Механизм и этапы окраски по Граму
1. На фиксированный мазок нанести карболово-спиртовой раствор генцианового фиолетового. Через 1 минуту экспозиции перейти к п.2.
2. Нанести раствор Люголя на 1-2 мин (йод).
3. Обесцветить этиловым спиртом в течение 30-60 сек. до прекращения отхождения фиолетовых струек красителя.
4. Возможно дополнительно промыть мазок водой.
5. Докрасить водным раствором фуксина в течение 1-2 мин,
6. Промыть водой, высушить и микроскопировать.
Грамположительные бактерии окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, грамотрицательные - в красный.
Механизм и этапы окраски по Цилю-Нельсону
1. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина и подогреть до появления паров в течение 3-5 мин.
2. Промыть мазок водой
3. Нанести 5% раствор серной кислоты на 1-2 мин для обесцвечивания.
4. Промыть мазок водой
5. Докрасить мазок водным раствором метиленового синего в течение 3-5 мин
6. Промыть водой, высушить и микроскопировать
Некислоустойчивые – обесцвечиваются и окрашиваются метиленовым синим в голубой цвет, а кислоустойчивые остаются окрашенными фуксином в красный.
Метод Бурри-Гинса используется для окраски капсульных бактерий и основан на том, что капсула не воспринимает красители. Капсулу выявляют негативным контрастированием фона по Бурри. Для этого черную тушь смешивают c культурой и высушивают. После этого проводят фиксацию в пламени горелки, окрашивают тела микробных клеток по Гинсу - водным фуксином в течение 1 минуты и промывают водой 5-10 секунд.
|
|
|
Окраска по Леффлеру. Способ метахроматического выявления волютиновых зерен у коринебактерий. Для окраски используют щелочной раствор метиленового синего, который наносят на 3 - 5 мин на фиксированный мазок, после чего смывают водой, мазок высушивают и микроскопируют. Протоплазма бактерий окрашивается в голубой цвет, волютиновые зерна - в темно-синий.
Окраска по Нейссеру. Метод выявления волютиновых зерен у коринебактерий. Фиксированный мазок 2 - 3 мин красят уксуснокислым синим, 10 - 30 секунд обрабатывают раствором Люголя, слегка промывают водой и докрашивают в течение 30 секунд раствором везувина, высушивают и микроскопируют. Бактерии окрашиваются в желтый цвет, волютин -в темно-синий.
Окраска риккетсий по Здродовскому. Тонкий мазок фиксируют на пламени горелки. Окраску производят разведенным карболовым фуксином в течение 5 минут. Окрашенный препарат промывают водой, а затем обесцвечивают в растворе 0,01% соляной кислоты в течение 2—3 секунд. Затем препарат промывают водой и докрашивают 0,5% раствором метиленовой сини в течение полминуты. В препарате на синем фоне будут видны окрашенные в красный цвет риккетсии.
|
|
|
Окраска по Романовскому—Гимзе. Краска Гимзы — смесь азура (органическая краска, получаемая из метиленового синего), эозина и метиленовой сини. Будучи в растворе синего цвета, она окрашивает клеточную цитоплазму в голубой цвет, а ядра клеток, зернистость, слизь, капсулы бактерий — в красно-фиолетовый цвет.
Окраска по Романовскому—Гимзе является одним из основных методов при изучении морфологии простейших, спирохет, а также при исследовании форменных элементов крови.
Способ применения. К 10 мл дистиллированной воды перед окрашиванием препарата прибавляют 10 капель краски Гимзы и тотчас же наливают на фиксированный препарат (или погружают препарат в стаканчик с краской). Через 1 час краску сливают, препарат промывают водой, высушивают на воздухе и исследуют.
Дата добавления: 2020-04-08; просмотров: 334; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!