Методы м/б диагностики холеры.



Микробиология. МПД№20

Лекция № 19

Тема: Возбудитель холеры.

Цель:

1. Знать систематику возбудителя.

2. Знать морфологические, культуральные и биохимические свойства.

3. Усвоить пути передачи, патогенез, клинику и профилактику холеры.

4. Понимать способы и методы м/б диагностики холеры.

Актуальность холеры определяется значительными социальными и экономическими потерями на ликвидацию ее вспышек. Эпидемическая обстановка в мире по холере продолжает оставаться напряженной, что обусловлено ежегодной регистрацией вспышек данного заболевания в развивающихся странах (преимущественно Африки и Азии) и высокой вероятностью завозов инфекции в страны Европы и Америки в условиях интенсивной международной миграции.

К семейству Vibrionaceae относятся несколько родов, из которых род Vibrio включает патогенные и условно-патогенные для человека виды. К патогенным относятся:

возбудитель холеры - V. cholerae и V. eltor, к условно-патогенным - Aeromonas hydrophilia и Plesiomonas.

Холерный вибрион V. cholerae был выделен Р. Кохом в 1882 г., а V. eltor - на карантинной станции Ель-Тор, также в Египте. Другие роды данного семейства содержат условно-патогенные виды (V. proteus, вибрион Мечникова, V. plesiomonas, светящийся вибрион), которые могут вызвать

гастроэнтериты.

Морфологические, культуральные и биохимические свойства.

Слегка изогнутая грамотрицательная полиморфная палочка. Монотрих. Спор и капсул не образует. Вибрионы относятся к хемоорганотрофам с окислительным и бродильным типами метаболизма. Ферментируют многие углеводы: глюкозу, мальтозу, сахарозу и другие с образованием кислоты. Разжижают желатин, образуют индол, восстанавливают нитраты в нитриты. Продуцируют такие ферменты как лецитиназа, лизиндекарбоксилаза,

орнитиндекарбоксилаза, нейраминидаза. Способность восстанавливать нитраты и образовывать индол лежит в основе положительной нитрозоиндоловой пробы – реакции холера-рот. Вибрионы хорошо растут на простых средах при щелочной реакции рН = 8,5-

9,0. На плотных средах образуют небольшие прозрачные круглые колонии, на жидких -пленку с легким помутнением среды. Вибрионы - факультативные анаэробы, образуют цитохромоксидазу.

Антигены

Холерные вибрионы имеют два антигена: О-антиген типоспецифический термолабильный и Н-антиген жгутиковый видоспецифический термостабильный. Возбудители холеры имеют 01-антиген. Вибрионы, относящиеся к серогруппам 02, 03, 04 могут вызвать энтериты и гастроэнтериты. 01-антиген состоит из трех компонентов - А, В, С, разные

сочетания которых образуют серовары Огава (АВ), Инаба (АС), Гикошима(АВС). Часто выделяются вибрионы, не агглютинирующиеся 01 антисывороткой. Их называют неагглютинирующимися НАГ-вибрионами.

Пути передачи, патогенез, клиника и профилактика холеры.

Холерный вибрион с помощью жгутика и фермента муциназы проникает в слизистую оболочку тонкой кишки и прикрепляется к энтероцитам. Адгезия происходит за счет филаментоподобного вещества, находящегося на клеточной стенке вибриона. Затем начинается колонизация слизистой кишки. При этом вибрионы не проникают в энтероциты, а находятся на их поверхности. Основным фактором патогенности вибриона

является секреция белковых токсинов. Это прежде всего холероген, который относится к функциональным блокаторам. Он, как и многие другие экзотоксины, состоит из двух субъединиц А и В. Последняя не ядовита. Она обеспечивает прикрепление специфического рецептора мембраны энтероцитов тонкой кишки - моносиалоганглиозида

- к клеткам кишечного эпителия, способствующего трансмембранному переносу А- субъединицы в цитоплазму. Субъединица А обеспечивает токсичность, вызываяактивацию аденилатциклазы. Это приводит к увеличению количества цАМФ(циклический монофосфат) и соответственно - к нарушению водно-солевого обмена, обусловленного выделением ионов натрия и хлора и обезвоживанию организма - характерного синдрома холеры. При этом организм теряет до 30 л жидкости в сутки.

Одновременно блокируется АТФ-аза, что приводит к нарушению внутриклеточного транспорта и потере воды, а также нарушению межклеточных контактов. Холерный вибрион, так же как и другие грамотрицательные бактерии, образует эндотоксин (ЛПС в составе клеточной стенки), который защищает возбудителя от фагоцитоза и обладает

другими функциями.

