Исходные продукты для приготовления питательных сред.
Практическая работа 2
Тема «Проведение бактериологического метода исследования с изучением морфологических, культуральных и биохимических свойств бактерий»
Алгоритм бактериологического исследования состоит из:
1. Первичной микроскопии исследуемого материала (необязательный). Дает ориентировочные представления о наличии в исследуемом материале микроорганизмов, иногда позволяет провести их первичную идентификацию. Имеет диагностическое значение если микроб имеет типичную морфологию или выявляется специальным методом окраски.
2. Первичного посева – получения изолированных колоний (чистой культуры). Создаются условия для благоприятного роста одного вида/рода бактерий. После инкубации первичного посева (24-48 часов)в термостате (37 градусов) формируются колонии бактерий (видимое невооруженным глазом на поверхности плотной питательной среды изолированное скопление бактерий одного вида). Изучение колоний проводится по определённой схеме и заканчивается микроскопией окрашенного по методу Грама мазка и пересевом её на скошенный агар.
3. Накопление чистой культуры. Пересев на скошенный агар обеспечивает накопление большого количества чистой культуры для её последующего изучения.
4. Идентификация выделенной культуры о ее углублённое изучение. Для видовой идентификации бактерий изучают особенности их метаболизма (углеводного и белкового обмена) и антигенного строения.
|
|
|
В лабораторной практике применяют три вида идентификации:
· Биохимическая (определение сахаролитической и протеолитической активности).
· Сероидентификация – по антигенному строению.
· Фагоидентификация – по специфическим видовым и типовым бактериофагам.
Алгоритм описания колоний
Изучение особенностей роста на питательной среде в чашках Петри включает:
· Общую характеристику роста (однородный или неоднородный; обильный или скудный рост);
· Форма (правильная или неправильная);
· Размер (точечный – до 1мм, мелкий – 1-2 мм, средний – 2-4 мм, крупный – 4-6мм)
· Прозрачность (прозрачная, полупрозрачная, непрозрачная);
· Высота (плоская, плоско-выпуклая, выпуклая, с вогнутым центром);
· Поверхность (гладкая, шероховатая; блестящая, матовая);
· Цвет (бесцветная или пигментированная);
· Характер края (ровные или неровные);
· Структура (однородная, неоднородная; зернистая, гирозная).
Для культивирования микроорганизмов (выращивание в искусственных условиях in vitro) необходимы особые субстраты - питательные среды. На средах микроорганизмы осуществляют все жизненные процессы (питаются, дышат, размножаются и т. д.), поэтому их еще называют средами для культивирования.
|
|
|
Питательные среды
Питательные среды являются основой микробиологической работы, и их качество нередко определяет результаты всего исследования. Среды должны создавать оптимальные (наилучшие) условия для жизнедеятельности микробов.
Где выращивают бактерии?
Чашка Петри — лабораторная посуда, имеет форму невысокого плоского цилиндра, закрывается крышкой подобной же формы, но несколько большего диаметра. Применяется в биологии.
Чашка Петри обычно изготавливается из прозрачного стекла или пластмассы (прозрачный полистирол) и может иметь самые различные размеры. Наиболее часто используемые варианты имеют диаметр порядка 50 — 100 мм и высоту около 15 мм.
На чем выращивают бактерии?
Питательные среды – это
искусственные среды того или иного состава, предназначенные для культивирования микробов и простейших в лабораторных условиях. Впервые были введены для изолирования отдельных видов бактерий Р. Кохом в 1881 году.
Благодаря их применению имеется возможность не только выделить микроб в чистом виде, но и постоянно поддерживать его в культуре, в лаборатории, что облегчает его всестороннее изучение. Каждый микроб из числа изученных до настоящего времени способен жить и размножаться в искусственных условиях.
|
|
|
Требования, предъявляемые к питательным средам.
Питательные среды должны:
• Содержать необходимые для питания микроба питательные вещества.
• Иметь реакцию рН, оптимальную для выращиваемого вида микроба.
• Иметь достаточную влажность, так как микробы питаются по законам диффузии и осмоса.
• Обладать изотоничностью.
• Быть стерильными, обеспечивая тем самым возможность выращивания чистых культур микробов.
Исходные продукты для приготовления питательных сред.
1) Продукты животного происхождения (мясо, рыба, казеин, молоко, яйца, кровь и т. д.).
2) Продукты растительного происхождения (картофель и др.).
3) Органические и неорганические соединения определенного химического состава.
Питательные среды, приготовленные из продуктов растительного и животного происхождения, несмотря на то, что они не могут быть стандартны и не имеют определенного химического состава, находят широкое применение в практике микробиологии. Синтетические питательные среды, составленные из химических соединений, используют преимущественно для изучения обмена веществ микробной клетки.
|
|
|
Питательные среды подразделяются на:
Среды общего назначения: мясо-пептонные: агар, бульон, питательный желатин. Среды общего назначения используют для выращивания многих патогенных микробов и применяют в качестве основы для приготовления специальных сред, добавляя к ним кровь, сахар, молоко, сыворотку и другие ингредиенты, необходимые для размножения того или иного вида микроба.
Элективные (избирательные) среды. Принцип создания элективных питательных сред основан на удовлетворении основных биохимических и энергетических потребностей того вида микроба, для культивирования которого они предназначены. Определенный состав и концентрация питательных микроэлементов, ростовых факторов при строгом значении рН обеспечивают оптимальные условия для выращивания одного или нескольких видов микроорганизмов.
Дата добавления: 2020-12-22; просмотров: 50; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!