Определение степени зрелости гонад
В настоящее время в связи с изменением динамики хода производителей на нерест в результате зарегулирования рек возникли большие затруднения в отборе производителей, наиболее пригодных для рыбоводных целей. Это требует прижизненного определения не только состояния производителей, но и их гонад.
Экспресс-метод определения степени зрелости гонад у производителей осетровых.
Метод «щуповых проб». Для оценки зрелости гонад может быть использован метод «шуповых проб», предложенный В.В. Урусовым (1964) и усовершенствованный Б.Н. Казанским с соавторами (1978). Исследования (Казанский, 1962, 1967, 1975) показали, что при завершении преднерестовой IV-й СЗ гонад в яйцеклетках старшей генерации усиливается поляризация, ядро выходит из зоны крупнозернистого желтка и приближается к оболочкам в районе микропиле. Только после того, как ядро займет определённое положение, возможен нормальный ответ на однократную гипофизарную инъекцию. Воздействуя малыми дозами суспензии гипофиза (градуальные или дробные инъекции), можно ускоренно завершить процесс поляризации и подготовить производителей к нормальному созреванию половых продуктов после обычной гипофизариой инъекции.
Для определения степени поляризации ооцитов у производителей осетровых берут щуповые пробы из каудальной части яичника. Щуп вводится в полость тела под углом 30°, чтобы не задеть жизненно важные органы.
|
|
|
Для определения степени завершения IV-й СЗ извлечённые щупом икринки разрезают острым лезвием безопасной бритвы точно по оси от анимального полюса к вегетативному и затем рассматривают и измеряют под лупой или бинокуляром. По положению ядра относительно анимального полюса определяют показатель поляризации I:
I = А/В,
где А — расстояние от ядра до оболочки анимального полюса ооцита;
В — наибольшее расстояние по оси от анимального до вегетативного полюса.
Чем меньше значениеI, тем больше поляризован ооцит и тем больше завершённость IV-й СЗ гонад.
Установлено, что нормальная реакция на гипофизарную инъекцию наступает в случае если I ≤ 0,07.
Наибольшая поляризация обычно характеризуется:
I = от 1/30 до 1/40 (от 0,025 до 0,033).
Щуп позволяет брать пробы гонад и у самцов. Мазок семенника на предметном стекле рассматривается под микроскопом при среднем увеличении (объектив 20х или 40х, окуляр 7 х) и косом освещении, Наличие множества сформированных сперматозоидов свидетельствует о возможности их нормального созревания.
Модифицированный щуповой метод В.Ф. Гончарова. В пределах группы самок с гонадами в завершённой IV-й СЗ можно отбраковывать самок, дающих икру низкого рыбоводного качества, с помощью модификации щупового метода определения зрелости гонад, предложенной В.Ф. Гончаровым (1976).
|
|
|
Взятые с помощью щупа фолликулы помещают в раствор Рингера с прогестероном 5 мкг/мл и через 18то варят в воде, разрезают и определяют сохранилось ли у них ядро (зародышевый пузырёк). Самок, в ооцитах которых ядро сохраняется дольше 18то не следует использовать для рыбоводных целей.
Состав раствора Рингера для холоднокровных (модификация В.Ф. Гончарова):
Na — 6,5 г;
КСl — 250 мг;
СаСl2 – 300 мг;
NaHC03 — 2,0 г;
вода дистиллированная — 1 л;
желательно, но не обязательно добавить антибиотики: пенициллин — 500000 ед.
и стрептомицин — 0,25 г на 1 л раствора.
Методы стимулирования созревания половых клеток у различных
Биологических групп осетровых
Работа с озимыми группами осетровых. К озимым относятся: озимый осётр летнего и осеннего хода в Волге, озимая севрюга в реках Волга, Кура, Дон, Кубань и озимая белуга Волги и Урала. Естественный нерест у озимых групп происходит в конце апреля – мае. Они составляют значительную долю нерестовой популяции, поэтому рыбоводное освоение их имеет большое значение.
Существуют две модификации комбинированного способа получения зрелых половых клеток от озимых форм осетровых — экологический в сочетании с одной гипофизарной инъекцией и экологический с повторными градуальными инъекциями. Сначала воспроизводят нормальные условия зимовки, выдерживая производителей в зимовальных прудах или бассейнах с нерегулируемой температурой, где производители зимуют при той же температуре, что и в реке, или терморегулируемых бассейнах Б.Н. Казанского при температуре 2-3°С. В этих условиях происходит значительный рост ооцитов, а через девять месяцев гонады достигают завершённой IV СЗ.
|
|
|
Стимулировать переход гонад из незавершённой в завершённую IV СЗ удаётся и за более короткий срок при помощи повторных градуальных инъекций суспензии гипофизов. Например, самкам озимых осетров инъецируют небольшую дозу в два-три приёма, а через 24 ч большую дозу.
