Цитохимические исследования при ОНЛЛ
Вариант ОНЛЛ | Реакция | |||||
МПО (МРО) | ЛП ( SBB) | ХАЭ (САЕ) | АНЭ ( NSE) | NaF | PAS | |
М0 | -/+ | - | - | -/+ дифф. | ||
М1 | + | -/+ | -/+ | - | - | |
М2 | ++ | ++ | -/+ | - | - | |
М3 | ++ | ++ | + | - | - | |
М4 | +/++ | +/++ | +/++ | ++ | под. | - |
М5а | -/+ | - | - | +++ | под. | - |
М5b | - | - | -/+ | +++ | под. | -/+ дифф. |
М6 | -/+ | -/+ | - | - | +++ дифф. или гран. | |
М7 | - | - | -/+ | -/+ | под. | -/+ дифф. |
Примечание. Реакция расценивается как положительная, если она определяется в 3% и более клеток.
Обозначения:
МПО (МРО) – миелопероксидаза;
ЛП ( SBB ) – липиды (судан черный В);
ХАЭ ( CAE ) – хлорацетатэстераза;
АНЭ ( NSE ) – альфа-нафтилэстераза (неспецифическая эстераза);
NaF –фторид натрия (подавляемость им АНЭ);
PAS – гликогенположительный материал в гранулярной или диффузной форме;
дифф. – диффузное окрашивание;
гран. – окрашивание отдельных гранул.
При этом, бласты при ОНЛЛ не должны экспрессировать на своей поверхности лимфоидных антигенов (CD19, CD20, CD21, CALLA); менее 5% клеток являются TdT-позитивными; Ia/HLA-DR экспрессируется подавляющим большинством бластов.
На долю острых миелобластных лейкозов (М0, М1, М2) приходится около 50% всех случаев ОНЛЛ; М4 составляет 25% случаев; М3 и М5 имеют, примерно, равную частоту: около 10% на каждый вариант; М6 и М7 встречаются редко: менее 5 и менее 3% случаев соответственно.
|
|
Таблица 2
Иммунологический профиль острых нелимфобластных лейкозов
FAB-классификация | Иммунофенотип |
М1, М2 | HLA-DR(+), CD11b(±), CD13(+), CD14(±), CD15(+), CD33(+) |
M3 | HLA-DR(-), CD11b(±), CD13(+), CD14(-), CD15(±), CD33(+) |
M4 | HLA-DR(+), CD11b(+), CD13(+), CD14(+), CD15(±), CD33(+) |
M5 | HLA-DR(+), CD11b(+), CD13(±), CD14(+), CD15(+), CD33(+) |
M6 | Гликофорин А (+) |
М7 | Тромбоцитарный гликопротеин IIb/IIIa (+) |
Кроме определения морфологических и цитохимических характеристик бластных клеток, необходимо проведение и цитогенетических исследований, позволяющих составить план цитостатической терапии с учетом индивидуальных прогностических факторов.
Цитогенетические исследования имеют важное прогностическое значение при ОЛ. Нарушения кариотипа в виде анеуплоидии, различных хромосомных аберраций встречаются у 50-70% больных и чаще всего ассоциируются с неблагоприятным прогнозом. Некоторые аберрации характерны для отдельных вариантов ОЛ.
Прогностические факторы при острых миелоидных лейкозах
Значимые
- возраст более 60 лет – прогноз неблагоприятный
- хромосомные нарушения::
t(8;12) – высокая частота полных ремиссий, длительная выживаемость
16q22, t(15;17) – вероятность получения ремиссии ~ 50%
t(9; 11) – низкая частота ремиссии и короткая выживаемость
|
|
12р-, 5q-, инверсия 3 – низкий ответ на индукционную терапию
- вторичные лейкозы – прогноз неблагоприятный
Менее значимые
- другие FAB-варианты лейкоза (М4-М7, неблагоприятный прогноз)
- общесоматический статус (более 50%, благоприятный прогноз)
- лейкоциты более 50х109/л – прогноз неблагоприятный
- наличие палочек Ауэра – благоприятный прогноз.
