Методы определения гомогенности белков
Степень чистоты выделенного белка определяется:
ü ультрацентрифугированием;
ü методом диск - электрофореза;
ü различными иммунохимическими методами;
ü определением растворимости белка (метод Нортропа) основан на правиле фаз, согласно которому растворимость чистого вещества при данных условиях опыта зависит только от температуры, но не зависит от концентрации вещества в твердой фазе.
| Если белок гомогенный, то на графике получается один перегиб (а), если есть примеси белков (б, в), то получим несколько перегибов кривой насыщения. У всех белков свои индивидуальные кривые растворимости. |
ЛЕКЦИЯ 4
НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ
В 1868 г. швейцарский ученый Ф. Мишер выделил из ядер лейкоцитов вещество, названное им нуклеином (от греч. nucleus – ядро). В 20-м столетии стало известно химическое строение нуклеина – его назвали ДНК. Позднее открыли и РНК. Мишер определил, что нуклеин содержит большое количество Р, нуклеин обладал выраженными кислыми свойствами. К середине 20 в. было обнаружено, что нуклеиновые кислоты в организме находятся в комплексе с белками, то есть в виде нуклеопротеидов и участвуют в передаче наследственных признаков.
Состав нуклеиновых кислот
| АО | |
|
| |
| производные пурина | производные 2-оксопиримидина |
| 
|
| Аденин А (6-аминопурин) Гуанин Г ( G) (2-амино-6-оксопурин) | Цитозин Ц, С (2-оксо-4-аминопиримидин) Урацил У, ( U) (2,4-диоксопиримидин) Тимин Т (5-метил-2,4-диоксопиримидин) |
Кроме главных АО, в нуклеиновых кислотах встречаются минорные пуриновые и пиримидиновые АО (гидроксилированные и метилированные) – до 10% всех нуклеотидов – Т-РНК. В ДНК они встречаются реже.
|
|
|
| 
|
| дигидроурацил | псевдоуридин |
Углеводная часть
| 
|
| рибоза (b-Д-рибофураноза) – в составе РНК | дезоксирибоза (b-Д-2¢-дезоксирибофураноза) – в составе ДНК |
Нуклеиновые кислоты (НК) бывают двух типов: ДНК и РНК.
Мономерным звеном нуклеиновых кислот являются мононуклеотиды, которые состоят из 3-х компонентов: азотистого основания (АО), углеводной части и остатка фосфорной кислоты.
Состав нуклеиновых кислот
Дезоксирибоза
Таким образом, звеном нуклеиновых кислот являются мононуклеотиды, состоящие из трех химически связанных компонентов. Соединение АО с сахаром называется нуклеозидом. Он образуется из мононуклеотида путем отщепления Н3РО4 при гидролизе или под воздействием специфических факторов.
Соединение этих трех компонентов происходит за счет b-N-гликозидной связи N1- пиримидинового или N9 пуринового азотистого основания с С1¢ атома пентозы и за счет сложноэфирной связи С5¢ атома пентозы и фосфорной кислотой.
|
|
|
|
| |
| 5¢-цитидиловая кислота цитидин-5¢-фосфат (5¢-дезоксицитидиловая) 5¢-уридиловая 5¢-адениловая 5¢гуаниловая | ЦМФ (5¢-дезоксицитидиловая) (5¢-дезоксиадениловая) (5¢-дезоксигуаниловая) |
| Если нуклеозид соединяется 1, 2 или 3 атомами Фн, то мононуклеозид называется соответственно цитидинмонофосфат – ЦМФ, цитидиндифосфат – ЦДФ, цитидинтрифосфат – ЦТФ |
Первичная структура нуклеиновых кислот – это порядок, последовательность расположения мононуклеотидов в полинуклеотидные цепи ДНК или РНК, соединенных между собой 3¢5¢-фосфодиэфирной связью.
|
Дата добавления: 2019-07-15; просмотров: 551; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!