Озимых осетровых можно использовать: после выдерживания — для обеспечения личинками первого тура, а при сдвиге полового цикла — второго тура.
Работа с яровыми группами осетровых. Естественный нерест у ранних яровых форм — середина мая – начало июня, поздних яровых — июль август. Нерестовый ход яровых весенне-нерестующих белуги, осетра, севрюги и шипа в настоящее время в связи с гидростроительством нарушился, изменились их физиологическое состояние и структура нерестовых популяций. В результате, даже во время пика массового захода производителей в реки в мае месяце, в нерестовой части популяции присутствует значительная часть самок с гонадами в IV незавершённой СЗ. Встречаются самки с гонадами в III—IV СЗ даже в июне. В результате производители осетровых, которых отлавливают на промысловых тонях, для заводского разведения оказываются очень неоднородными и от большинства из них нельзя получить зрелые половые клетки.
|
|
|
Первым этапом работы с яровыми осетровыми является отбор производителей с текучими половыми продуктами и с гонадами в IV завершённой СЗ. От первых можно сразу получить икру и молоки, пригодные для рыбоводных целей, от вторых — после кратковременного (1–3 сут) выдерживания в прудах, садках или бассейнах и однократной инъекции препарата гипофиза или сурфагона.
Для получения половых продуктов у производителей с ооцитами в IV незавершённой СЗ их выдерживают более длительное время (до 1,5 мес.) и применяют повторные «градуальные» инъекции (сначала вводят в несколько приёмов очень небольшие дозы препарата, которые ускоряют поляризацию ооцитов и переход их в завершённую IV СЗ, а спустя 24 ч инъецируют сразу большую дозу, принятую для данного вида, которая вызывает созревание и овуляцию ооцитов).
Работая с производителями, находящимися в угнетённом состоянии и не реагирующими на однократную инъекцию, применяют метод дробных инъекций — общую дозу препарата гипофиза не увеличивают, а разделяют её на две части сначала вводят меньшую часть (например, при работе с севрюгой 1/7 часть общей дозы), а через 5-8 ч — большую (6/7 частей общей дозы).
Для повышения эффективности работы с яровыми весенне-нерестующими производителями и удлинения периода, в течение которого от них можно получить икру, отловленных в начале нерестового хода при температурах ниже нерестовых производителей помещают в бассейны Б.Н. Казанского с проточной водой и регулируемой температурой и выдерживают при температуре 2-3°С до 3 месяцев. К концу времени, когда надо получать половые продукты, в бассейнах постепенно повышают температуру до нерестовой и инъецируютпроизводителей. Это позволяет обеспечить материалом второй цикл выращивания молоди осетровых.
При длительном выдерживании или транспортировке производителей при нерестовых температурах, а также при переохлаждении в бассейнах с терморегуляцией, подавляется их способность реагировать на гипофизарную инъекцию созреванием ооцитов. Это происходит вследствие изменения реактивности клеток фолликулярного эпителия к действию гонадотропных гормонов. Восстановить реактивность клеток фолликулярного эпителия и потом после гипофизарных инъекций получить пригодную дня рыбоводства икру можно, используя инъекцию самкам трийодтиронина. Для этого можно использовать аптечный препарат трийодтиронина (таблетки по 50 мг растирают в ступке, добавляют раствор Рингера с антибиотиками и инъецируют внутримышечно 600-800 мг в течение суток в три или четыре приёма по 200 мг в каждой инъекции) переохлаждённым самкам. Самок, выдерживаемых или длительно транспортируемых при нерестовых температурах, инъецируют по 200-300 мг в сутки в течение двух-четырех суток.
Если производители, после их доставки на завод, находятся в плохом состоянии — малоподвижны или переворачиваются вверх брюхом, — им делают однократные инъекции 300 мг трийодтиронина.
Ранние яровые формы осетровых используются при получении личинок для первого цикла (тура) или при задержке на IV СЗ гонад в терморегулируемых бассейнах для второго цикла. Поздние яровые формы выдерживают 1-3 месяца без реагирования температуры и получают от них личинок для второго цикла.
Дата добавления: 2019-02-22; просмотров: 1126; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!