Занятие №5 Тема: Нуклеопротеины и нуклеиновые кислоты. Гидролиз нуклеопротеинов. Липопротеины. Получение липосом.



Цель:изучитьклассификацию сложных белков, строение и свойства липопротеинов и нуклепротеинов, особенности получения и свойства липосом. Научиться проводить реакцию с ацетоном, подтверждающую наличие фосфатидилхолина; получить из фосфатидилхолина липосомы и идентифицировать их под микроскопом; провести гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и поставить качественные реакции на компоненты нуклеопротеинов (белок, пуриновые основания, пентозу и фосфорную кислоту).

Вопросы для обсуждения

1. Приведите классификацию сложных белков.

2. Охарактеризуйте строение и функции липопротеинов.

3. Охарактеризуйте строение и функции плазменных липопротеинов.

4. Охарактеризуйте строение и функции биомембран.

5. Укажите основные классы мембранных липидов, охарактеризуйте их особенности.

6. Опишите мембранные белки, укажите их основные группы и функции.

7. Опишите жидкостно-мозаичную модель мембран.

8. Опишите функции мембран.

9. Что такое липосомы? Как они создаются и используются в фармации и медицине?

10. Пуриновые и пиримидиновые азотистые основания, их структурные формулы.

11. Строение и функции ДНК, структурная формула отрезка ДНК.

12. Строение и функции РНК, структурная формула отрезка РНК.

13. Особенности строения свободных нуклеотидов; структурная формула АТФ, ГТФ, ЦТФ, УТФ.

14. Уровни структурной организации ДНК, их характеристика.

15. Особенности строения двойной спирали ДНК.

16. Видовая специфичность ДНК

Выполняемая работа.

Работа №1. Выделение фосфатидилхолина из яичного желтка.

Реактивы:

спирт 96%; ацетон.

Оборудование:

пробирки, водяная баня, термометр, бумажные фильтры.

Материал: яичный желток.

Ход определения.

1. Поместить в пробирку 0,5-1,0 г (1/6 часть) яичного желтка, добавить 5,0 мл кипящего спирта (для этого спирт предварительно помещают в водяную баню с температурой 75-78о С), перемешивать содержимое пробирки 8-10 минут.

2. По окончании извлечения жидкость фильтруют через бумажный фильтр. С фильтратом проделывают реакцию на фосфатидилхолин с ацетоном, для чего к 10 каплям ацетона прибавляют по каплям фильтрат. Постепенно жидкость мутнеет вследствие осаждения нерастворимого в ацетоне фосфатидилхолина.

Работа №2. Получение липосом.

Реактивы:

фосфатный буфер рН 6,8.

Оборудование:

пробирки, микроскоп, предметные стекла.

Материал:

спиртовой раствор фосфатидилхолина.

Метод основан на способности фосфолипидов образовывать на поверхности раздела двух фаз (вода-липиды) очень тонкий бимолекулярный слой, приобретающий сферическую форму.

Ход работы:

К 3-4 мл полученного ранее спиртового раствора фосфатидилхолина добавляют равный объем фосфатного буфера с рН 6,8 и интенсивно диспергируют (встряхивают) в течение не менее 10 минут.

Каплю полученной жидкости – взвеси липосом – наносят на предметное стекло и микроскопируют при малом увеличении (объектив №8).

Наблюдают липосомы в виде везикул.

 

Таблица 1

Принцип метода: ______________________________________________

 

Название сложного белка Название определяемого компонента Используемые реактивы, материалы и приемы Наблюдаемые изменения Принцип реакции

Липопротеины

Выделение фосфатидилхолина 0,5 г. яичного желтка + 5,0 мл кипящего этилового спирта, перемешивание 10 мин, фильтрация, 5 кап. фильтрата + 10 кап. ацетона    
Получение липосом 3 мл фильтрата раствора фосфатидилхолина + 3 мл фосфатного буфера рН=6,8, интенсивное встряхивание 10 мин, микроскопия капли жидкости (объектив № 8)    

Вывод:________________________________________________________

Работа № 3.  Гидролиз нуклеопротеинов дрожжей с идентификацией их компонентов.

Таблица 2

Название определяемых компонентов Проводимые реакции Употребляемые реактивы Наблюдаемое окрашивание или осадок Продукты реакции
полипептиды биуретовая проба 5 капель гидролизата + 10 капель 10% раствора NaOH + 1 капля 1% раствора сульфата меди ? ?
пуриновые основания серебряная проба 10 капель гидролизата + 1 капля конц. аммиака + 5 капель 1% раствора серебра азотнокислого ? ?
пентозы реакция Молиша 10 капель гидролизата + 3 капли 1% раствора альфа-нафтола + 20 кап. конц. серной кислоты ? ?
фосфорная кислота молибденовая проба 5 капель гидролизата + 20 капель молибденового реактива, кипячение ? ?

Вывод:________________________________________________________

 

Подпись преподавателя                            __________________

 

«___»_________20____ г.

Занятие № 6. Итоговое занятие по теме «Введение в биохимию. Структура и биологические функции белков. Аминокислоты, простые и сложные белки. Нуклеиновые кислоты. Биомембраны. Иммуноглобулины». Контроль практических умений и навыков.

Цель:закрепить теоретические знания по разделуи провести контроль усвоения навыков и умений.

Работа на занятии

1. Опрос по теоретическим вопросам темы итогового занятия.

 

Вопросы к итоговому занятию.

1. Какие химические элементы входят в состав живого организма? На какие группы они подразделяются?

2. Какие химические элементы составляют 99% массы большинства клеток?

Какие свойства элементов объясняют их роль в живом организме?

3. Какие основные органические и неорганические соединения входят в состав живых организмов? Какое значение воды в живом организме?

