Исследование перианальных соскобов
Необходимые реактивы и оборудование
Кроме микроскопа, необходимое оборудование зависит от способа получения соскоба: деревянный шпатель, шпатель с ватным тампоном, предметные и покровные стекла, полоски прозрачной липкой ленты, глазные палочки со специальным клеевым слоем и др.
Подготовка к работе
При массовых обследованиях населения (в основном детского) заранее подготовить шпатели с тампонами и пробирки, или предметные стекла с липкой лентой, флаконы, или специальные штативы с глазными палочками, покрытыми клеевым слоем. Промаркировать предметные стекла, пробирки или флаконы, либо маркировать во время забора материала у обследуемых, согласно номеру по списку.
Ход исследования: зависит от способа отбора материала.
Метод перианального соскоба липкой лентой по Грэхэм
Примечание. Пригодна полиэтиленовая прозрачная пленка с липким слоем для детского технического творчества, но лучше использовать операционную пленку ЛПО-1, ЛПО-2.
· Подготовить отрезок липкой ленты длиной 8 - 10 см, предварительно наклеить его на предметное стекло.
· Перед взятием соскоба отклеить полоску липкой ленты от предметного стекла, держа полоску за концы, плотно прижать всей липкой поверхностью к анусу и перианальным складкам, стараясь пальцами рук не касаться перианальной области.
· Отклеить полоску от кожи перианальной области и перенести на предметное стекло липким слоем вниз, приклеить к стеклу равномерно для избежания образования воздушных пузырей, мешающих микроскопии.
|
|
· Концы ленты, выходящие за края стекла, отрезать.
· Микроскопировать при увеличении: объектив ´8 или ´10, окуляр ´7 или ´10.
Примечание. Метод применяется как для индивидуального, так и для массового обследования.
2) Метод перианального соскоба по Торгушину
· Ватный тампон, накрученный на деревянном или стеклянном шпателе, смочить в растворе глицерина.
· Обтереть тампоном перианальные складки вокруг ануса.
· На предметное стекло поместить каплю глицерина.
· Слегка ударяя по предметному стеклу, обмыть тампон в капле глицерина.
· Полученный препарат микроскопировать без покровного стекла; увеличение: объектив ´8 или ´10, окуляр ´7 или ´10.
Примечание. Недостаток метода: часть яиц остается на ватном тампоне; неудобен при массовых обследованиях.
Копропротозооскопия (исследование фекалий на кишечные простейшие)
1) Метод нативного мазка с физраствором и раствором Люголя
ü Для дифференциальной диагностики трофозоитов дизентерийной амебы с непатогенными амебами необходимо приготовить препарат с буферным раствором метиленового синего: нанести на предметное стекло большую каплю буферного раствора метиленового синего, в нее внести деревянной палочкой небольшое количество слизи, фекалий с прожилками крови, накрыть покровным стеклом, дать постоять 5 - 10 мин, чтобы краска проникла в трофозоиты, и сразу микроскопировать для исключения перекрашивания трофозоитов.
|
|
Результат окрашивания: трофозоиты амеб окрашиваются в разные оттенки синего: ядро синее, цитоплазма голубая, эритроциты синие. Цисты амеб, трофозоиты, цисты жгутиковых и ооцисты кокцидий не окрашиваются.
Для выявления ооцист кокцидий: при выполнении вышеописанной методики приготовления нативного мазка с физраствором и 1% раствором Люголя, в одну из капель вместо 1% раствора Люголя вносится капля уксуснокислого спиртового раствора йода. Палочкой внести небольшое количество фекалий, растереть, накрыть покровным стеклом; микроскопировать при тех же увеличениях. Ооцисты изоспоры выявляются, благодаря хорошей окраске ядер.
Эффективность методы
§ Позволяет выявлять вегетативные формы патогенных простейших и комменсалов, анализировать тип их движения, что важно при видовой идентификации простейших, особенно, жгутиковых.
|
|
§ Диагностика амебиаза эффективна только при строгом соблюдении стерильного забора фекалий и микроскопического исследования не позднее 15 - 20 мин после дефекации.
§ Позволяет определять видовые признаки цист амеб и жгутиковых, ооцист кокцидий, благодаря эффективной окраске йодом ядер, жгутикового аппарата, гликогена.
Применение метода
* Применяется для диагностики кишечных протозоозов: лямблиоза, балантидиаза, амебиаза, кокцидиоза (изоспороза).
* Для исследования на кишечные простейшие, в т. ч. на лямблии используются также методы: формалин-эфирного (уксусно-эфирного) осаждения и исследование дуоденального содержимого (см. описание методик в пп. 2. 1. 3; 2. 1. 4).
Примечание. В нативных препаратах с физиологическим раствором при интенсивной инвазии также можно обнаружить яйца гельминтов и личинки стронгилоидеса.
2) Метод Бермана в модификации для исследования на балантидиаз
Эффективность метода
§ Позволяет выявлять трофозоиты балантидий при низкой интенсивности инвазии.
Применение метода
* Для диагностики балантидиаза.
II. Микроскопическое исследование дуоденального содержимого,
Дата добавления: 2018-04-05; просмотров: 863; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!