Фотометричне визначення вуглеводів з антроновим реагентом та пікриновою кислотою
Приготування реактивів
Приготування антронового реагенту :
Наважку антрону масою (0,367 ± 0,001) г кількісно переносять в мірну колбу місткістю 100 см3, приливають 50 см3 концентрованої сірчаної кислоти густиною 1,835 г/100 см3 та розчиняють антрон при перемішуванні.
Вміст колби доводять сірчаною кислотою до мітки, перемішують та поміщають в темне місце на 4 години до повного розчинення антрону.
Отриманий розчин слід зберігати в темному місці при температурі 6-8 °С не більше 15 діб.
Для отримання антронового реагенту допускається використання концентрованої кислоти, х.ч., але при цьому термін придатності не повинен перевищувати 2 доби.
Приготування розчинів гідроксиду натрію масовою долею 0,5 % та 35% :
Наважку масою (0,500 ± 0,01) та (35,00 ± 0,01) г розчиняють в 50 см3 дистильованої води відповідно в двох мірних колбах ємкістю 100 см3 кожна. Розчини охолоджують до температури 20°С, доводять об’єм колби дистильованою водою до мітки та перемішують.
Приготування розчину пікринової кислоти масовою долею 0,5 :
Наважку масою (0,500 ± 0,01) г кількісно переносять в мірну ковбу ємкістю 100 см3, приливають 50 см3 дистильованої води та розчиняють при перемішуванні на киплячій водяній бані.
Отриманий розчин охолоджують до 20°С, доводять його об’єм дистильованою водою до позначки та перемішують.
Розчин слід зберігати в темному місці при кімнатній температурі не більш 30 діб
Дослідження впливу етанолу на визначення цукрів
|
|
|
Дослідження впливу етанолу на визначення цукрів з антроновим реагентом.
Готували розчин сахарози з водою. Для цього взяли наважку сахарози 0,1000 г, розчинили та перенесли в колбу на 200 см3, термостатувати 20 хв. при 20 °С, доводили до позначки термостатованим дистильованою водою розчином. Концентрація отриманого розчину 0,5000 г/дм3. Брали колби на 25 см3, відбирали в кожну з них по 4,0; 7,5; 11,0; 15; 18,5; 22,5 см3 спирту відповідно. Термостатувати 20 хв при 20°С, доводили до позначки термостатованим дистильованою водою розчином. Проводили вимір оптичної густини з антроновим реагентом в порівнянні з холостим розчином (замість 2,5 см3 додаємо дистильовану воду).
Таблиця 2.4.1 Результати вимірювання впливу етанолу на оптичну густину
| Номер колби | Концент- рація, мг/см3 | Аліквота, см3 | Розбав лення | Добавка етанолу, см3 | Вміст етанолу в колбі, % | Вміст етанолу в реакційній суміші, % | Оптична густина | Середнє значення оптичної густини | |||
| 1 | 0,5 | 2,5 | 25 | 0 | 0 | 0 | 0,147 | 0,146 | |||
| 0,145 | |||||||||||
| 2 | 0,5 | 2,5 | 25 | 4,0 | 15 | 5 | 0,156 | 0,158 | |||
| 0,160 | |||||||||||
| 3 | 0,5 | 2,5 | 25 | 7,5 | 30 | 10 | 0,171 | 0,170 | |||
| 0,168 | |||||||||||
| 4 | 0,5 | 2,5 | 25 | 11,0 | 45 | 15 | 0,180 | 0,179 | |||
| 0,178 | |||||||||||
| 5 | 0,5 | 2,5
| 25 | 15 | 60 | 20 | 0,203 | 0,202 | |||
| 0,200 | |||||||||||
| 6 | 0,5 | 2,5 | 25 | 18,5 | 75 | 25 | 0,208 | 0,207 | |||
| 0,205 | |||||||||||
| 7 | 0,5 | 2,5 | 25 | 22,5 | 90 | 30 | 0,211 | 0,213 | |||
| 0,215 |
Залежність чутливості реакції з антроновим реагентом наведена на рис.2.4.1.
Рис. 2.4. 1 Вплив етанолу на чутливість визначення глюкози з антроновим реагентом
Дослідження впливу етанолу на визначення цукрів з пікриновою кислотою.
Готували розчин глюкози з водою. Для цього брали наважку сахарози 5,0 г, розчиняли та переносили в колбу на 200 см3, термостатували 20 хв при 20°С, доводили до позначки термостатованою дистильованою водою. Концентрація отриманого розчину 25,0 г/дм3.
Потім відбирали 25 см3 розчину глюкози (С=25,00 г/дм3) в колбу на 50 см3. Довели дистильованою водою до мітки. Концентрація отриманого розчину 12,5 г/л
Брали колби на 25 см3, відбирали в кожну з них по 1,0 см3 вихідного розчину. Концентрація глюкози при цьому склала 0,500 г/дм3. Потім додавали 5; 10; 15; 20 см3 спирту відповідно. Термостатували 20 хв. при 20°С, доводили до позначки термостатованою дистильованою водою.
Розчин порівняння: 2,5 мл дистильованої води в реакційну суміш.
Таблиця 2.4.2.1 Вплив етанолу на оптичну густину
| Номер колби | Концентрація, мг/см3 | Аліквота, см3 | Розведення
| Добавка етанолу, мл | Вміст етанолу в колбі, % | Оптична густина | |||
| 1 | 0.5 | 2.5 | 2 | 0 | 0 | 0.501 | |||
| 2 | 0.5 | 2.5 | 2 | 5 | 20 | 0.513 | |||
| 3 | 0.5 | 2.5 | 2 | 10 | 40 | 0.531 | |||
| 4 | 0.5 | 2.5 | 2 | 15 | 60 | 0.535 | |||
| 5 | 0.5 | 2.5 | 2 | 20 | 80 | 0.538 |
Рис. 2. 4 .2 .1 Вплив вмісту етанолу на чутливість визначення глюкози з пікриновою кислотою
Дата добавления: 2019-09-02; просмотров: 251; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!