4. В каком виде находятся в биологических жидкостях основные органические соединения?

5. Каковы особенности строения макромолекул и какова их функциональная

специализация в живом организме?

6. Что такое белки? Каков их элементарный состав и функции в организме?

7. Что такое аминокислоты? Каковы их физико-химические свойства?

8. Какова классификация аминокислот, основанная на полярности радикалов:

    а) назовите и напишите формулы аминокислот первого класса;

    б) назовите и напишите формулы аминокислот второго класса;

    в) назовите и напишите формулы аминокислот третьего и четвертого   класса.

9. Как образуется пептидная связь в белковых молекулах, охарактеризуйте пептидную связь с электронной точки зрения. Напишите схему полипептидной цепи.

10. Перечислите химические связи, которые могут возникать между радикалами аминокислот внутри одной полипептидной цепи, а так же между полипептидными цепями в белках.

11. Уровни организации белковых молекул:

    а) охарактеризуйте первичную и вторичную структуру белков;

    б) охарактеризуйте третичную и четвертичную структуру белков;

    в) охарактеризуйте надвторичные структуры и структурные домены;

    г) фолдинг, белки шапероны.

12. Физико-химические свойства белков:

а) каков характер водных растворов белков? Явление Тиндаля. Назовите факторы, уменьшающие стабилизацию белков в растворе;

б) обратимое и необратимое осаждение, денатурация и ренатурация белков;

в) белки как амфотерные электролиты, изоэлектрическая точка белков, электрофорез белков.

13. Классификация простых белков: назовите классы протеинов, охарактеризуйте протамины и гистоны; охарактеризуйте альбумины и глобулины; охарактеризуйте проламины, глютеины и протеиноиды.

14. Что такое сложные белки (протеиды, смешанные макромолекулы)?

Приведите классификацию сложных белков, назовите небелковые компоненты каждого класса.

15. Охарактеризуйте хромопротеины:

а) назовите простетические группы хромопротеинов, производные

изоаллоксазина, бетакаротина, порфина, напишите их формулы;

б) назовите представителей хромопротеинов, охарактеризуйте строение гемоглобина;

в) каковы биологические функции хромопротеинов?

16. Охарактеризуйте структуру и биологические функции липопротеинов

(липид-белковых комплексов).

17. Транспортные липопротеины плазмы крови, их строение и функции.

18. Биологические мембраны: основные классы мембранных липидов, их свойства, участие в формировании бимолекулярного слоя.

19. Роль холестерина в формировании жидко-кристаллической структуры липидного бислоя биомембран.

20. Жидко-кристаллическая структура липидного бислоя биомембран. Текучесть мембран.

21. Проницаемость биомембран. Способы переноса веществ через мембраны.

22. Состав белков биомембран и их характеристика.

23. Жидкостно-мозаичная модель биомембран Сингера-Николсона.

24. Характеристика функций биомембран.

25. Мембраноподобные структуры (липосомы), их создание и использование в фармации.

26. Охарактеризуйте структуру и биологические функции фосфопротеинов и металлопротеинов.

27. Охарактеризуйте структуру и биологические функции гликопротеинов (углеводбелковых комплексов) – протеогликанов и собственно гликопротеинов, охарактеризуйте строение и функции иммуноглобулинов.

28. Охарактеризуйте структуру и биологические функции нуклеопротеинов.

29. Что такое нуклеиновые кислоты, ДНК, РНК? Какова их локализация в клетке и биологическая роль? Виды РНК.

30. Перечислите и напишите формулы азотистых оснований и пентоз, входящих в структуру нуклеиновых кислот. Что такое нуклеозиды? Что такое нуклеотиды?

31. Напишите формулы и названия мононуклеотидов РНК (рибонуклеотиды).

32. Напишите формулы и названия мононуклеотидов ДНК (дезоксирибонуклеотиды).

33. Что такое первичная структура нуклеиновых кислот? Что такое вторичная

структура нуклеиновых кислот? Какими химическими связями они стабилизируются? Что такое третичная структура нуклеиновых кислот?

34. Опишите строение ДНК:

а) сколько полинуклеотидных цепей составляют одну молекулу, как связаны между собой?

б) охарактеризуйте понятия «комплементарные антипараллельные полинуклеотидные цепи»;

в) изложите правила Чаргаффа – закономерности химического состава ДНК.

35. Перечислите виды РНК и опишите биологическую роль каждого вида.

36. Назовите нуклеотиды, не входящие в структуру нуклеиновых кислот и принимающие участие в обмене веществ (нуклеозид – 5` - моно-, ди-, трифосфаты). Каковы их важнейшие функции? Циклические ГМФ и АМФ, их структура и функции.

Выполняемая работа.

В полученных контрольных пробах провести идентификацию их содержимого: аминокислоты, простые и сложные белки.

 Для этого с каждой пробой провести следующие качественные реакции:

     а) биуретовую реакцию;

     б) нингидриновую реакцию;

    в) ксантопротеиновую реакцию;

    г) бензидиновую пробу;

    д) реакцию с α – нафтолом.

 

Работа №1 Идентификация содержимого полученной пробы

Таблица 1

Название реакции Исследуемый материал Наблюдаемое окрашивание Принцип реакции

Биуретовая реакция

№А  
№Б  
№В  

Нингидриновая реакция

№А  
№Б  
№В  

Ксантопротеиновая реакция

№А  
№Б  
№В  

Бензидиновая проба (определение гемина)

№А  
№Б  
№В  

Определение гексозы

№А  
№Б  
№В  

Вывод: ________________________________________________________

 

Подпись преподавателя                            __________________

 

«___»_________20____ г.


Дата добавления: 2018-02-15; просмотров: 1739; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!