Цитохимические исследования при ОНЛЛ



 

Вариант ОНЛЛ

Реакция

МПО (МРО) ЛП ( SBB) ХАЭ (САЕ) АНЭ ( NSE) NaF PAS
М0 -/+ - -   -/+ дифф.  
М1 + -/+ -/+ -   -
М2 ++ ++ -/+ -   -
М3 ++ ++ + -   -
М4 +/++ +/++ +/++ ++ под. -
М5а -/+ - - +++ под. -
М5b - - -/+ +++ под. -/+ дифф.
М6 -/+ -/+ - -   +++ дифф. или гран.
М7 - - -/+ -/+ под. -/+ дифф.

Примечание. Реакция расценивается как положительная, если она определяется в 3% и более клеток.

Обозначения:

       МПО (МРО) – миелопероксидаза;

       ЛП ( SBB ) – липиды (судан черный В);

       ХАЭ ( CAE ) – хлорацетатэстераза;

       АНЭ ( NSE ) – альфа-нафтилэстераза (неспецифическая эстераза);

       NaF –фторид натрия (подавляемость им АНЭ);

       PAS – гликогенположительный материал в гранулярной или диффузной форме;

       дифф. – диффузное окрашивание;

       гран. – окрашивание отдельных гранул.

 

При этом, бласты при ОНЛЛ не должны экспрессировать на своей поверхности лимфоидных антигенов (CD19, CD20, CD21, CALLA); менее 5% клеток являются TdT-позитивными; Ia/HLA-DR экспрессируется подавляющим большинством бластов.

На долю острых миелобластных лейкозов (М0, М1, М2) приходится около 50% всех случаев ОНЛЛ; М4 составляет 25% случаев; М3 и М5 имеют, примерно, равную частоту: около 10% на каждый вариант; М6 и М7 встречаются редко: менее 5 и менее 3% случаев соответственно.

Таблица 2

 

Иммунологический профиль острых нелимфобластных лейкозов

 

FAB-классификация Иммунофенотип
М1, М2 HLA-DR(+), CD11b(±), CD13(+), CD14(±), CD15(+), CD33(+)
M3 HLA-DR(-), CD11b(±), CD13(+), CD14(-), CD15(±), CD33(+)
M4 HLA-DR(+), CD11b(+), CD13(+), CD14(+), CD15(±), CD33(+)
M5 HLA-DR(+), CD11b(+), CD13(±), CD14(+), CD15(+), CD33(+)
M6 Гликофорин А (+)
М7 Тромбоцитарный гликопротеин IIb/IIIa (+)

 

       Кроме определения морфологических и цитохимических характеристик бластных клеток, необходимо проведение и цитогенетических исследований, позволяющих составить план цитостатической терапии с учетом индивидуальных прогностических факторов.

       Цитогенетические исследования имеют важное прогностическое значение при ОЛ. Нарушения кариотипа в виде анеуплоидии, различных хромосомных аберраций встречаются у 50-70% больных и чаще всего ассоциируются с неблагоприятным прогнозом. Некоторые аберрации характерны для отдельных вариантов ОЛ.

 

Прогностические факторы при острых миелоидных лейкозах

 

Значимые

- возраст более 60 лет – прогноз неблагоприятный

- хромосомные нарушения::

t(8;12) – высокая частота полных ремиссий, длительная выживаемость

16q22, t(15;17) – вероятность получения ремиссии ~ 50%

t(9; 11) – низкая частота ремиссии и короткая выживаемость

12р-, 5q-, инверсия 3 – низкий ответ на индукционную терапию

- вторичные лейкозы – прогноз неблагоприятный

Менее значимые

- другие FAB-варианты лейкоза (М4-М7, неблагоприятный прогноз)

- общесоматический статус (более 50%, благоприятный прогноз)

- лейкоциты более 50х109/л – прогноз неблагоприятный

- наличие палочек Ауэра – благоприятный прогноз.

 

Острые миелобластные лейкозы (ОЛЛ).

 

В группе ОЛЛ по FAB-классификации выделяют: L1 – микролимфобластный (в 80% случаев встречается у детей); L2 – ОЛЛ с типичными лимфобластами (преобладает у взрослых) и L3 – ОЛЛ с макролимфобластами по типу лимфомы Беркитта (редкая форма).

       Цитохимически все ОЛЛ являются негативными на миелопероксидазу, судан черный (окраска на липиды), хлорацетатэстеразу и a-нафтилэстеразу. Наиболее характерной для ОЛЛ является выраженная реакция на гликоген в виде концентрических скоплений вокруг ядра лимфобласта его грубых гранул (PAS-реакция в глыбчатой или гранулярной форме). Положительная реакция на кислую фосфатазу при возможной отрицательной реакции на гликоген отличает Т-клеточный ОЛЛ (табл. 3).

 

Таблица 3

 

Цитохимические реакции при ОЛЛ

Реакция Острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ)
PAS ++
Кислая фосфатаза +++
Пероксидаза -
Хлорацетат-эстераза -
Альфа-нафтил-ацетатэстераза ++++
Липиды (судан черный В) -

 

Применение проточной цитофотометрии позволяет изучить иммунофенотип клеток пунктата костного мозга и в случаях острого лейкоза точно установить его происхождение. Использование ограниченного набора антител, меченных флюорохромами, в большинстве случаев позволяет охарактеризовать клетки опухоли известной комбинацией экспрессируемых (и не экспрессируемых) антигенов.

Таблица 4

 

Цитохимическая классификация подвариантов острых лимфобластных лейкозов

(по F.Heckner, H.Peter Lehmann, Yuan S.Kao, 1994)

Лейкоз ШИК-реакция Кислая фосфатаза TdT
c-ALL >70%++, в виде грубых гранул -, в редких случаях (+) +
T-ALL (L1, L2) <40%+, гранулярная >80%++, фокальная +
B-ALL (L3) от – до (+) (+) гранулы -
B-ALL (из AUL) от – до (+) от – до (+) +

 

Сокращения:

- отрицательная, + слабо положительная, + положительная, ++ сильно положительная реакции;

c-ALL – обычный острый лимфолейкоз;

T-ALL – Т-клеточный острый лимфолейкоз;

B-ALL – В-клеточный острый лимфолейкоз;

AUL – острый недифференцированный лейкоз.

! Дальнейшее субтипирование ОЛЛ возможно только с применением моноклональных антител.

                   Иммунологическая классификация лучше всего разработана для ОЛЛ (табл. 5). Выделяют 4 основных иммунологических варианта ОЛЛ:

1) «общий» ОЛЛ, при котором бластные клетки содержат кластеры дифференциации как В- так и Т-клеток (у взрослых встречается в 70% ОЛЛ);

2) «нулевой» ОЛЛ (или недифференцируемый), характеризующийся отсутствием маркеров обеих клеточных линий (10%) (ни-Т, ни-В-ОЛЛ);

3) Т-ОЛЛ (20%);

4) В-ОЛЛ (5%) (ни-Т-ОЛЛ). Наиболее благоприятный прогноз отмечается при «общем» ОЛЛ, худший – при Т-ОЛЛ, самый плохой – при В-ОЛЛ.

       В свою очередь, ни-Т-ОЛЛ и Т-ОЛЛ подразделяются на ряд иммунофенотипических подвариантов внутри обеих групп в зависимости от того или иного набора антигенов, экспрессируемых подавляющим большинством опухолевых клеток внутри цитоплазмы или на ее поверхности, и определяющих возможный конечный уровень дифференцировки опухолевого клона.

 

Таблица 5

 


Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 317; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!