Острые миелобластные лейкозы (ОЛЛ).
В группе ОЛЛ по FAB-классификации выделяют: L1 – микролимфобластный (в 80% случаев встречается у детей); L2 – ОЛЛ с типичными лимфобластами (преобладает у взрослых) и L3 – ОЛЛ с макролимфобластами по типу лимфомы Беркитта (редкая форма).
Цитохимически все ОЛЛ являются негативными на миелопероксидазу, судан черный (окраска на липиды), хлорацетатэстеразу и a-нафтилэстеразу. Наиболее характерной для ОЛЛ является выраженная реакция на гликоген в виде концентрических скоплений вокруг ядра лимфобласта его грубых гранул (PAS-реакция в глыбчатой или гранулярной форме). Положительная реакция на кислую фосфатазу при возможной отрицательной реакции на гликоген отличает Т-клеточный ОЛЛ (табл. 3).
Таблица 3
Цитохимические реакции при ОЛЛ
|
|
Реакция | Острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) |
PAS | ++ |
Кислая фосфатаза | +++ |
Пероксидаза | - |
Хлорацетат-эстераза | - |
Альфа-нафтил-ацетатэстераза | ++++ |
Липиды (судан черный В) | - |
Применение проточной цитофотометрии позволяет изучить иммунофенотип клеток пунктата костного мозга и в случаях острого лейкоза точно установить его происхождение. Использование ограниченного набора антител, меченных флюорохромами, в большинстве случаев позволяет охарактеризовать клетки опухоли известной комбинацией экспрессируемых (и не экспрессируемых) антигенов.
Таблица 4
Цитохимическая классификация подвариантов острых лимфобластных лейкозов
(по F.Heckner, H.Peter Lehmann, Yuan S.Kao, 1994)
Лейкоз | ШИК-реакция | Кислая фосфатаза | TdT |
c-ALL | >70%++, в виде грубых гранул | -, в редких случаях (+) | + |
T-ALL (L1, L2) | <40%+, гранулярная | >80%++, фокальная | + |
B-ALL (L3) | от – до (+) | (+) гранулы | - |
B-ALL (из AUL) | от – до (+) | от – до (+) | + |
Сокращения:
- отрицательная, + слабо положительная, + положительная, ++ сильно положительная реакции;
c-ALL – обычный острый лимфолейкоз;
T-ALL – Т-клеточный острый лимфолейкоз;
B-ALL – В-клеточный острый лимфолейкоз;
|
|
AUL – острый недифференцированный лейкоз.
! Дальнейшее субтипирование ОЛЛ возможно только с применением моноклональных антител.
Иммунологическая классификация лучше всего разработана для ОЛЛ (табл. 5). Выделяют 4 основных иммунологических варианта ОЛЛ:
1) «общий» ОЛЛ, при котором бластные клетки содержат кластеры дифференциации как В- так и Т-клеток (у взрослых встречается в 70% ОЛЛ);
2) «нулевой» ОЛЛ (или недифференцируемый), характеризующийся отсутствием маркеров обеих клеточных линий (10%) (ни-Т, ни-В-ОЛЛ);
3) Т-ОЛЛ (20%);
4) В-ОЛЛ (5%) (ни-Т-ОЛЛ). Наиболее благоприятный прогноз отмечается при «общем» ОЛЛ, худший – при Т-ОЛЛ, самый плохой – при В-ОЛЛ.
В свою очередь, ни-Т-ОЛЛ и Т-ОЛЛ подразделяются на ряд иммунофенотипических подвариантов внутри обеих групп в зависимости от того или иного набора антигенов, экспрессируемых подавляющим большинством опухолевых клеток внутри цитоплазмы или на ее поверхности, и определяющих возможный конечный уровень дифференцировки опухолевого клона.
Таблица 5
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 317; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!