Иммунитет

При холере наблюдается гуморальный иммунный ответ, который характеризуется появлением антитоксических (к холерогену) и антибактериальных иммуноглобулинов.

При этом существенную роль играют секреторные иммуноглобулины (SIgA),

препятствующие адгезии вибриона.

Экология и эпидемиология

Единственным источником инфекции в природе является больной человек и

бактерионосители. При холере El-Тог отмечается длительное бактерионосительство и многочисленные атипические формы болезни, что способствует распространению возбудителя. Заражение человека происходит через воду или продукты. Возможно заражение контактным путем. Холера является древнейшей инфекцией, которая периодически распространялась на многие страны и континенты, унося миллионы жизней. До сих пор эндемическим очагом холеры считаются бассейны рек Ганга и Брахмапутры в Индии.

Холера

Холера - острая, карантинная, особливо опасная инфекционная болезнь с фекально - оральным механизмом передачи характеризуется обильным поносом, рвотой, сильной интоксикацией и обезвоживанием организма. Возбудителями заболевания являются два биовары холерного вибриона Vibrio cholerae и Vibrio eMgrJDбидва относятся к роду Vibrio семьи Vibrionaceаe. Кроме этих возбудителей, к роду Vibrio относятся также условно-патогенные вибрионы: V.metschnikovii, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus, V.vulnificus, V.fluvialis. При определенных условиях они могут вызвать у человека гастроэнтерит.

Методы м/б диагностики холеры.

Для микробиологического исследования стерильной ложкой берут испражнения, рвотные массы, промывные воды больного в объеме 10-20 мл, переносят их раздельно в стерильные стеклянные банки, закрывают стеклянными или резиновыми пробками и заливают парафином. Наилучшие результаты дает исследование проб, взятых до начала антимикробной терапии. Вторую порцию испражнений и рвотных масс в объеме 1-2 мл засевают у постели больного в 10-50 мл транспортной среды (1% пептонная вода рН 7,8 или рН 9,3). Если стула в момент забора материала нет, вырезают загрязненные фекалиями участки белья. Исследуют также желчь, взятую с помощью дуоденального зондирования. Во время эпидемической вспышки холеры широко практикуют ректальный забор. Для этого стерильный ватный тампон или алюминиевую петлю вводят в прямую кишку на глубину 5-19 см, забирают содержимое и вносят во флакон или пробирку с 1%

щелочной лептонной водой. От трупа берут небольшие участки тонкой кишки с верхнего и нижнего отдела, перевязывают с обоих концов лигатурами. Убирают также отрезок прямой кишки длиной 10-15 см. Желчный пузырь вырезают части паренхимы печени. При

бактериологическом обследовании людей, которые были в контакте с больными или вибрионосиямы, а также реконвалесцентов перед выпиской из стационара целесообразно заранее дать им слабительное, которое одновременно действовало бы и как желчегонное (напр. 25-30 г сульфата магния). Для исследования отбирают жидкую часть стула, поступивших из верхнего отдела тонкой кишки и имеют содержимое желчного пузыря.

По эпидемиологическим показаниям исследуют воду открытых водоемов, водопроводную воду, сточные воды, ил, гидробионтов (рыб, лягушек, устриц, моллюсков, рачков и т.д.), пищевые продукты. Смывы с объектов окружающей среды отбирают с площади 0,25 м2 ватными тампонами, смоченными 1% щелочной лептонной водой, и в ней транспортируют в лабораторию. На каждую банку, флакон, пробирку наклеивают направление, в котором указывают фамилию, инициалы, возраст больного, его домашний и служебный адрес, предварительный диагноз, дату и время взятия проб, подпись врача, направившего материалы. Отобранные пробы необходимо доставить в лабораторию в течение 3-х часов. Если это невозможно, материал сеют в 1% пептонную воду теллурита калия (1:100000) и на чашки со щелочным мясопептонного агаром. При большом расстоянии до лаборатории все пробы помещают в металлические пеналы, или банки,

обмостившы ватой или стружками. Затем их упаковывают в деревянный ящик, пломбируют, надписывают "верх, осторожно!" и с большими предосторожностями специальным транспортом с посланцем доставляют в лабораторию. Холера – особо опасное заболевание. Поэтому бактериологическое исследование нужно проводить в режимных лабораториях, в которых работает специально подготовленный персонал. Если вблизи такой лаборатории нет, исследуемый материал направляют в ближайшую обычной бактериологической лаборатории. Тогда прием других анализов прекращают, устанавливают строгий противоэпидемический режим, персоналу запрещают работать натощак. Лаборатория должна работать круглосуточно.


Дата добавления: 2022-06-11; просмотров: 21; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!