Работа №3. Количественное определение остаточного азота в крови фотоэлектроколориметрическим методом



Таблица № 3

Принцип метода: _________________________________

Исходный материал фильтрат, мл Конц Н2SO4 Водяная баня Дист. вода, мл 0,4 М р-р NaОН, мл Р-тив Несслера, мл ФЭК против контроля, красный или зелен.  с/ф , кювета 2 см. Расчет по калибровочной кривой (Е = m) х =m*2 * 5000  = 1 * 1000 = m*10 =
№1 контроль - - - 10,0 - 0,5  

 

 

=                  г/мл

№2 опыт 1мл дист. воды + 0,4 мл сывор. кр. + 2,6 мл ТХУ, перемеш, ч. 10 мин. фильт- ть 1,0 1 кап. 1-2 мин до закипания 8,0 0,5 0,5 Е =

Норма – 0,2-0,4 г/л

Вывод:____________________________________________________________

Подпись преподавателя                          ______________________

 «____» ________________20____г.

Занятие №5 Тема: Обмен аминокислот и белков. Количественное определение мочевины в сыворотке крови.

Цель: знать  пути обезвреживания аммиака в организме, синтез аминокислот и использование аминокислот как лекарственных веществ. Уметь готовить препарат уреазы и определять количественное содержание мочевины в сыворотке крови.

 

Вопросы для обсуждения.

1.Обезвреживание аммиака.

2.Орнитиновый цикл.

3. Биосинтез аминокислот, первичный синтез аминокислот.

4. Аминокислоты как лечебные средства

 

Выполняемая работа

Препарат уреазу получают следующим образом: очищают 3-4 семечки арбуза, извлеченные зерна растирают в ступке, сначала в 1 мл воды, а затем добавляют воду до 10 мл. Полученную эмульсию фильтруют.


Работа №1. Определение мочевины крови уреазным методом с реактивом Несслера

Таблица № 1

Принцип метода:__________________________________________________

 

Расчет

Х=Еоп*5

Ест.

= ммоль/л

Вывод: _________________________________________________________________________________________________

                                       

                                                        Норма – 2,50- 8,33 ммоль/л.

Подпись преподавателя                             _____________________

 

ФЭК, светофильтр синий, кювета 0,5см против 3,5 мл воды +0,5мл р-ва Несслера Еоп= Ест=
Р-тив Нес-слера 0,5 мл перемешать 0,5 мл перемешать
Р-р сегне-товой соль 0,2г/ 100мл 2,25мл 2,25мл
Филь-трат 1,25 фильтрат №1 1,25 фильтрат №2
Р-р  NaОН 1,5г/100мл 0,4 мл перемешать, фильтровать через 5 мин. 0,4 мл перемешать, фильтровать через 5 мин.
Р-р ZnSO4 7,5г/100мл 0,4 мл 0,4 мл
Термостат 37°С 20мин 20мин
Препарат уреазы 1 мл переме-шать закр. проб. 1 мл переме-шать закр. проб.
Станд. р-р мочевины 5ммоль/л - 0,2мл
Сыво-ротка крови 0,2мл -
Дист. вода 3 мл 3 мл
№ пробы №1 опыт №2 стандарт

 «____» ________________20____г.

Занятие №6 Тема: Обмен сложных белков. Определение билирубина и его фракций в сыворотке крови. Обнаружение кровяных и желчных пигментов в моче.

Цель: знать особенности обмена сложных белков, распад и синтез гемоглобина, образование желчных пигментов и их диагностическое значение. Уметь определять количественно содержание билирубина и его фракций в сыворотке крови по Йендрашику, Клеггорну и Грофу, проводить качественную реакцию на кровяные и желчные пигменты в моче.

Вопросы для обсуждения.

1. Особенности обмена хромопротеинов.

2. Распад гемоглобина в пищеварительном тракте и в тканях.

3. Синтез гема, уравнения образования δ-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена.

4. Нарушение образования желчных пигментов, желтухи.

5. Характеристика свободного билирубина.

6. Характеристика связанного билирубина.

7.  Определение  фракций билирубина в диагностике нарушений печени.

 

Выполняемая работа


Работа №1. Определение билирубина и его фракций в сыворотке крови спиртовым методом

Таблица № 1

Принцип метода:__________________________________________________

 

Расчет

ОБЩИЙ БИЛИРУБИН

Вычисляют Е1-0  - Ек и по калибровочному графику находят содержание общего билирубина в

 мкмоль/л

СВЯЗАННЫЙ (ПРЯМОЙ) БИЛИРУБИН

Вычисляют Е1-С  - Ек и по калибровочному графику находят содержание связанного билирубина

в мкмоль/л

Свободный (непрямой) билирубин определяют: С общий – С примой = ? мкмоль/л

 

Вывод: ______________________________________________________________________________________

 

Норма: общий билирубин – 8,6-20,5 мкмоль/л; прямой билирубин – до 4,3 мкмоль/л.

 

ФЭК, синий светофильтр, против воды, кювета на 1 см Е1-0 = Ек = Е 1-С = Ек =
Физ. р-р - - 3,0мл взбол-тать -
Дист. вода 1,0мл 1,0мл - 1,0мл
Развед. этанол 1,5мл, взболтать, оставить на 25 мин для экстракции в термостате 1,5мл, взболтать, оставить на 25 мин для экстракции в термостате Не добавлять! Оставить на 25 мин. в термостате. 1,5мл, взболтать, оставить на 25 мин для экстракции в термостате
Диазореактив 1,0мл смеси р-вов №1 и №2 1,0 мл р-ра №1 0,5 мл смеси р-ов №1 и №2 1,0мл р-ра №1
Сыворотка крови 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл
Проба опыт контроль опыт контроль

Работа №2. Обнаружение пигментов в моче

Таблица № 2

 

Окрашивание        

Вывод: ___________________________________________________

 

Подпись преподавателя                                    ____________________________

 

1% р-р йода спиртовый     10 кап наслоить 10 кап наслоить
Пероксид водорода 3% р-р 3 кап 3 кап  - -
Бензидиновый реактив - 1% р-р в 32% уксусной кислоте 3 кап 3 кап. - -
Патол. моча - 5 кап - 20 кап
Норм. моча 5 кап - 20 кап -
№ пробирки №1 норм. №2 пат. №1 норм. №2 пат
Проба

Бензидиновая на кровяные пигменты

Розина на желчные пигменты

«____»____________20___г.

 

Занятие №7. Тема: Обмен сложных белков. Количественное определение гемоглобина плазмы крови. Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови.

Цель: знать этапы пищеварения нуклеопротеидов, основные стадии катаболизма нуклеопротеидов и нуклеиновых кислот в тканях, реакции катаболизма пуриновых оснований, реакции катаболизма пиримидиновых оснований, основные этапы синтеза пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. Уметь выполнять количественное определение мочевой кислоты крови и гемоглобина в плазме крови.

Вопросы для обсуждения.

1. Характеристика этапов пищеварения нуклеопротеинов.

2. Характеристика основных стадий катаболизма нуклеиновых кислот в тканях.

3.Уравнения дезаминирования пуриновых и пиримидиновых оснований.

4. Уравнения образования мочевой кислоты из аденина.

5. Уравнения образования бета-аланина и карбаминовой кислоты из урацила.

6. Основные этапы и ферменты биосинтеза пуриновых нуклеотидов.

7. Основные этапы и ферменты биосинтеза пиримидиновых нуклеотидов.

Выполняемая работа.


Дата добавления: 2018-02-15; просмотров: 111; ЗАКАЗАТЬ РАБОТУ