Транспортирование и хранение проб

⇐ ПредыдущаяСтр 2 из 3Следующая ⇒

Предметные стекла или кассеты запаковывают в стерильные контейнеры и/или пластиковые пакеты для предотвращения какого-либо вторичного загрязнения. Защищают их от неблагоприятных воздействий (увлажнения, пересушивания, перегрева, запыления и т.д.) и транспортируют в лабораторию для анализа. Предпочтительно проанализировать пробы в течение 1 недели после их отбора. До последующей обработки пробы хранят в лаборатории при комнатной температуре защищенными от пересушивания.

Обеспечение качества

Лаборатория должна иметь документированное руководство по качеству, находящееся в свободном доступе для сотрудников.

Градуировка расхода воздуха, оперативный контроль и техническое обслуживание системы отбора проб

Градуировку устройства отбора проб следует проводить с помощью сертифицированного объемного расходомера, погрешность измерения объема воздуха которого в кубических метрах, приведенного к реальным условиям, находится в пределах ±5%. Газовый счетчик должен быть подключен к входному отверстию устройства отбора проб. Следует убедиться в том, что входное отверстие газового счетчика свободно. После регулирования расхода точность дисплея пробоотборника должна быть соотнесена с объемным расходомером утвержденного типа. При прокачивании воздуха через устройство отбора проб в течение 30 мин отклонение показания дисплея устройства отбора проб от показания расходомера утвержденного типа должно быть в пределах ±1%.

Периодичность проверки градуировки оборудования по расходу воздуха (оперативный контроль) зависит от стабильности его работы. Полную градуировку выполняют перед началом новой серии измерений или после значительных изменений, например, если было установлено новое или отремонтированное оборудование или после технического обслуживания насоса. Если расход, определенный с помощью эталона сравнения, отклоняется более чем на ±2% от значения, требуемого для корректной работы входного отверстия, то объемную скорость потока регулируют в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Убеждаются в том, что во время отбора проб не происходит изменения потока воздуха более чем на ±2% и что время, необходимое для достижения требуемой скорости отбора проб в начале процесса отбора проб, остается по возможности наиболее коротким для сведения к минимуму влияния объема пробы.

Для некоторых устройств отбора проб пользователь этого оборудования не может осуществить проверку и настройку номинального потока, в этом случае ее регулярно выполняет производитель. В течение межповерочного интервала производителем должна быть обеспечена постоянная величина потока, а устройство отбора проб должно быть оснащено встроенной системой контроля, предотвращающей отклонения от номинального потока.

Протокол отбора проб

Маркируют пробы для однозначной идентификации.

Заполняют протокол отбора проб для каждой пробы перед ее отбором (или сразу после отбора).

Протокол должен содержать, по крайней мере, следующую информацию:

a) ссылку на настоящий стандарт;

b) наименование и адрес заказчика;

c) цель измерений;

d) тип использованного пробоотборного устройства;

e) объем отобранного воздуха;

f) дату, время, описание места и продолжительности отбора проб.

Характеристики эффективности

Характеристики эффективности были определены с применением PS 30 и MBASS30 лабораторией Umweltmykologie Dr. Dill & Dr. Trautmann GbR в Германии с привлечением субсидий на проведение научно-исследовательской работы, выданной Федеральным агентством по охране окружающей среды.

Физическая эффективность отбора проб была определена при различных скоростях воздуха (15 дм /мин, 22,5 дм /мин, 30 дм /мин и 45 дм /мин) путем фильтрации воздуха на выходном отверстии импактора для определения неосажденных грибков. Эффективность отбора проб увеличивается при увеличении скорости от 15 дм /мин до 30 дм /мин. Для скорости воздуха 45 дм /мин увеличения эффективности зафиксировано не было. Для крупных спор эффективность отбора проб была выше, чем для небольших спор. Для спор Cladosporium была достигнута эффективность отбора проб порядка 90% (см. рисунок 1 ), в то время как для спор типа Aspergillus/Penicillium эффективность составила только 30-80%. В дальнейших экспериментах была использована скорость потока воздуха 30 дм /мин. Сопоставимая эффективность отбора проб была опубликована для пробоотборного зонда Air-О-Cell) (см. [7]).

_______________

Air-O-Cell является примером подходящей серийно выпускаемой продукции. Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой ISO данной продукции.

При отборе проб щелевым импактором с помощью пробоотборника РМ 30 образуется след длиной приблизительно 1,6 см и 1,1 см в диаметре.

_______________

РМ 30 является примером подходящей серийно выпускаемой продукции. Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой ISO данной продукции.

При 1000-кратном увеличении в пределах области 1,6 см в продольном направлении лежат приблизительно 94 обзорных поля микроскопа. С использованием "чистых" культур при различных содержаниях было определено распределение крупных (Chaetomium или Stachybotrys) и небольших спор (Aspergillus/Penicillium). Большое содержание было обнаружено во всех обзорных полях микроскопа, при этом небольшое количество спор располагались в области начала и конца пробоотборной поверхности (см. рисунки 2 и 3 ). Отмечалось, что при низких концентрациях спор в пробе воздуха многие обзорные поля микроскопа были пустыми, также эффект отсутствия спор в начале и в конце пробоотборной поверхности был еще более заметным (см. рисунки 4 и 5 ). Подсчет небольших спор обычно делается при 1000-кратном увеличении в выбранных обзорных полях микроскопа. Области в начале и конце следа пробы не следует включать в подсчет вследствие очень низкого содержания или отсутствия спор в них.

