Подготовка инструмента для искусственного осеменения.
1. Подготовка инструмента при осеменении спермой, замороженной в соломинках.
Для осеменения коров спермой, замороженной в полипропиленовых соломинках, используют универсальный шприц-катетер или ШО-3 и стерильные одноразовые пластиковые чехлы. Один из уголков пакета со стерильными одноразовыми чехлами протирают тампоном, смоченным 96°-ным спиртом. Затем отрезают уголок продезинфицированными ножницами и через надрез выдвигают стерильный чехол наружу на 1/3. Сперму в соломинках оттаивают в водяной бане или оттаивателе при 38-40°С в течение 10 с.
Соломинку после оттаивания протирают насухо марлевой салфеткой и, держа за конец, встряхивают, чтобы воздушный пузырек опустился к пробке. Оттянув поршень шприца-катетера на 90 мм, вставляют соломинку до упора в шприц-катетер так, чтобы воздушный пузырек располагался снаружи. Продезинфицированными острыми ножницами отрезают конец соломинки ниже пробки (оставляя кончик соломинки, выступающий из катетера, примерно на 5 мм). На шприц-катетер надевают санитарный чехол с небольшим натягом так, чтобы выступающий конец соломинки плотно вошел в конусную часть чехла, а чехол был надежно зафиксирован на шприце-катетере
пружинным зажимом или стопорной шайбой.
Слегка надавливая на поршень, удаляют из соломинки остатки воздушного пузырька и, выдавливая наружу немного спермы, проверяют герметичность контакта конца соломинки и санитарного чехла (надо следить, чтобы сперма не попадала в пространство между соломинкой и санитарным чехлом). При этом основная часть шприца-катетера в сборе с санитарным чехлом находится в защитной упаковке санитарного чехла.
|
|
|
Заправленный инструмент переносят к месту осеменения так, чтобы не допустить преждевременного охлаждения спермы.
Подготовка инструмента при осеменении спермой, замороженной в открытых гранулах
Для осеменения коров спермой, замороженной в открытых гранулах, используют стерильные одноразовые полистироловые пипетки, соединенные полиэтиленовым переходником или эластичной трубкой длиной 30-50 мм со шприцем на 2-5 мл.
Один из уголков пакета с полистироловыми пипетками протирают тампоном, смоченным 96°-ным спиртом, надрезают уголок продезинфицированными ножницами или прорывают концом пипетки, выдвигают пипетку через отверстие на 1/3 длины. Соединяют пипетку через переходник или эластичную трубку со шприцем, поршень шприца отодвигают на 1/3, создавая запас воздуха в шприце для полного удаления спермы из инструмента при осеменении. Открытые гранулы оттаивают при температуре 38-40°С в течение 8-10 с. Полистироловую пипетку, соединенную со шприцем, извлекают из пакета, свободный конец пипетки опускают во флакон с оттаянной спермой и, аккуратно оттягивая поршень шприца, набирают сперму в полость пипетки. Держа пипетку вертикально, шприцем вниз, проверяют герметичность инструмента, наблюдая за положением столбика спермы в пипетке: он не должен смещаться вниз. Пипетку со спермой помещают в стерильный чехол или одноразовую перчатку шприцем наружу. Надрезанный угол пакета с оставшимися стерильными полистироловыми пипетками перегибают и фиксируют скрепкой или зажимом.
|
|
|
Остальные работы выполняются так же, как при подготовке инструмента с семенем, замороженным в соломинках.
Оттаивание спермы в пунктах искусственного осеменения и ее оценка
Для оттаивания спермы в пунктах искусственного осеменения, замороженной в открытых гранулах, необходимо иметь стерильные стеклянные флаконы объемом 10 мл, 2,9%-ный раствор лимоннокислого натрия, расфасованный в ампулы по 1 мл, водяную баню или специальные оттаиватели, спиртовый термометр до 50°С, стерильный анатомический пинцет длиной 25-30 см, стерильные марлевые салфетки, полотенце, тампонницу с тампонами, пропитанными 96°-ным спиртом-ректификатом, штатив, микроскоп с нагревательным столиком, чистые предметные и покровные стекла, защитные очки.
|
|
|
Перед началом работы проводят влажную уборку рабочего стола, дезинфицируют спиртовыми тампонами его поверхность. Стерильный инструмент раскладывают на рабочем столе, включают водяную баню или оттаиватель и микроскоп с нагревательным столиком. В водяную баню или оттаиватель помещают необходимое количество флаконов или ампул с 1 см32,9%-ного раствора лимоннокислого натрия, а на нагревательный столик микроскопа кладут чистые предметные и покровные стекла.
После того, как температура водяной бани или оттаивателя достигнет рабочего диапазона (38-40°С), надевают защитные очки, открывают крышку сосуда Дьюара, охлаждают погружением в жидкий азот бранши пинцета, быстро подтягивают к верхней трети горловины сосуда канистру со спермой и извлекают одну гранулу и быстро переносят во флакон или ампулу с 1 см3 2,9%-ного раствора лимоннокислого натрия.
Время от извлечения гранулы из жидкого азота до переноса в водяную баню составляет не более 5 с, а время оттаивания гранулы в оттаивателе – 8-10 с. Во время оттаивания флакон или ампулу осторожно покачивают, не доставая из водяной бани, до появления тонкого стерженька льда в грануле. После оттаивания спермы флакон или ампулу со спермой сразу вынимают из водяной бани или оттаивателя, протирают насухо и ставят в штатив. Температура в помещении пункта должна быть не ниже 18-20°С.
|
|
|
На предметное стекло, лежащее на нагревательном столике микроскопа, имеющем температуру 38-40°С, стеклянной палочкой или пипеткой наносят каплю оттаянной спермы из флакона или ампулы, накрывают покровным стеклом и оценивают. Качество оттаянной спермы определяют под микроскопом по подвижности сперматозоидов. При положительной оценке ее помещают в инструмент для осеменения. Оттаянную сперму необходимо использовать в течение 10-15 мин.
Категорически запрещается оттаивать гранулы при комнатной температуре или в одном флаконе более одной гранулы, а также оставлять оттаянную сперму в водяной бане или оттаивателе. Необлицованные гранулы замороженной спермы должны быть правильной округлой формы объемом 0,2 см3. Гранулы объемом менее 0,2 см3 или имеющие сколы, а также половинки и осколки гранул должны быть выбракованы, о чем составляют соответствующий акт и высылают рекламацию в организацию по искусственному осеменению.
Дата добавления: 2019-02-22; просмотров: 4317; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!