Работа №3. Количественное определение остаточного азота в крови фотоэлектроколориметрическим методом
Таблица № 3
Принцип метода: _________________________________
Исходный материал | фильтрат, мл | Конц Н2SO4 | Водяная баня | Дист. вода, мл | 0,4 М р-р NaОН, мл | Р-тив Несслера, мл | ФЭК против контроля, красный или зелен. с/ф , кювета 2 см. | Расчет по калибровочной кривой (Е = m) х =m*2 * 5000 = 1 * 1000 = m*10 = |
№1 контроль | - | - | - | 10,0 | - | 0,5 |
= г/мл | |
№2 опыт 1мл дист. воды + 0,4 мл сывор. кр. + 2,6 мл ТХУ, перемеш, ч. 10 мин. фильт- ть | 1,0 | 1 кап. | 1-2 мин до закипания | 8,0 | 0,5 | 0,5 | Е = |
Норма – 0,2-0,4 г/л
Вывод:____________________________________________________________
Подпись преподавателя ______________________
«____» ________________20____г.
Занятие №5 Тема: Обмен аминокислот и белков. Количественное определение мочевины в сыворотке крови.
Цель: знать пути обезвреживания аммиака в организме, синтез аминокислот и использование аминокислот как лекарственных веществ. Уметь готовить препарат уреазы и определять количественное содержание мочевины в сыворотке крови.
Вопросы для обсуждения.
1.Обезвреживание аммиака.
2.Орнитиновый цикл.
3. Биосинтез аминокислот, первичный синтез аминокислот.
4. Аминокислоты как лечебные средства
Выполняемая работа
Препарат уреазу получают следующим образом: очищают 3-4 семечки арбуза, извлеченные зерна растирают в ступке, сначала в 1 мл воды, а затем добавляют воду до 10 мл. Полученную эмульсию фильтруют.
|
|
Работа №1. Определение мочевины крови уреазным методом с реактивом Несслера Таблица № 1 Принцип метода:__________________________________________________
| Расчет | Х=Еоп*5 Ест. = ммоль/л | Вывод: _________________________________________________________________________________________________
Норма – 2,50- 8,33 ммоль/л. Подпись преподавателя _____________________
| |
ФЭК, светофильтр синий, кювета 0,5см против 3,5 мл воды +0,5мл р-ва Несслера | Еоп= | Ест= | ||
Р-тив Нес-слера | 0,5 мл перемешать | 0,5 мл перемешать | ||
Р-р сегне-товой соль 0,2г/ 100мл | 2,25мл | 2,25мл | ||
Филь-трат | 1,25 фильтрат №1 | 1,25 фильтрат №2 | ||
Р-р NaОН 1,5г/100мл | 0,4 мл перемешать, фильтровать через 5 мин. | 0,4 мл перемешать, фильтровать через 5 мин. | ||
Р-р ZnSO4 7,5г/100мл | 0,4 мл | 0,4 мл | ||
Термостат 37°С | 20мин | 20мин | ||
Препарат уреазы | 1 мл переме-шать закр. проб. | 1 мл переме-шать закр. проб. | ||
Станд. р-р мочевины 5ммоль/л | - | 0,2мл | ||
Сыво-ротка крови | 0,2мл | - | ||
Дист. вода | 3 мл | 3 мл | ||
№ пробы | №1 опыт | №2 стандарт |
«____» ________________20____г.
Занятие №6 Тема: Обмен сложных белков. Определение билирубина и его фракций в сыворотке крови. Обнаружение кровяных и желчных пигментов в моче.
|
|
Цель: знать особенности обмена сложных белков, распад и синтез гемоглобина, образование желчных пигментов и их диагностическое значение. Уметь определять количественно содержание билирубина и его фракций в сыворотке крови по Йендрашику, Клеггорну и Грофу, проводить качественную реакцию на кровяные и желчные пигменты в моче.
Вопросы для обсуждения.
1. Особенности обмена хромопротеинов.
2. Распад гемоглобина в пищеварительном тракте и в тканях.
