Лабораторная диагностика трихинеллеза
Лабораторная диагностика трихинеллеза проводится:
у лиц с подозрением на трихинеллез - методом иммуноферментного анализа (ИФА-исследование) в соответствии с действующими методическими указаниями или, в исключительных случаях, методом биопсии мышечной ткани;
если трихинеллы найдены в мясе, с употреблением которого в пищу связывается данное заболевание, то диагноз последнего может считаться бесспорным и применение биопсии мышечной ткани больного излишне. Исследование мяса (остатков мясных продуктов) по эпидемиологическим показаниям проводится в испытательных лабораторных центрах Роспотребнадзора и Госветнадзора в соответствии с действующими нормативными документами;
при судебно-медицинской экспертизе, когда исследуются гистологические препараты секционного материала с подозрением на трихинеллез.
При исследовании мышечной ткани на наличие возбудителей трихинеллеза используются два метода:
трихинеллоскопии;
переваривания в искусственном желудочном соке.
Биопсия мышечной ткани (поперечнополосатых мышц)
Хирургическим путем или на секции получают биопсию мышечной ткани двуглавой или икроножной мышц (ближе к сухожилию). Материал помещают в стерильную стеклянную посуду с физиологическим раствором.
Лабораторное исследование проводят сразу после биопсии. Если лабораторное исследование откладывается на какой-то срок, пробы мышц помещают в консервант или замораживают. Консервантом может служить концентрированный (30-50%-й) раствор хлорида натрия.
|
|
|
Метод трихинеллоскопии
Необходимые реактивы и оборудование
Стеклянный компрессорий
Стереоскопический микроскоп (объектив 
8, 10; окуляр 7, 10)
Препаровальные иглы
Термостат
Ножницы Купера, изогнутые
Скальпель
Эмалированные кюветы
Чашки Петри
Пипетки
Магнитная мешалка
Соляная кислота концентрированная
Пепсин кристаллический
Раствор пепсина 3%-й
Дистиллированная вода
Аппарат Бермана
Сито из мельничного газа (N 26)
Химический стакан 200,0 мл
Стеклянные палочки
Пробирки центрифужные с крышкой
Весы
Центрифуга
Компрессорная трихинеллоскопия
Подготовка к исследованию
1) Каждую пробу мышц перед исследованием помещают в чашки Петри, расположенные на эмалированных кюветах, куда помещают и необходимый инструментарий (ножницы, пинцеты, препаровальные иглы), предметные стекла. Работа проводится с соблюдением правил техники безопасности.
2) Из каждой пробы мышц (от одного больного) делают срезы строго вдоль мышечных волокон дельтовидной, двуглавой или икроножных величиной с "овсяное зерно".
|
|
|
3) Мышечные срезы помещают в 5%-й раствор едкой щелочи и выдерживают до исследования в течение 1 ч при комнатной температуре или 10 мин в термостате при температуре 45 °С.
4) Срезы с обызвествленными капсулами, где личинки не просматриваются, предварительно помещают в 5-10%-й раствор соляной кислоты на 1-2 ч, чтобы растворить известь, затем помещают в глицерин или молочную кислоту на 20-30 мин в условиях термостата при 37 °С (для просветления).
5) Срезы переносят в компрессорий и микроскопируют.
6) Каждый срез помещают на отдельный квадрат нижнего стекла компрессория (всего в компрессории 24 квадрата) и сдавливают верхним стеклом путем завинчивания закрепляющих винтов компрессория.
7) Микроскопируют все срезы, применяя стереоскопический микроскоп (увеличение: объектив 8 или 10, окуляр 7 или 10).
Примечание. Диагностика личинок трихинелл бывает затруднена, если срезы толстые или кусочки мышц подсохли, или в срезах обильные включения жира, или пробы мышц фиксированы формалином, или личинки находятся в обызвествленных капсулах.
В этих случаях:
- срезы мышц можно поместить в 5%-й раствор едкой щелочи и выдержать в течение 1 ч при комнатной температуре или 10 мин в термостате при температуре 45 °С;
|
|
|
- срезы с обызвествленными капсулами, где личинки не видны, помещают предварительно в 5-10%-й раствор соляной кислоты на 1-2 ч, чтобы растворить известь, затем помещают в глицерин или молочную кислоту для просветления.
Дата добавления: 2019-02-12; просмотров: 348; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!