Дальнейшие эксперименты были проведены для определения неопределенности измерения при проверке нескольких (5, 10, 20 или 30 из 94) обзорных полей микроскопа. Неопределенность измерения уменьшается при увеличении содержания спор и увеличении числа обзорных полей для подсчета (см. таблицу 2 ). Для того чтобы неопределенность измерения составляла менее 10%, должно быть подсчитано не менее 30, 20, 10 или 5 обзорных полей микроскопа с количеством спор около 100, 200, 1000 и 2000 на 200 дм воздуха соответственно.

Пригодность метода в рабочих условиях изначально была проверена на основе сравнительных измерений с применением PS 30 и MBASS30 (см. приложение В ).

Y - эффективность отбора проб, %

Рисунок 1 - Эффективность отбора проб для крупных спор (Cladosporium) при различных скоростях расхода воздуха

X - номер исследуемого участка; Y - число спор

Рисунок 2 - Распределение 1038 спор Stachybotrys chartarum в 94 исследуемых участках следа отбора проб

X - номер исследуемого участка; Y - число спор

Рисунок 3 - Распределение 2250 спор типа Aspergillus/Penicillium в 94 исследуемых участках вдоль следа отбора проб

X - номер исследуемого участка; Y - число спор

Рисунок 4 - Распределение 214 спор Chaetomium в 94 исследуемых участках вдоль следа отбора проб

X - номер исследуемого участка, Y - число спор

Рисунок 5 - Распределение 144 спор типа Aspergillus/Penicillium в 94 исследуемых участках вдоль следа отбора проб

Таблица 2 - Среднее количество спор и подсчитанное стандартное отклонение при различном количестве обзорных полей микроскопа в четырех пробах с различным количеством спор


Номер пробы	Содержание спор в 200 дм воздуха. Обследовано 5 обзорных полей микроскопа		Содержание спор в 200 дм воздуха. Обследовано 10 обзорных полей микроскопа		Содержание спор в 200 дм воздуха. Обследовано 20 обзорных полей микроскопа		Содержание спор в 200 дм воздуха. Обследовано 30 обзорных полей микроскопа
	Среднее	SD, %	Среднее	SD, %	Среднее	SD, %	Среднее	SD, %
1	133	34	122	24	120	14	126	9
2	248	17	255	11	248	7	251	4
3	1031	16	1019	8	1016	5	1020	6
4	2239	6	2283	4	2260	3	2277	2
Примечания 1 Пробы 1 и 4: споры Aspergillus и Penicillium. 2 Проба 2: споры Chaetomium. 3 Проба 3: споры Stachybotrys chartarum.

Приложение А

(справочное)

Примеры импакторов

Таблица А.1 - Щелевые импакторы для определения общего количества спор в воздухе замкнутых помещений


Система отбора проб/объемный расход	Рекомендо- ванный период отбора проб	Объем пробы	Пороговое значение ( )	Подготовка проб/метод анализа	Конечный диапазон оценки в спор/м (фрагмент мицелия/м )
Пробоотборник со сменными предметными стеклами, расход приблизительно 30 дм /мин, например PS 30 и MBASS30	приблизи- тельно от 5 до 7 мин	от 0,15 до 0,2 м	1,8 нм	Микроскопия окрашенных объектов и световая микроскопия; подсчет типов спор (род и/или родовая группа)	от 50 до 100000
Пробоотборник со сменными предметными стеклами, расход приблизительно 15 дм /мин, например Allergenco MK3	от 5 до 10 мин	от 0,075 до 0,15 м	данные отсутствуют	Микроскопия окрашенных объектов и световая микроскопия; подсчет типов спор (род и/или родовая группа)	от 50 до 100000
Одноразовая кассета, расход приблизительно 15 дм /мин, например кассета Air-O-Cell , кассета Allergenco-D	от 5 до 10 мин	от 0,075 до 0,15 м	от 1,8 до 2,6 нм	Микроскопия окрашенных объектов и световая микроскопия; подсчет типов спор (род и/или родовая группа)	от 50 до 100000
Эффективность улавливания зависит от выбранной пробоотборной среды (адгезия, вязкость). Эффективность улавливания зависит от строения внешней оболочки спор (контакт спора-пробоотборная среда). Эффективность улавливания зависит от конструкции одноразовой кассеты. Диапазон оценки применяют для детальной оценки. В таких случаях меньшее значение зависит от количества детальных оценок (см. 6.2 и 6.3 ); верхнее значение, достижимое в измерительной практике, широко варьируется, поскольку споры, чешуйки кожи, другие частицы и т.п., уловленные на поверхность импактора, ограничат дальнейшую адгезию спор. Проведение оценки полного вида пробы, которая имеет смысл только для спор с ярко выраженной морфологической структурой (например, Stachybotrys, Chaetomium), позволяет определить одну спору на всей поверхности воздействия, т.е. во всем объеме пробы. Обнаружение одной споры, тем не менее, не позволяет провести количественную оценку. Основано на объеме пробы и расходе, которые рекомендуются изготовителем. Allergenco-D является примером подходящей серийно выпускаемой продукции, выпускаемой Environmental Monitoring Systems (EMS). Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой ИСО данной продукции.