Осадочная проба Вельтмана в модификации Тайфля
Принцип
При добавлении к сыворотке крови раствора СаСl2 и нагревании до кипения снижается коллоидная устойчивость белков из-за уменьшения электрического заряда частиц под действием электролита, и белки выпадают в осадок, первыми осаждаются g‑глобулины (иммуноглобулины).
Реактивы
0,5 % CaCl2.
Проведение анализа
В пробирку добавляют 0,1 мл сыворотки, 4,9 мл дистиллированной воды и 0,1 мл раствора СаСl2, встряхивают, нагревают до однократного закипания и охлаждают. Если хлопья в пробирке не обнаруживаются, то добавляют еще 0,1 мл раствора хлорида кальция и вновь нагревают до кипения. Процедуру повторяют до выпадения хлопьевидного осадка. Учитывают объём раствора СaCl2, пошедший на образование хлопьевидного осадка сывороточных белков, и определяют состояние по коагуляционной ленте Вельтмана по схеме:
N пробы | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
CaCl2, мл | 1,0 | 0,9 | 0,8 | 0,7 | 0,6 | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,1 |
Сдвиг влево — обусловлен увеличением содержания a‑ и b‑глобулинов |
| Сдвиг вправо — при росте содержания g‑глобулинов | ||||||||
Клинико-диагностическое значение | Ревматизм, активный | Фиброзы дистрофия печени, гепатит, цирроз, гемолиз, плеврит, пневмония, туберкулез, остеомиелит |
Нормальные величины
Сыворотка крови | 0,4‑0,5 мл раствора CaCl2 |
Оформление работы
Указывают принцип метода, регистрируют результаты, сравнивают с нормальными величинами, делают выводы по обеим осадочным пробам.
|
|
Вопросы для самоконтроля
1) Клеточные, неклеточные (органические, неорганические) компоненты крови. Плазма и сыворотка крови.
2) Физико-химические свойства и функции белков плазмы крови. Общий белок и его фракции при электрофорезе, представители фракций. Гипо-, гипер-, пара-, диспротеинемии, причины и значение в клинике. Протеинограммы при заболеваниях (острое и хроническое воспаление, рак и др.)
3) Общая характеристика, происхождение и свойства ферментов плазмы крови. Органоспецифичные и собственно плазменные ферменты. Энзимодиагностика заболеваний. Ингибиторы протеиназ плазмы в лечении заболеваний
4) Понятие о формах поступления и выведения азота из организма. Образование, транспортные формы и утилизация аммиака в организме.
5) Остаточный азот и его фракции в сыворотке крови. Клиническое значение определения общего показателя остаточного азота и отдельных фракций (мочевина, мочевая кислота, креатин-креатинин и др.), клиренс креатинина.
ТЕМА 11.2.
Эритроцит. Обмен железа и гемопротеинов
Актуальность
Эритроцит необходим для поддержания жизненно важных функций организма, что определяет ряд особенностей его структуры и метаболизма (гликолиз, активность пентозофосфатного пути), механизмы защиты от избыточного воздействия кислорода. Главным белком эритроцита является гемоглобин. Широкое разнообразие биологически важных функций гемоглобина и других гемопротеинов (цитохромов, пероксидаз, миоглобина) вызывает необходимость изучения роли этих белков в метаболизме. Состояния, связанные с нарушением синтеза и распада гема, приводят к развитию заболеваний крови и печени.
|
|
Цель
1. Изучение особенностей обмена эритроцита, реакций синтеза и распада гема, метаболизма билирубина.
2. Освоение методов определения концентрации основных показателей пигментного обмена — гемоглобина в крови, билирубина в сыворотке крови и моче, желчных пигментов в моче.
Вопросы для самоподготовки
1) Обмен железа в организме: потребность, всасывание, транспорт, железо-связывающие белки, запасная форма. Пищевые источники. Симптомы и клинические проявления недостаточности железа. Понятие гемохроматоза.
2) Функции эритроцитарных белков — спектрина, гликофорина, белка полосы 3. Особенности окисления глюкозы в эритроците. Механизмы защиты мембраны эритроцита от окисления.
|
|
3) Строение гема, реакции и основные этапы его синтеза. Регуляция синтеза гема и гемоглобина.
4) Причины порфирий, их клинические проявления, основы лечения порфирий. Талассемии, их виды и причины.
5) Строение наиболее распространённых в организме гемсодержащих белков (гемоглобин, миоглобин, цитохромы, каталаза, пероксидаза), их функции и локализация.
6) Патологические и физиологические типы гемоглобина (оксигенированный, гликозилированный, серповидно-клеточный гемоглобин; карбо-, карбокси- и метгемоглобин). Значение определения концентрации окси- и карбогемоглобина, гликозилированного гемоглобина.
7) Реакции, происходящие в эритроците в капиллярах легких и тканей (схемы).
8) Механизмы транспорта углекислого газа. Транспортные формы углекислого газа, связь СО2 с гемоглобином, роль карбоангидразы. Роль эритроцита в изменении концентрации бикарбонат-ионов плазмы.
9) Механизм транспорта кислорода. Связывание гемоглобина с кислородом, нормальная степень насыщения гемоглобина кислородом, влияние температуры, величины рН, концентрации СО2 на сродство гемоглобина к О2, регуляция. Кооперативность протомеров гемоглобина, эффект Бора, роль 2,3‑дифосфоглицерата.
|
|
10) Кривые насыщения гемоглобина кислородом или диссоциации гемоглобина. Причины S-образного характера кривой диссоциации.
11) Распад гемоглобина и гема в ретикулоэндотелиальной системе.
12) Непрямой (свободный) билирубин, его строение, реакции образования. Дальнейшая судьба непрямого билирубина.
13) Прямой (связанный) билирубин, его строение, реакции образования, дальнейшая судьба. Роль фермента УДФ-глюкуронилтрансферазы. Выведение конечных продуктов распада гема.
14) Состояния, связанные с избыточным распадом гемоглобина. Причины гемолитической желтухи, её виды и лабораторные критерии.
15) Состояния, связанные с нарушениями оттока желчи. Причины обтурационной желтухи и её лабораторные критерии.
16) Состояния, связанные с недостаточностью функции гепатоцитов. Причины паренхиматозной желтухи и её лабораторные критерии.
17) Виды физиологической и патологической желтухи новорожденных.
18) Нарушения выведения билирубина – наследственные (синдромы Жильбера‑Мейленграхта, Криглера‑Найара, Дубина‑Джонсона) и приобретенные (избыток эстрогенов молока, инфекционные и токсические причины). Представление о механической желтухе при муковисцидозе, болезни Нимана‑Пика, гипоплазии желчных путей.
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 309; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!