Опыт 1. Определение концентрации пировиноградной кислоты (ПВК) в моче или сыворотке крови.
1. В две пробирки внесите реактивы согласно следующей таблице:
| Раствор | Опытная проба, мл | Контрольная проба, мл |
| Исследуемый образец | 2 | - |
| Дистиллированная вода | - | 2 |
| 2,4-динитрофенилгидразин | 0,8 | 0,8 |
2. Содержимое пробирок на 15 мин поместите в темное место при комнатной температуре.
3. В каждую пробирку внесите по 1 мл 10%-го раствора NаOH и через пять минут измерьте оптическую плотность при длине волны 620 нм опытной пробы против контрольной и калибровочной пробы против контрольной.
4. Расчет проведите по готовому калибровочному графику.
Калибровочный график зависимости величины оптической плотности раствора ( D ) от концентрации ПВК в пробе.
Расчетсодержания ПВК в суточной моче (на диурез 1500 мл):
Для пересчета содержания ПВК (в мг) в единицы количества вещества (мкмоль) надо умножить соответствующие величины на 11,4 (коэффициент пересчета).
Норма для человека: 10-25 мг/сутки или 114-284 мкмоль/сутки пировиноградной кислоты.
Сравните полученные значения с нормальными величинами. Каковы причины повышенного содержания пировиноградной кислоты в сыворотке крови и моче?
Опыт 2. Определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц.
1. Взвесьте 1 г мышечной ткани.
2. Поместите ткань в ступку, тщательно разотрите со стеклянным песком, добавляя 3-4 мл раствора 5%-ной янтарной кислоты.
3. Полученный гомогенат перенесите поровну в 2 пробирки.
|
|
|
4. Содержимое одной пробирки кипятите в водяной бане в течение 3-5 минут.
5. Затем в обе пробирки добавьте по 1 капле раствора метиленовой сини, перемешайте и залейте поверхность жидкости 0,5 мл растительного масла для изоляции от кислорода воздуха. Обе пробирки инкубируйте в водяной бане (40оС) в течение 10 минут.
Дайте объяснение наблюдаемым явлениям. Какова функция метиленовой сини в данном эксперименте? На какое соединение эта функция возлагается в живой клетке?
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Занятие № 10. «Обмен углеводов (часть 1)»
Цель занятия: рассмотреть факторы, влияющие на переваривание углеводов; освоить метод количественного определения глюкозы в крови.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
1. Углеводы: строение и классификация.
2. Углеводы: биологическая роль и функции углеводов в организме.
3. Переваривание углеводов в желудочно-кишечном тракте у моногастричных животных. Ферменты, участвующие в переваривании углеводов. Нарушения переваривания углеводов.
4. Особенности переваривания углеводов у жвачных животных. Пути включения летучих жирных кислот (ЛЖК) в метаболизм.
5. Метаболизм глюкозо-6-фосфата. Регуляция содержания глюкозы в крови. Биологическая значимость данного явления.
|
|
|
6. Синтез гликогена: последовательность стадий и биологическое значение процесса.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Экспериментальная работа.
Опыт 1. Воздействие формальдегида на активность амилазы.
1. Возьмите две пробирки.
2. В опытную пробирку налейте по 1 мл растворов крахмала, амилазы и 5%-ного формальдегида.
3. В контрольную пробирку налейте по 1 мл раствора крахмала, амилазы и воды.
4. Поместите пробирки на 10 минут в водяную баню при 37°С.
5. В обе пробирки добавьте по 1 капле 1%-ного раствора йода.
Объясните полученные результаты. Где на практике животные могут столкнуться с формальдегидом?
Дата добавления: 2019-09-13; просмотров: 687; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!