Метод 1 – окраска ретикулоцитов в пробирке бриллиантовым крезиловым синим.
Перед употреблением готовят в пробирке рабочий раствор бриллиантового крезилового синего из расчета на каплю 1% раствора оксалата калия 4 капли раствора краски бриллиантового крезилового синего. В краску добавляют 0,04 мл крови (две пипетки до метки0,02). Смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 30 минут. Затем снова перемешивают и готовят тонкие мазки.
Метод 2 - окраска ретикулоцитов в пробирке азуром II.
В пробирку помещают 0,05 мл раствора краски азур II и 0,2 мл крови. Смесь тщательно перемешивают и оставляют на 20 – 30 минут.
Снова перемешивают и готовят тонкие мазки.
Метод 3 - окраска ретикулоцитов в пробирке азуром I.
В пробирку помещают 0,3 – 0,5 мл раствора краски азур I и 5 – 6 капель крови пипеткой от аппарата Панченкова. Пробирку закрывают резиновой пробкой, смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 1 – 1,5 часа (ретикулоциты окрашиваются лучше при экспозиции 1,5 – 3 часа). Перемешивают и готовят тонкие мазки.
В настоящее время в продаже имеются готовые красители для ретикулоцитов заводского изготовления. Окраска ретикулоцитов с их помощью производится согласно прилагаемой инструкции.
Подсчет ретикулоцитов
Приготовленные одним из указанных выше способов мазки микроскопируют с иммерсионным объективом. В мазке ретикулоциты и эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция в ретикулоцитах – в синий (при окраске азуром II и бриллиантовым крезиловым синим) или синевато-фиолетовый цвет (при окраске азуром I).
|
|
|
Интерпретация результатов
Для исследования были отобраны 20 образцов крови для определения уровня глюкозы и гликозилированного гемоглобина с «Сахарным диабетом» в анамнезе у пациентов отделения «Эндокринология" ГБУЗ «навлинскаяя ЦРБ»для дальнейшего исследования значения гемоглобина, ретикулоцитов, эритроцитов. Исследования проводились на базе клинической лаборатории.
Для точной интерпретации результатов необходимо вспомнить нормальные показатели: глюкозы- 3,3-5,5ммоль/л и гликозилированного гемоглобина от 4% до 5,9% .
Материал для исследования уровня глюкозы и гликозилированного гемоглобина: негемолизированная кровь.
Для исследования данных показателей кровь берут натощак. Желательно сдавать кровь до 10 - 10.30.часов утра. За день до сдачи анализа по возможности исключить тренировки и стрессы, за полчаса до забора крови желательно находится в спокойном состоянии.
На основании результатов исследования20 образцовкрови была выявлена группа образцов с повышенным содержанием глюкозыгликозилированного гемоглобина. Результаты исследования представлены в таблице 2.1.
|
|
|
Таблица 2. 1. - Показатели уровня глюкозы и гликозилированного гемоглобина у группы исследуемых пациентов.
| № образца крови | Уровень глюкозы в крови, ммоль/л | Уровень гликозилированного гемоглобина, % |
| 1 | 3,6 | 5,4 |
| 2 | 6,2 | 6,8 |
| 3 | 6,0 | 7,9 |
| 4 | 5,2 | 3,7 |
| 5 | 3,4 | 5,1 |
| 6 | 4,8 | 6,7 |
| 7 | 4,7 | 4,6 |
| 8 | 3,8 | 5,3 |
| 9 | 5,6 | 6,8 |
| 10 | 6,5 | 6,6 |
| 11 | 5,3 | 5,5 |
| 12 | 3,2 | 7,1 |
| 13 | 5,8 | 6,7 |
| 14 | 5,3, | 6,0 |
| 15 | 5,8 | 6,9 |
| 16 | 4,4 | 5,6 |
| 17 | 3,2 | 4,6 |
| 18 | 6,6 | 7,8 |
| 19 | 4,9 | 4,4 |
| 20 | 3,3 | 4,5 |
Анализируя полученные результаты таблицы 2.1 в ходе исследования образцов крови с нормальным уровнем глюкозы для определения значений гликозилированного гемоглобина можно заметить следующее:
1) У 1,2,3,5,6,7,8,11,14,16,17,18,20 образцов крови уровень глюкозы и уровень гликозилированного гемоглобина, находятся в диапазоненормальных величин.
2) У образцов 2 , 3 ,9, 10,12,13,15,18нормальный показатель глюкозы, но уровень гликозилированного гемоглобина находится выше нормы. Можно предположить, что на следствие изменения гликозилированного гемоглобина повлияла, длительная гипергликемия.
В определении уровня гемоглобина, уровня эритроцитов и процентный уровень ретикулоцитов в крови с повышенным содержанием глюкозы были исследованы 8 образцов крови.
|
|
|
Таблица 2.2. Определение уровня эритроцитов, гемоглобина и ретикулоцитов в образцах с повышенным содержанием глюкозы.
| Номер образца крови | Пол | Уровень глюкозы в крови, ммоль/л | Уровень гемоглобина г/л | Уровень эритроцитов
 /л
| Уровень ретикулоцитов % |
| 2 | ж | 6,2 | 158 | 5,1 | 1,3 |
| 3 | м | 6,0 | 171 | 4,7 | 1,4 |
| 9 | м | 5,6 | 113 | 5,8 | 1,6 |
| 10 | ж | 6,5 | 117 | 0,1 | 20,8 |
| 12 | ж | 3,2 | 161 | 4,2 | 20,6 |
| 13 | м | 5,8 | 156 | 4,5 | 4,6 |
| 15 | ж | 5,8 | 154 | 6,1 | 1,4 |
| 18 | м | 6,6 | 135 | 6,5 | 1,3 |
Анализируя полученные результаты были выделены 3 группы:
1) у 2,13,18 исследуемых анализов крови уровень гемоглобина в норме, уровень эритроцитов в норме, уровень ретикулоцитов в норме.
2) у 3 и 12 уровень гемоглобина повышен, уровень эритроцитов повышен, уровень ретикулоцитов повышен, можно предположить что повышение глюкозы не носит постоянный характер и системы гемопоэза компенсирует недостаток гемоглобина и эритроцитов возникший вследствие повышения гликозированного гемоглобина.
3) у 9,10,15 уровень гемоглобина повышен, уровень эритроцитов понижен, уровень ретикулоцитов повышен. Можно предположить, что уровень глюкозы повышается довольно часто и некомпенсированн медикаментозно в следствие этого возникают признаки анемии, а именно снижение гемоглобина и повышение эритроцитов и ретикулоцитов.
|
|
|
Наглядно выводы, сформулированные при анализе результатов исследования проб крови у пациентов с повышенным уровнем глюкозы можно рассмотреть на диаграмме 2.1.
Диаграмма 2.1.- Зависимость уровня глюкозы и количества ретикулоцитов
Рассмотрев данную диаграмму 2.1 можно заметить, что уровень глюкозы повышается в следствии углеводного обмена. Показателем длительности некомпенсированного сахарного диабета является высокий уровень гликозилированного гемоглобина. При не частых повышениях данных показателей крови система гемопоэза восполняет необходимое для протекания физиологических процессов количество эритроцитов, наполненных гемоглобином - белком переносчиком кислорода к тканям и органам. Исходя из выше сказанного при стойком повышении в крови глюкозы и гликозилорованного гемоглобина происходит повышение ретикулоцитов как предшественников эритроцитов.
Дата добавления: 2018-11-24; просмотров: 1375; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!