Метод иммунофлюоресценции (ИФ).
Этот метод выполняется с использованием люминесцентной микроскопии. Относительно свечения микроскопических объектов в литературе используют термины «люминесценция» и «флюоресценция» как однозначные. Вторичная (наведенная) люминесценция достигается путем обработки исследуемого материала химическим красителем (флюорохромом). В зависимости от применяемого красителя и его концентрации достигается свечение объекта от желто-зеленого до
красно-оранжевого. Люминесцентная микроскопия выполняется с иммерсионным нефлюоресцирующим маслом.
ИФ используется для диагностики антигена возбудителя в биологическом материале, в котором содержится возбудитель. Для выявления антигенов микоплазм, уреаплазм, хламидий материал для исследования является соскоб эпителия слизистой оболочки уретры, цервикального канала. Исследуемый материал, содержащий антиген, наносится на предметное стекло, фиксируется спиртом и обрабатывается гомологичной сывороткой, меченой флюорохромом. При связывании антигена с антителом появляется яркое свечение, обнаруживаемое с помощью люминесцентной микроскопии.
- зависимости от способа окраски различают прямой
- непрямой методы ИФ. Прямой метод ИФ: на препарат
100
наносится люминесцирующая сыворотка, после соединения с антигенами меченные флюорохромом антитела дают свечение. Непрямой метод ИФ проводится
|
|
|
в два этапа. Первый этап: на препарат наносится
нефлюоресцирующая гомологичная сыворотка, комплексы антиген-антитело не флюоресцируют. Второй этап: на препарат наносится флюоресцирующая сыворотка против полученных комплексов антиген-антитело.
Преимущества ИФ:
- выполняются единичные исследования;
- простота и высокая скорость выполнения;
- возможность применения для скрининга, экспресс-диагностики;
- можно применять для исследования микропрепаратов из парафиновых блоков для диагностики внутриутробных инфекций.
Недостатки ИФ:
- низкая чувствительность и специфичность;
- субъективность в оценке мазка;
- невозможность документирования;
- точность диагностики зависит от качества взятия материала (обязательны клетки цилиндрического эпителия);
- низкая информативность для контроля излеченности, так как флюоресцируют антигены нежизнеспособных микроорганизмов.
101
Приложение 7
Культуральный метод.
Этот метод основан на выделении возбудителей в чувствительной культуре клеток. Жесткие требования предъявляются к хранению и транспортировке клинического материала, который сразу после забора помещают в транспортную среду. После 24 часов хранения при температуре + 4°С или при – 20-70°С вероятность роста микроорганизмов на культуре клеток резко снижается. Для проведения этого исследования
|
|
|
требуются: культура клеток, ростовая среда, изолирующая и транспортная среды.
Преимущества культурального метода:
- оценка эффективности антибактериального лечения, так как на культуре клеток растут только жизнеспособные микроорганизмы;
- определение чувствительности и резистентности бактерий (хламидий) к антибактериальным препаратам;
- индивидуальный подбор химиопрепаратов.
Недостатки культурального метода:
- особенности транспортировки и хранения клинического материала;
- невозможность длительного хранения биоматериала;
- необходимость дополнительно использовать метод ПЦР для идентификации возбудителя;
- высокая стоимость и трудоемкость методики;
- реальный срок получения результатов – 7 дней.
Для более точной диагностики необходимо в
102
сопоставлении с клиническими данными использовать одновременно не менее двух методов лабораторной диагностики: один – для определения специфических антител, второй – для выделения возбудителя, определения его антигена или ДНК.
|
|
|
Эталоны ответов на тестовые задания
1. В
2. Г
3. А
4. Г
103
5. В
6. везикулярной сыпи с геморрагическим компонентом на коже и/или слизистых оболочках
7. белесоватые узелки диаметром 1-3 мм на слизистой оболочке задней стенки глотки, миндалинах, конъюнктиве
8.
2, 4, 5 - А 1,3 – Б
9.
1. Г, 2. А, 3. Б, 4. В
10. Г
11. В
12. Б
13. Неверно
14. Неверно
15. Верно
16. Неверно
17. В
18. Б
19. А
20. В
21. Б, Г, Д
22. Б, Г, Д
23. А, Г
24. А, Г
104
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Безнощенко Г.Б., Долгих Т.И., Кривчик Г.В. Внутриутробные инфекции (вопросы диагностики и врачебной тактики)._М.: Медкнига; Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2003.- 88 с.
Внутриутробная инфекция: учеб. пособие / Е.И.
Барановская [и др.]. – Мн.: Тесей, 2005. – 112 с.
Григорьев К.И. Внутриутробные и неонатальные инфекции // Медицинская помощь. – 2004.- №5.- С. 7-15.
Рогожин Д.В., Ожегов А.М., Зворыгин С.А, Листериоз у детей // Педиатрия. – 2004.- №4.- С. 71-76.
|
|
|
Кудашов Н.И. Цитомегаловирусная инфекция у новорожденных // Лечащий врач. – 2006.- №3. – С. 72-78.
Малкова Е.М., Гавалов С.М., Гришаева О.Н. Хламидийная инфекция у новорожденных детей // Под ред. член-корр. РАМН, проф. С.М. Гавалова.-Новосибирск, 2005.- 48 с.
Орехов К.Е. Внутриутробные инфекции и патология новорожденных.- Г.: Медпрактика, 2002.- 252 с.
Перинатальные инфекции: Практич. пособие /Под ред. А.Я. Сенчука, З.М. Дубоссарской._ М.: МИА, 2005.-318 с.
105
Протоколы диагностики, лечения и профилактики внутриутробных инфекций у новорожденных детей. Издание 2-е, переработанное и дополненное.- М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2002.- 104 с.
Савичева А.М. Урогенитальная хламидийная инфекция у женщин: клиника, диагностика и лечение // Практическая гинекология (клинические лекции) / Под ред. В.И.Кулакова, В.Н. Прилепской. - М.: МЕДпресс-информ, 2001.- С. 200-207.
Фризе К., Кахель В. Инфекционные заболевания беременных и новорожденных: Пер. с нем. – М.: Медицина, 2003. – 424 с.
106
Дата добавления: 2019-03-09; просмотров: 258; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!