Осаждение белков органическими веществами
ПРИНЦИП РАБОТЫ:
Органические кислоты вызывают необратимое осаждение белков, чаще используют растворы трихлоруксусной и сульфосалициловой кислот. Сульфосалициловая кислота кроме белков осаждает также продукты их распада - высокомолекулярные пептоны и полипептиды. Трихлоруксусная кислота способна осаждать только белки и не осаждает продукты распада белков.
В органических растворителях (спирт, ацетон и др.) белки не растворяются и выпадают в осадок. В зависимости от природы белка для его осаждения требуются различные концентрации спирта. Спирт связывает воду, вызывая дегидратацию мицелл белка и неустойчивость их в растворе. При осаждении спиртом раствор белка должен быть нейтральным или слабокислым, но не щелочным. Реакция облегчается присутствием электролита хлористого натрия вследствие снятия заряда с частиц белка. Реакция осаждения белка спиртом или кратковременным действием спирта обратима при охлаждении. Если осадок быстро отделить от спирта, то белок может сохранить нативное состояние.
РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:
1) сульфосалициловая кислота, 20 %; 2) трихлоруксусная кислота, 10 %; 3) этиловый спирт; 4) раствор яичного белка; 5) пробирки.
ХОД РАБОТЫ:
В 3 пробирки отбирают по 5 капель раствора яичного белка.
В 1-ую пробирку добавляют 2 капли раствора сульфосалициловой кислоты. Во 2-ую – 2 капли трихлоруксусной кислоты. В 3-ю приливают 15-20 капель этилового спирта (раствор мутнеет), затем добавить 1 каплю насыщенного раствора хлористого натрия.
|
|
|
РЕЗУЛЬТАТ и ВЫВОД:
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ:
Объясните факторы устойчивости коллоидного раствора белка.
От чего зависит заряд белка в водном растворе?
Что такое изоэлектрическая точка белка? Какой заряд будут иметь водные растворы белка с избыточным количеством свободных карбоксильных групп?
Какой заряд будут иметь водные растворы белка с избыточным количеством аминогрупп? В какой среде будет ИЭТ такого белка?
Чем обусловлены реакции осаждения белков? При каких температурных условиях возможно осаждение белков?
Что такое обратимое и необратимое осаждение белков?
Что такое денатурация белка? Дайте характеристику денатурирующим агентам?
Что происходит с белковой молекулой при высаливании?
Тема 3
Дата добавления: 2016-01-04; просмотров: 76; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!