Микроскопические методы изучения морфологии бактерий.
Основные методы выявления микроорганизмов:
1. Микроскопические методы включают приготовление мазков и препаратов для микроскопирования.
2. Микробиологические (культуральные) методы – посев исследуемого материала на питательные среды с целью выделения и идентификации чистой культуры возбудителя.
3. Биологические методы (экспериментальные) направлены на определение наличия токсинов возбудителя в исследуемом материале и на обнаружение возбудителя, включают заражение лабораторных животных с последующим исследованием их.
4. Серологические методы - выявление специфических антител в сыворотке крови больного. С этой целью используют серологические реакции.
5. Аллергологические методы дают возможность установить диагноз с помощью внутрикожных аллергических проб, которые обнаруживают состояние повышенной чувствительности к возбудителю или продуктам его жизнедеятельности (аллергенов). Этим методом широко пользуются при диагностике туберкулеза (проба Манту), бруцеллеза (проба Бюрне), туляремии и многих других болезней.
Микроскопические методы изучения бактерий.
Для обнаружения и исследования микроорганизмов применяют различные микроскопы: обычные световые (светопольные), темнопольные, фазово-контрастные, ультрафиолетовые (люминесцентные), электронные и др.
При обычной световой микроскопии наблюдаемый объект рассматривают в проходящем свете и для лучшей видимости их окрашивают.
|
|
|
Методы окраски бактерий.
Различают простые (с использованием одного красителя (фуксин, метиленовый синий)) и сложные (последовательное нанесение на препарат определенные красители, спирты, кислоты и др.) методы окраски бактерий. Простой метод окрашивания дает возможность исследовать общую морфологию микробов, их размеры, форму, количество, локализацию, взаимное расположение клеток и т. п. Сложные методы (дифференциально-диагностические) позволяют обнаружить особенности химического состава клетки или наличие у нее определенных структур.
К сложным методам относятся:
· Метод Грама – выявление типа строения клеточной стенки. В зависимости от окраски бактерии делятся на грамположительные, окрашивающиеся в сине-фиолетовый цвет и грамотрицательные, окрашивающиеся в красный цвет. Эта особенность связана с тем, что бактерии с толстой клеточной стенкой хорошо удерживают краситель генциановый фиолетовый в комплексе с йодом и устойчивы к обесцвечиванию спиртом. После обработки фуксином они окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Грамотрицательные бактерии обесцвечиваются спиртом то есть теряют краситель и хорошо поглощают фуксин (окрашиваются в красный цвет).
|
|
|
· Метод Циля-Нильсена – выявление кислотоустойчивых бактерий (микобактерий). В результате окрашивания на общем синем (голубом) фоне кислотостойкие бактерии выглядят рубиново-красными.
· Окраска по Романовскому-Гимзе – выявление риккетсий, хламидий, спирохет и простейших. Цитоплазма простейших окрашивается в сине-фиолетовый цвет, а ядра - в красно-фиолетовый.
· Метод Нейссера - выявление зерен волютина у возбудителей дифтерии и др. коринебактерий. (цитоплазма клетки принимает желтый цвет, зерна волютина – темно-синие, почти черные).
· Метод Леффлера - выявление жгутиков (тела бактерий окрашиваются в темный красно-коричневый цвет, жгутики выглядят более светлыми, такого же оттенка) и волютиновых зерен у дифтерийных бактерий (волютиновые зерна окрашиваются в темно-синий, а цитоплазма в бледно-голубой цвет).
· Метод Ожешко - выявление спор (тела бактерий красятся в голубой цвет, споры в красный).
· Окраска по Бурри - Гинса - выявление капсул (на темном дымчато-сером фоне контрастно выделяются неокрашенные капсулы, внутри которых находятся ярко-красные тела бактерий).
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 1639; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!