3. Синтез гема, уравнения образования δ-аминолевулиновой кислоты и порфобилиногена.
4. Нарушение образования желчных пигментов, желтухи.
5. Характеристика свободного билирубина.
6. Характеристика связанного билирубина.
7. Определение фракций билирубина в диагностике нарушений печени.
Выполняемая работа
Работа №1. Определение билирубина и его фракций в сыворотке крови спиртовым методом Таблица № 1 Принцип метода:__________________________________________________
| Расчет | ОБЩИЙ БИЛИРУБИН | Вычисляют Е1-0 - Ек и по калибровочному графику находят содержание общего билирубина в мкмоль/л | СВЯЗАННЫЙ (ПРЯМОЙ) БИЛИРУБИН | Вычисляют Е1-С - Ек и по калибровочному графику находят содержание связанного билирубина
в мкмоль/л | Свободный (непрямой) билирубин определяют: С общий – С примой = ? мкмоль/л
Вывод: ______________________________________________________________________________________
Норма: общий билирубин – 8,6-20,5 мкмоль/л; прямой билирубин – до 4,3 мкмоль/л.
| ||||
ФЭК, синий светофильтр, против воды, кювета на 1 см | Е1-0 = | Ек = | Е 1-С = | Ек = | ||||||
Физ. р-р | - | - | 3,0мл взбол-тать | - | ||||||
Дист. вода | 1,0мл | 1,0мл | - | 1,0мл | ||||||
Развед. этанол | 1,5мл, взболтать, оставить на 25 мин для экстракции в термостате | 1,5мл, взболтать, оставить на 25 мин для экстракции в термостате | Не добавлять! Оставить на 25 мин. в термостате. | 1,5мл, взболтать, оставить на 25 мин для экстракции в термостате | ||||||
Диазореактив | 1,0мл смеси р-вов №1 и №2 | 1,0 мл р-ра №1 | 0,5 мл смеси р-ов №1 и №2 | 1,0мл р-ра №1 | ||||||
Сыворотка крови | 0,5 мл | 0,5 мл | 0,5 мл | 0,5 мл | ||||||
Проба | опыт | контроль | опыт | контроль |
Работа №2. Обнаружение пигментов в моче Таблица № 2
| Окрашивание | Вывод: ___________________________________________________
Подпись преподавателя ____________________________
| ||||
1% р-р йода спиртовый | 10 кап наслоить | 10 кап наслоить | ||||
Пероксид водорода 3% р-р | 3 кап | 3 кап | - | - | ||
Бензидиновый реактив - 1% р-р в 32% уксусной кислоте | 3 кап | 3 кап. | - | - | ||
Патол. моча | - | 5 кап | - | 20 кап | ||
Норм. моча | 5 кап | - | 20 кап | - | ||
№ пробирки | №1 норм. | №2 пат. | №1 норм. | №2 пат | ||
Проба | Бензидиновая на кровяные пигменты
| Розина на желчные пигменты |
«____»____________20___г.
Занятие №7. Тема: Обмен сложных белков. Количественное определение гемоглобина плазмы крови. Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови.
Цель: знать этапы пищеварения нуклеопротеидов, основные стадии катаболизма нуклеопротеидов и нуклеиновых кислот в тканях, реакции катаболизма пуриновых оснований, реакции катаболизма пиримидиновых оснований, основные этапы синтеза пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов. Уметь выполнять количественное определение мочевой кислоты крови и гемоглобина в плазме крови.
Вопросы для обсуждения.
1. Характеристика этапов пищеварения нуклеопротеинов.
2. Характеристика основных стадий катаболизма нуклеиновых кислот в тканях.
3.Уравнения дезаминирования пуриновых и пиримидиновых оснований.
4. Уравнения образования мочевой кислоты из аденина.
5. Уравнения образования бета-аланина и карбаминовой кислоты из урацила.
6. Основные этапы и ферменты биосинтеза пуриновых нуклеотидов.
7. Основные этапы и ферменты биосинтеза пиримидиновых нуклеотидов.
Выполняемая работа.
Дата добавления: 2018-02-15; просмотров: 389; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!