Питательные среды для хранения, пересева и накопления молочнокислых бактерий и дрожжей



 

Чистые культуры хранятся и накапливаются на солодовых средах, которые готовятся из солодового сусла плотностью 18-20% с.в. Солодовое сусло можно получать с пивзаводов или готовить из дробленого ячменного солода.

 

Навеску дробленого солода в количестве 300 г заливают 1 л водопроводной воды с температурой 46 °С, тщательно перемешивают и помещают в водяную баню на 30 мин при 45 °С. Через 30 мин температуру смеси повышают до 55 °С и поддерживают в течение 1 ч. Далее температуру смеси повышают до 63 °С и при постоянном перемешивании поддерживают на этом уровне до конца осахаривания крахмала, т.е. до исчезновения синей окраски при пробе на йод (примерно в течение 2-2,5 ч). Полученный затор отжимают через полотно, чтобы освободить от дробины, разливают по колбам и стерилизуют в автоклаве при 1 атм в течение 5 мин.

 

Плотность солодового сусла определяют по сахарометру при температуре сусла +20 °С.

 

Для приготовления солодового сусла, предназначенного для выращивания молочнокислых бактерий, исходное солодовое сусло разбавляют водопроводной водой до плотности 12% с.в., разливают по колбам или пробиркам и стерилизуют при 1 атм в течение 5 мин.

 

Солодовое сусло для выращивания чистых культур дрожжей получают путем разбавления исходного сусла (предварительно профильтрованного через вату) водопроводной водой до плотности 8% с.в. Полученную среду разливают по колбам и пробиркам и стерилизуют при 1 атм в течение 5 мин.

 

Для хранения и рассылки дрожжей применяют сусло-агар, который приготовляют из профильтрованного солодового сусла плотностью 8% с.в. путем добавления 2% агара. Расплавленная среда разливается по пробиркам и стерилизуется при 1 атм 5 мин.

 

Хранение и рассылка молочнокислых бактерий и дрожжей

 

Чистые культуры молочнокислых бактерий сохраняют в пробирках с солодовым суслом плотностью 12% с.в. с мелом при +4 °С или при комнатной температуре.

 

Пересев культур производят один раз в месяц путем перенесения стерильной пипеткой 0,2-0,5 мл культуральной жидкости в пробирку со свежей питательной средой. Рост культур осуществляют в течение двух суток в термостате при оптимальной для каждого штамма температуре.

 

Рассылку молочнокислых бактерий производят в запаянных ампулах на жидкой солодовой среде с добавлением мела.

 

Для приготовления закваски по разводочному циклу каждый штамм бактерии накапливают отдельно до объема 1000 мл путем трехступенчатых пересевов:

 

1 мл культуры из ампулы с соблюдением правил стерильности переносят в пробирку с 10 мл среды. Рост в течение 48 ч при оптимальной для штамма температуре;

 

всю культуру переносят в стерильную колбу емкостью 250 мл с 200 мл среды. Рост в течение 48 часов при оптимальной для штамма температуре;

 

всю культуру переносят в стерильную колбу емкостью 1,6 л с 1000 мл среды. Рост в течение 48 часов при оптимальной для штамма температуре.

 

Из готовых культур каждого штамма с помощью мерного цилиндра отбирают необходимое количество для приготовления закваски по разводочному циклу.

 

Чистые культуры дрожжей хранят в пробирках на солодовом агаре при комнатной температуре или при +4 °С. Пересев дрожжей производят 1 раз в месяц путем переноса бактериологической петлей небольшого количества дрожжевых клеток на свежую среду с соблюдением правил стерильности.

 

Для приготовления густой или жидкой заквасок по разводочному циклу дрожжи накапливают до объема 500 мл путем последовательных трехступенчатых пересевов:

 

культуру дрожжей с косяка бактериологической петлей с соблюдением правил стерильности пересевают в пробирку с 10 мл среды. Рост в течение 48 часов при оптимальной для каждого штамма температуре;

 

всю культуру переносят в стерильную колбу емкостью 100 мл с 50 мл среды. Рост 48 часов при оптимальной температуре;

 

всю культуру переносят в стерильную колбу емкостью 1 л с 500 мл среды. Рост в течение 48 часов при оптимальной температуре.

 

Из готовой культуры дрожжей с помощью мерного цилиндра отбирают нужное количество для приготовления закваски по разводочному циклу.

 

Примечание. При выведении заквасок с небольшой массы накопление чистых культур молочнокислых бактерий проводят до объема 100 мл, дрожжей - до 50 мл.

 


Дата добавления: 2019-09-02; просмотров: 67;