СБОР ДИАГНОСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА
Флаконы для сбора диагностического материала должны отвечать следующим требованиям:
• должны быть изготовлены из ударостойкого материала;
• должны легко расплавляться при автоклавировании;
• быть достаточного объёма (40-50 мл);
• иметь широкое отверстие для сбора мокроты (диаметр не менее 30 мм);
• быть удобными в обращении, прозрачными или полупрозрачными, чтобы можно было оценить количество и качество собранной пробы, не открывая крышку.
Для получения оптимальных результатов исследования необходимо соблюдать следующие условия:
• сбор материала проводить до начала химиотерапии;
• материал для исследования необходимо собирать до утреннего приёма пиши и лекарственных препаратов;
• для исследования желательно собрать не менее 3 проб утренней мокроты. Собирают мокроту в течение 3 дней подряд;
• собранный материал необходимо как можно быстрее доставить в лабораторию:
• в случае, когда доставить материал в лабораторию немедленно невозможно, его сохраняют в холодильнике при температуре воздуха 4 °С не более 48 ч;
• при перевозке материала необходимо особенно тщательно следить за целостностью флаконов.
Правильно собранная мокрота имеет слизистый или слизисто-гнойный характер. Оптимальный объём исследуемой порции мокроты составляет 3-5 мл.
Мокроту собирают под надзором медицинского работника. Лицам, ответственным за сбор мокроты, необходимо следить за выполнением определённых правил:
|
|
• нужно объяснить больному цели исследования и необходимость откашливать не слюну или носоглоточную слизь, а содержимое глубоких отделов дыхательных путей. Этого можно добиться в результате продуктивного кашля, возникающего после нескольких (2-3) глубоких вдохов. Нужно также предупредить больного, что он должен предварительно прополоскать рот кипячёной водой, для удаления основной части вегетирующей в ротовой полости микрофлоры и остатков пищи, затрудняющих исследование мокроты;
• участвующий в сборе мокроты медицинский работник, помимо халата и шапочки, должен надеть маску, резиновые перчатки и резиновый фартук;
• стоя позади больного, ему рекомендуют держать флакон как можно ближе к губам и сразу же отделять в него мокроту по мере её откашливания, при этом необходимо предусмотреть, чтобы поток воздуха был направлен в сторону от медработника;
• по завершении сбора мокроты медицинский работник должен тщательно закрыть флакон крышкой и оценить количество и качество собранной мокроты.
Затем флакон маркируют и помещают в специальный бикс для транспортировки в лабораторию.
Если больной не выделяет мокроту, то накануне вечером и рано утром в день сбора материала нужно дать ему отхаркивающее средство: экстракт корней алтея лекарственного (мукалтин*), бромгексин, амброксол и др. — или применить раздражающую ингаляцию, используя оборудование, установленное в комнате для сбора мокроты. Собранный таким образом материал не подлежит консервации и должен быть исследован в день сбора. Во избежание его «выбраковки» в лаборатории в направлении следует сделать специальную отметку.
|
|
Если в данном учреждении не проводят микробиологические исследования, собранный диагностический материал должен быть централизованно доставлен в лабораторию при условии обязательного сохранения материала в промежутках между доставками в холодильнике или с применением консервантов. Доставляют материал в лабораторию в транспортировочных ящиках, которые легко можно продезинфицировать. Каждая проба должна быть снабжена соответствующей этикеткой, а вся партия—заполненным сопроводительным бланком.
Этапы микробиологического и молекулярно-генетического обследования
Для получения достоверных и информативных результатов наличия МБТ в диагностическом материале и данных о ЛЧ возбудителя необходимо проводить комплексные лабораторные исследования.
|
|
Этапы микробиологического и молекулярно-генетического обследования с целью диагностики и контроля химиотерапии туберкулеза:
1. Выявление возбудителя ТБ в диагностическом материале, собранном до начала химиотерапии:
Используют все доступные методы, обеспечивающие возможно быстрое получение результатов с наибольшей достоверностью:
– люминесцентная/LED-микроскопия,
– МГМ,
– культуральные исследования с посевом на жидкие и плотные питательные среды.
По результатам экспресс-исследований определяют статус больного, форму помощи и направляют его в соответствующее отделение.
2. Скрининг ЛУ ТБ – максимально быстрое выявление генетических маркеров устойчивости к препаратам, определяющим стартовые режимы лечения (рифампицин, изониазид, фторхинолоны и другие ПТП) для назначения адекватного режима лечения и перевода пациента в соответствующее отделение.
3. Полная характеристика выделенной культуры для подтверждения результатов скрининговых исследований и обоснования назначения индивидуализированной схемы лечения согласно ЛЧ возбудителя. На данном этапе используют один или несколько из общепринятых культуральных методов определения ЛЧ МБТ (в зависимости от спектра и характера устойчивости), а также проводят дифференциацию и более полную идентификацию выделенных культур иммунохроматографическими, МГМ, биохимическими и другими методами.
|
|
4. Исследования, проводимые с целью обоснования и контроля химиотерапии.
Обследование до начала лечения. Выявление и идентификация возбудителя, скрининг ЛУ. Для выявления возбудителя ТБ рекомендуется проводить анализ двух образцов диагностического материала, собранных до начала лечения, по следующей схеме:
1-й образец (все исследования проводятся из одной и той же пробы):
– люминесцентная/LED-микроскопия из осадка,
– посев на 1 пробирку с жидкой питательной средой (для культивирования
в системе с автоматизированным учетом роста микроорганизмов) и парал-
лельно на 1 пробирку с ППС,
– ПЦР-исследование для обнаружения ДНК МБТ/ДНК МБТ с определением
ЛУ к рифампицину.
2-й образец (все исследования проводятся из одной и той же пробы):
– люминесцентная/LED микроскопия из осадка,
– посев на 1 пробирку с жидкой средой и на 1 пробирку с плотной средой либо (при ограниченных ресурсах) посев на 2 пробирки с разными по составу ППС,
– ПЦР-исследование для обнаружения ДНК МБТ (при ограниченных ресурсах рекомендуется проводить по показаниям, в случае, если первый результат тестирования методом ПЦР был отрицательным).
При выделении культуры микобактерий проводят:
– дифференциацию МБТ от НТМБ,
– определение ЛЧ выделенной культуры.
Для дифференциации МБТ от НТМБ рекомендуется использовать, в первую очередь, микроскопию культуры с окраской по Ц – Н, при получении культуры на плотной среде – проводить учет культуральных особенностей (скорость роста, пигментообразование), а также использовать иммунохроматографический тест. Кроме того, могут быть использованы методы: ПЦР на наличие ДНК МБТ, ПЦР на ДНК НТМБ, ДНК-стриповая технология, другие доступные методы.
Дата добавления: 2020-01-07; просмотров: 177; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!