Работа 4. Вычисление цветового показателя
Цель работы: научиться рассчитывать цветовой показатель крови.
Величина 33,4 пг, представляющая собой условное нормальное содержание гемоглобина в одном эритроците, принимается за единицу и обозначается цветовым показателем (ЦП). На величине цветового показателя основана клиническая классификация анемий: при гипохромной анемии ЦП ниже 0,85, при нормохромной ЦП=0,85-1,05, при гиперхромной ЦП больше 1,05.
Цветовой показатель рассчитывают по формуле: ЦП = Гф/Гн : Эф/Эн, где
Гф – найденное (фактическое) количество гемоглобина в г/л;
Гн – условное нормальное количество гемоглобина в крови человека – 166,7 г/л;
Эф – найденное (фактическое) количество эритроцитов;
Эн – условное нормальное количество эритроцитов (5∙1012/л).
В протокол необходимо записать формулу и результаты расчета ЦП.
В заключении следует указать на степень соответствия полученных результатов нормальным величинам.
Работа 5. Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) по методу Панченкова
Цель работы: знакомство с методикой определения СОЭ.
Для работы необходимы: исследуемая кровь, прибор Панченкова, часовое стекло, 5%-ный раствор лимоннокислого натрия, спирт, вата.
Ход работы
1.Промывают капилляр Панченкова 5%-ным раствором лимоннокислого натрия. Набирают в пробирку раствор до метки «50» (Р) и выдувают его на часовое стекло.
2. Дважды набирают в капилляр кровь до метки «0» (К). Кровь выдувают на часовое стекло в каплю раствора лимоннокислого натрия, каждый раз тщательно смешивая ее с раствором путем выдувания через капилляр воздушной струи, направленной на смесь крови с цитратом.
|
|
|
3. Промывают капилляр раствором лимоннокислого натрия, заполняют капилляр полученной цитратной кровью точно до метки «0» (К) и помещают в штатив строго вертикально.
4. Через один час определяют, на сколько миллиметров осели эритроциты, и результаты вносят в протокол.
В заключении следует указать, соответствует ли полученный результат данным, характеризующим СОЭ здорового человека.
Работа 6. Гемолиз
Цель работы: убедиться в возможности развития осмотического и химического гемолиза.
Для работы необходимы: исследуемая кровь, 4 пипетки емкостью 2 мл, дистиллированная вода, кислота (любая), 0,9%-ный раствор хлористого натрия, 0,3%-ный раствор хлористого натрия, спирт, вата.
Ход работы
4 пробирки ставят в штатив, нумеруют и наливают в них:
1) 2 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия;
2) 2 мл дистиллированной воды;
3) 2 мл 0,3%-ного раствора хлористого натрия;
4) 2 мл кислоты.
Добавляют в каждую пробирку по две капли крови и смешивают содержимое; результат читают через 30 минут. При наличии гемолиза над осевшими эритроцитами появляется розовое окрашивание.
|
|
|
В заключении следует сделать выводы об отсутствии или наличии гемолиза и объяснить его механизмы в разных пробирках.
Работа 7. Определение групповой принадлежности крови по системе АВО
Цель работы: знакомство с методикой определения групповой принадлежности крови по системе АВО.
Для работы необходимы: исследуемая кровь, стандартные сыворотки всех групп двух разных серий, изотонический раствор хлористого натрия, предметные стекла, пипетки, стеклянные палочки, карандаши для записи по стеклу, спирт, вата.
Ход работы
Определение группы крови производят при температуре 15-20◦С.
1. На чистые предметные стекла в обозначенные участки наносят по капле сыворотки Ι, IΙ, IΙI групп двух серий (всего шесть капель).
2. В каждую каплю сыворотки с помощью стеклянных палочек или разных углов чистых предметных стекол вносят небольшое количество крови и размешивают. Соотношение объемов крови и сыворотки должно составлять примерно 1:10.
3. Покачивают стекла в течение пяти минут.
4. По мере наступления агглютинации, но не раньше, чем через три минуты, в каждую смесь добавляют по капле изотонического раствора хлористого натрия для предупреждения образования «монетных столбиков» из эритроцитов.
|
|
|
5. Определяют наличие агглютинации в каждой капле. При отсутствии агглютинации во всех каплях кровь относят к Ι группе. При отсутствии агглютинации в сыворотке IΙ группы и наличии ее в сыворотках I и ΙII групп кровь относят ко ΙI группе. При отсутствии агглютинации в сыворотке IΙI группы и наличии ее в сыворотках I и II групп кровь относится к III группе. При наличии агглютинации во всех сыворотках кровь можно отнести к IV группе. В этом случае для исключения неспецифической агглютинабельности исследуемых эритроцитов необходимо провести дополнительное исследование со стандартной сывороткой труппы АВ (IV). Отсутствие агглютинации в этой капле позволит считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к IV группе.
Возможные ошибки при проведении работы
1. Оценка реакции как отрицательной при фактическом наличии агглютинации. Это может быть обусловлено:
а) поздней или слабо выраженной агглютинацией в связи с малой активностью стандартных сывороток;
б) нарушением соотношения 1:10 при взятии большого количества крови;
в) наличием температуры воздуха, большей, чем 25◦С, в таких условиях исследование проводят при охлаждении стекла.
|
|
|
2. Оценка реакции как положительной при фактическом отсутствии специфической агглютинации. Это может быть обусловлено:
а) образованием «монетных столбиков»;
б) наличием панагглютинации, которая развивается при температуре 15◦С; для ее исключения следует повторить определение при более высокой температуре;
в) подсыханием сыворотки и образованием по краям капель «зернистости», принимаемой за агглютинацию; это может быть в случаях, когда чтение результатов производят более, чем через пять минут.
В заключении в протокол следует записать, к какой группе относится исследуемая кровь, и тщательно обосновать полученный результат. Для этого необходимо последовательно сделать выводы об отсутствии или наличии агглютиногенов А и В в исследуемой крови по развитию или отсутствию агглютинации в каждой капле сыворотки, а затем подвести общий итог и сделать заключение о группе исследуемой крови, исходя из её антигенного состава. Следует указать, в каких случаях исследуемая кровь может быть использована в качестве донорской.
Рекомендуемая дополнительная литература
Атлас по нормальной физиологии: Пособие для студентов медицинских и биологических спецециальностей вузов / Под ред. Н.А.Агаджаняна. – М.: Высшая школа, 1987.
Воробьев А.И. Руководство по гематологии в 3-х томах. – М., 2003.
Гольдберг Е.Д. и др. Динамическая теория кроветворения. // Бюлл.эксп.биол.мед. 1999. № 5. С. 484-494.
Физиологические системы организма человека, основные показатели (справочное пособие) / Под ред. Г.И. Козинца – Триада-Х, 2000.
Физиология человека. Под ред. Р.Шмидта, Г.Тевса. – В 3-х томах. Издание 2-е. – М.: Мир, 1996. Том II, Гл. 18.
Фундаментальная и клиническая физиология. Перев. с англ. и нем. Под ред. А.Камкина и А.Каменского. М.: Академия, 2004. Гл IХ.
Хаитов Р.М. Физиология иммунной системы. // Рос. физиол. журн. 2000. № 3. С. 252-267.
Глава III
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 124; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!