Характер роста микроорганизмов на жидких и плотных питательных средах. Колонии бактерий, их характеристика.



Рост микробов на плотной питательной среде характеризуется образованием колоний. Колонии – видимые невооруженным глазом скопления бактериальных особей на поверхности или в толще плотной питательной среды. Для характеристики колоний используют следующие признаки:

1. По размеру выделяют следующие колонии: - точечные - диаметр менее 1 мм;
- мелкие - диаметр 1-2 мм;
- средние - диаметр 2-4 мм;

- крупные - диаметр 4-6 мм и более.

2. Форма колонии:
- правильная (круглая);
- неправильная (амебовидная);

- ризоидной (корневидная, напоминающая переплетающиеся корни деревьев).

3. Контуры края колонии (определяют при рассмотрении колонии под лупой или микроскопом с малым увеличением):

- ровные края в виде четко выраженной линии;

- неровные края (фестончатый, волнистый, эрозированный или зазубренный, бахромчатый).

4. Рельеф колонии характеризуется приподнятостью ее над поверхностью пи- тательной среды и формой на вертикальном разрезе. Определяется невооруженным глазом или при помощи лупы при рассматривании сверху и сбоку:

- каплеобразные и куполообразные колонии правильной круглой формы;

- плоско-выпуклые колонии;
- конусообразные колонии;
- колонии с приподнятой серединой;

- колонии с вдавленным центром;
- плоские колонии.
5. Поверхность колонии изучают при помощи лупы или под микроскопом

при малом увеличении:
- матовая или блестящая с глянцем;
- сухая или влажная;
- гладкая или шероховатая.
Гладкие колонии обозначают буквой S (smooth - гладкий), шероховатые -

буквой R (rough - шероховатый).
6. Цвет колонии. Определяется пигментом, который продуцирует культура

микробов. Преобладающее большинство патогенных бактерий пигмента не образует (колонии бесцветны или молочно-мутного цвета). Пигментообразующие виды дают колонии кремовые, желтые, золотисто-оранжевые, синие, красные, сиреневые, черные и др.

7. Структура колоний. Определяется в проходящем свете при слабом увеличении микроскопа, суженной диафрагме или при несколько опущенном конденсоре:

- гиалиновые колонии;
- зернистые колонии;
- нитевидные или волокнистые колонии.
8. Консистенция колоний. Исследуют прикосновением или взятием из нее

части материала бактериологической петлей:

- пастообразные, вязкие или слизистые;

- волокнистые или кожистые;
- хрупкие сухие.

Характер роста бактерий на жидких питательных средах:
1. Рост бактерий с равномерным помутнением среды.
2. Придонный рост бактерий (образование осадка на дне).
3. Пристеночный рост бактерий (образование рыхлых хлопьев,

прикрепленных к внутренней поверхности стенок сосуда).
4. Поверхностный рост бактерий (образование пленки на поверхности

жидкой питательной среды).
Рост на полужидкой питательной среде характеризуется помутнением всей

толщи среды или образованием сосульки цилиндрической или конической формы.

 

20.Питательные среды. Искусственные питательные среды: простые, сложные, элективные, 
дифференциально-диагностические, синтетические. 


ЛУЧШЕ СМОТРИ В МЕТОДАХ

Культивирование бактерий в системах in vitro осуществляется на питательных средах. Искусственные питательные среды должны отвечать следующим требованиям:

• Каждая питательная среда должна содержать воду, так как все процессы жизнедеятельности бактерий протекают в воде.

• Для культивирования гетероорганотрофных бактерий в среде должен содержаться органический источник углерода и энергии. Эту функцию выполняют различные органические соединения: углеводы, аминокислоты, органические кислоты, липиды. Наибольшим энергетическим потенциалом обладает глюкоза, так как она непосредственно подвергается расщеплению с образованием АТФ и ингредиентов для биосинтетических путей. Часто используется в этих целях пептон — продукт неполного гидролиза белков, состоящий из поли-, олиго- и дипептидов. Пептон также поставляет аминокислоты

для построения бактериальных белков.


