Определение температурного диапазона и оптимальной температуры роста бактерий.
1) Накануне занятия в 2 мл ПДБ засевают исследуемые культуры бактерий родов Bacillus, Enterobacter, Pseudomonas, Rhodococcus, Serratia, Sarcina. Инкубируют их при 28-37 °С в течение 18 ч.
2) В шесть стерильных пробирок вносят по 2 мл ПДБ.
3) По 20 мкл бактериальной культуры, тщательно перемешанной на вортексе, вносят в пробирки с ПДБ. Исходная концентрация клеток в каждой из 6 пробирок должна быть одинаковой для объективной оценки скорости роста бактерий при различной температуре культивирования.
4) Засеянные пробирки помещают в термостаты с соответствующей температурой (4, 10, 18,28, 37, 42, 55 °С) и инкубируют в течение 24-48 ч.
5) Определяют оптическую плотность культуры при длине волны □ = 600 нм (ОП600). За положительный рост принимают значение оптической плотности ОП600 ≥ 0,2.
6) По результатам спектрофотометрических измерений строят график зависимости роста бактериальной культуры от температуры культивирования (рис. 3).
7) Делают вывод о температурном диапазоне и оптимальной температуре роста исследуемых культур бактерий.
Определение температурного диапазона роста бактерий.
1) Чашки с ПДА подписывают в соответствии с температурой инкубации (4, 10, 18, 28, 37, 42, 55 °С) и делят на сектора, на каждом из которых указывают название исследуемой культуры бактерий. Перед посевом чашки помещают в термостат с соответствующей температурой на 15-20 мин.
Бактериальные культуры с помощью бактериологической петли или шпилек засевают на соответствующий сектор чашки Петри
|
|
|
2) Чашки помещают в термостаты с соответствующей температурой, инкубируют в течение 7 суток.
3) Результаты учитывают ежедневно, сравнивая рост бактерий при разной температуре. Результаты вносят в таблицу (табл. 1).
Таблица 1
Рост исследуемых культур микроорганизмов при разной температуре
| Микроорганизм | Температура культивирования, °С | ||||||
| 4 | 10 | 18 | 28 | 37 | 42 | 55 | |
Примечание: «++++» - обильный рост, «+++» - хороший рост, «++» - умеренный рост. «+» - слабый рост, «-» - отсутствие роста.
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 235; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!