Определения кислотных компонентов желудочного сока.
Принцип метода:_______________________________________________________________________________________________________
Материал | Количество мл NaOH (0,1 М р-р), пошедшего на титрование 5 мл жел. сока | Единицы кислотности (моль/л) на 100 мл желудочного сока | |||||
До 1 пункта оранжевее окрашивание | До 2 пункта лимонно-желтое окрашивание | До 3 пункта розовое окрашивание | Свободная HCl 30-40 ед. | Общая HCl | Связанная HCl норма 5-20 ЕД | Общая кислотность норма 40-60 ЕД | |
Жел. сок 5 мл + 1-2 кап. парадиметил-аминоазобензола + 2 кап. фенолфталеина | Х1=___ | Y1=______ | Z1=____ | А1=Х1*100 5 | С1=В1-А1 | ||
Жел. сок № 2 5 мл + 1-2 кап. парадиметиламино-азобензола + 2 кап. фенолфталеина | Х2=____ | Y2=_____ | Z2=____ | А2=Х2*100 5 | С2=В2-А2 |
Вывод:___________________________________________________________________________________________________________________
Работа 3. Количественное определение пепсина в желудочном соке по Пятницкому
Таблица 3
Принцип метода: ___________________________________________________________
Исследуемый материал | Реактивы | Время створаживания [cек.] | Расчет количества ед. пепсина в 1 мл жел. сока |
Жел. сок 0,1 мл При 25° С | Молочно-ацетатная смесь 5 мл при 25°С | ________ | х=60 с; ___ с. =4 ед. в 0,1 мл ж. сока а в 1 мл ж. сока 4*10=40 ед. или 40*0,01=0,4 мг кристаллического пепсина |
Вывод:______________________________________________________________
Подпись преподавателя __________________
|
|
«___»_________20____ г.
Занятие 13. Тема: Биологическое окисление. Количественное определение каталазной активности крови. Обнаружение дегидрогеназ лимоннокислого цикла.
Цель: изучить роль и процессы биологического окисления в организме, значение, функции и реакции ЛКЦ. Научиться количественно определять активность каталазы по Баху и Зубковой и обнаруживать активность дегидрогеназ лимонно-кислого цикла в мышечной ткани.
Вопросы для обсуждения.
1. Определение биологического окисления; аэробное и анаэробное окисление.
2. Понятие редокс-потенциала и его значение в биологической окислительно-восстановительной системе.
3. Характеристика стадий биологического окисления; центральные пути метаболизма.
4. Характеристика пируватдегидрогеназной системы.
5. Характеристика цикла лимонной кислоты.
6. Энергетическая характеристика стадий биологического окисления.
Выполняемая работа.
Работа № 1. Количественное определение каталазы крови по Баху и Зубковой.
Работа 2. Обнаружение дегидрогеназ лимоннокислого цикла в мышцах.
Принцип метода:
Дегидрогеназы лимоннокислого цикла, например, изолимонной и янтарной кислот, можно обнаружить в тканях, беря в качестве субстрата соответствующие кислоты, а в роли акцептора водорода – электронов и протонов – метиленовую синь.
|
|
Критерием присутствия дегидрогеназ является обесцвечивание метиленовой сини т.к. этот органический краситель при восстановлении переходит в лейкосоединение. При исследовании каталитического действия изоцитратдегидрогеназы в качестве субстрата можно использовать лимонную кислоту, которая изомеризуется в изолимонную под влиянием фермента аконитазы, содержащегося в кашице наряду с другими ферментами цикла трикарбоновых кислот.
Ход работы:
1. В три пронумерованные пробирки вносят шпателем примерно равные количества мышечной кашицы.
2. В первую пробирку добавляют 10 кап. раствора цитрата натрия, во вторую – 10 кап. сукцината натрия, в третью – контрольную – 10 кап. 20% р-ра сульфосалициловой кислоты. Если между кусочками мышц остались пузырьки воздуха, их удаляют стеклянной палочкой.
В каждую из трех пробирок добавляют по 10 кап. вазелинового масла. Вазелиновое масло покрывает поверхность раствора, благодаря чему создаются анаэробные условия и тем самым предотвращается окисление восстановленных соединений кислородом воздуха.
4. Пробирки помещают в термостат или водяную баню при температуре 37 °С. Отмечают постепенное обесцвечивание метиленовой сини в пробирках с раствором цитрата и сукцината натрия. В контрольной пробирке метиленовая синь не обесцвечивается, т.к. фермент был инактивирован добавлением сульфосалициловой кислоты.
|
|
Таблица 1
Дата добавления: 2018-02-15; просмотров: 1250; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!