Определения кислотных компонентов желудочного сока.



Принцип метода:_______________________________________________________________________________________________________

 


Материал

Количество мл NaOH (0,1 М р-р), пошедшего на титрование 5 мл жел. сока

Единицы кислотности (моль/л) на 100 мл желудочного сока

До 1 пункта оранжевее окрашивание До 2 пункта лимонно-желтое окрашивание До 3 пункта розовое окрашивание Свободная HCl 30-40 ед. Общая HCl Связанная HCl норма 5-20 ЕД Общая кислотность норма 40-60 ЕД
Жел. сок 5 мл + 1-2 кап. парадиметил-аминоазобензола + 2 кап. фенолфталеина Х1=___ Y1=______ Z1=____ А1=Х1*100 5     С111      
Жел. сок № 2 5 мл + 1-2 кап. парадиметиламино-азобензола + 2 кап. фенолфталеина Х2=____ Y2=_____ Z2=____ А2=Х2*100 5     С222      

 

Вывод:___________________________________________________________________________________________________________________

 


Работа 3. Количественное определение пепсина в желудочном соке по Пятницкому

Таблица 3

Принцип метода: ___________________________________________________________

 

Исследуемый материал Реактивы Время створаживания [cек.] Расчет количества ед. пепсина в 1 мл жел. сока
Жел. сок 0,1 мл При 25° С Молочно-ацетатная смесь 5 мл при 25°С ________ х=60 с; ___ с. =4 ед. в 0,1 мл ж. сока а в 1 мл ж. сока 4*10=40 ед. или 40*0,01=0,4 мг кристаллического пепсина  

 

Вывод:______________________________________________________________

 

Подпись преподавателя                                               __________________

 

 «___»_________20____ г.

Занятие 13. Тема: Биологическое окисление. Количественное определение каталазной активности крови. Обнаружение дегидрогеназ лимоннокислого цикла.

Цель: изучить роль и процессы биологического окисления в организме, значение, функции и реакции ЛКЦ. Научиться количественно определять активность каталазы по Баху и Зубковой и обнаруживать активность дегидрогеназ лимонно-кислого цикла в мышечной ткани.

Вопросы для обсуждения.

1. Определение биологического окисления; аэробное и анаэробное окисление.

2. Понятие редокс-потенциала и его значение в биологической окислительно-восстановительной системе.

3. Характеристика стадий биологического окисления; центральные пути метаболизма.

4. Характеристика пируватдегидрогеназной системы.

5. Характеристика цикла лимонной кислоты.

6. Энергетическая характеристика стадий биологического окисления.

Выполняемая работа.

Работа № 1. Количественное определение каталазы крови по Баху и Зубковой.

Работа 2. Обнаружение дегидрогеназ лимоннокислого цикла в мышцах.

Принцип метода:

Дегидрогеназы лимоннокислого цикла, например, изолимонной и янтарной кислот, можно обнаружить в тканях, беря в качестве субстрата соответствующие кислоты, а в роли акцептора водорода – электронов и протонов – метиленовую синь.

Критерием присутствия дегидрогеназ является обесцвечивание метиленовой сини т.к. этот органический краситель при восстановлении переходит в лейкосоединение. При исследовании каталитического действия изоцитратдегидрогеназы в качестве субстрата можно использовать лимонную кислоту, которая изомеризуется в изолимонную под влиянием фермента аконитазы, содержащегося в кашице наряду с другими ферментами цикла трикарбоновых кислот.

Ход работы:

1. В три пронумерованные пробирки вносят шпателем примерно равные количества мышечной кашицы.

2. В первую пробирку добавляют 10 кап. раствора цитрата натрия, во вторую – 10 кап. сукцината натрия, в третью – контрольную – 10 кап. 20% р-ра сульфосалициловой кислоты. Если между кусочками мышц остались пузырьки воздуха, их удаляют стеклянной палочкой.

В каждую из трех пробирок добавляют по 10 кап. вазелинового масла. Вазелиновое масло покрывает поверхность раствора, благодаря чему создаются анаэробные условия и тем самым предотвращается окисление восстановленных соединений кислородом воздуха.

4. Пробирки помещают в термостат или водяную баню при температуре 37 °С. Отмечают постепенное обесцвечивание метиленовой сини в пробирках с раствором цитрата и сукцината натрия. В контрольной пробирке метиленовая синь не обесцвечивается, т.к. фермент был инактивирован добавлением сульфосалициловой кислоты.

 


Таблица 1


Дата добавления: 2018-02-15; просмотров: 1250; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!