.


Дата добавления: 2020-11-27; просмотров: 60; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!