Для синтеза белков, нуклеотидов, АТФ, коферментов бактериям требуются источники азота, серы, фосфаты и другие минеральные вещества, в том числе микроэлементы. Источником азота может служить пептон; кроме того, большинство бактерий способны использовать соли аммония в качестве источника азота. Серу и фосфор бактерии способны утилизировать в виде неорганических солей: сульфатов и фосфатов. Для нормального функционирования ферментов бактериям требуются ионы Са2+, Mg2+, Mn2+, Fe2+, которые добавляют в питательную среду в виде солей, чаще всего фосфатов.

• Решающее значение для роста многих микроорганизмов имеет рН среды. Поддерживание определенного рН имеет значение для предотвращения гибели микроорганизмов от ими же образованных продуктов обмена.

• Среда должна обладать определенным осмотическим давлением. Большинство бактерий способны расти на изотоничных средах, изотоничность которых достигается добавлением NaCl в концентрации 0,87%. Некоторые бактерии не способны расти на средах при концентрации соли в них ниже 1%. Такие бактерии называются галофильными. Так как устойчивость к осмотическому давлению определяется наличием у бактерий клеточной стенки, бактерии, лишенные клеточной стенки, микоплазмы L-формы, могут расти на питательных средах, содержащих гипертонический раствор, обычно сахарозы. При необходимости к питательной среде добавляют факторы роста, ингибиторы роста определенных бактерий, субстраты для действия ферментов, индикаторы.

• Питательные среды должны быть стерильными.

В зависимости от консистенции питательные среды могут быть жидкими, полужидкими и плотными. Плотность среды достигается добавлением агара.

Агар — полисахарид, получаемый из водорослей. Он плавится при температуре 100 "С, но при охлаждении остывает при температуре 45—50 "С. Агар добавляют в концентрации 0,5% для полужидких сред и 1,5—2% для создания плотных сред. В зависимости от состава и цели применения различают простые, сложные, элективные, минимальные, дифференциально-диагностические и комбинированные среды.

По составу питательные среды могут быть простыми и сложными. К простым средам относятся пептонная вода, питательный бульон, мясопептонный агар. На основе простых сред готовят с/южные среды, например сахарный и сывороточный бульоны, кровяной агар.

В зависимости от назначения среды подразделяются на элективные, обогащения, дифференциально-диагностические. Под

элективными понимают среды, на которых лучше растет какой-то определенный микроорганизм. Например, щелочной агар, имею- щий рН 9,0, служит для выделения холерного вибриона. Другие бактерии, в частности кишечная палочка, из-за высокого рН на этой среде не растут.

Среды обогащения — это среды, которые стимулируют рост какого-то определенного микроорганизма, ингибируя рост других. Например, среда, содержащая селенит натрия, стимулирует рост бактерий рода Salmonella , ингибируя рост кишечной палочки.

Дифференциально-диагностические среды служат для изучения ферментативной активности бактерий. Они состоят из простой питательной среды с добавлением субстрата, на который должен подействовать фермент, и индикатора, меняющего свой цвет в ре- зультате ферментативного превращения субстрата. Примером та- ких сред являются среды Гисса, используемые для изучения спо- собности бактерий ферментировать сахара.

Комбинированные питательные среды сочетают в себе элективную среду, подавляющую рост сопутствующей флоры, и дифференциальную среду, диагностирующую ферментативную активность выделяемого микроба. Примером таких сред служат среда Плоскирева и висмут-сульфитный агар, используемые при выделении патогенных кишечных бактерий. Обе эти среды ингибируют рост кишечной палочки.

Синтетические питательные среды

среды с известным количественным и качественным составом ингредиентов. Они обычно состоят из аминокислот, аммонийных, азотнокислых и др. солей, углеводов, ростовых факторов и стимуляторов роста.

Полусинтетические среды, кроме синтетической основы, содержат незначительное количество кислотного, триптического, дрожжевого, грибного, казеинового гидролизата, альбумина или нативной с-ки крови. С.п.с. применяют в производственных условиях, для изучения питательных потребностей, выращивания к-р клеток.


Дата добавления: 2019-07-15; просмотров: 8373; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!